双荧光素酶报告基因系统验证hsa-miR-326对BCL2L1、BAK1的靶向调控

目的构建psiCHECK2荧光素酶报告基因载体,验证hsa-miR-326对BCL2L1和BAK1表达的影响。方法设计合成包含与hsa-miR-326结合序列及其突变型序列的BCL2L1和BAK1基因片段,构建荧光素酶报告基因载体,转染293T细胞,通过荧光素酶活性变化观察hsa-miR-326对BCL2L1和BAK1表达的影响。结果 hsa-miR-326对BCL2L1组的荧光表达有非常显著的抑制作用(P<0.01);而对BCL2L1-mut、BAK1和BAK1-mut组的荧光表达没有显著的抑制作用(P>0.05)。结论 hsa-miR-326可以调控BCL2L1的表达,但对BAK1的表达未见影响,推测hsa-miR-326可能通过下调BCL2L1参与血小板的凋亡。