英国大学空间落点的“小镇情结”与“镇学融合”机制研究

中国的大学与英国的大学在空间落点上存在明显的差异。中国的知名大学往往坐落于特大或超大城市,老校区通常占据主城区的位置;而英国的一些老牌知名大学很多落点在小镇,且小镇校区沿用至今。文章对比分析英国大学和中国大学分布城市的人口数量和面积,呈现英国大学落点的“小镇情结”,通过回溯英国大学最初建校和选址的历史,探求英国大学落点钟情小镇的缘由,剖析“镇学融合”给英国大学和小镇的发展带来的优势,为未来中国新大学校区选址提供参考。

利用CRISPR/Cas系统构建在XRCC6内源基因插入Flag标签序列的HeLa细胞系

目的:利用CRISPR/Cas系统在XRCC6基因5′端插入Flag标签序列,筛选XRCC6-Flag稳定表达的宫颈癌细胞(He La)株。方法:根据Gen Bank中XRCC6基因序列,设计XRCC6基因敲入的g RNA序列,构建入p Cas-Guide载体中,获得p Cas-XRCC6载体;设计XRCC6基因的同源臂序列,利用搭桥PCR方法将同源臂和Flag标签序列作为模板进行扩增,得到供体DNA片段,并将其克隆到p Back Zero-T表达载体上,获得p XRCC6-Donor载体;将上述2个载体共转染He La细胞,采用PCR、Western印迹等方法检测和筛选Flag标签序列插入XRCC6基因5′端的细胞株。结果:构建了p Cas-XRCC6和p XRCC6-Donor载体,筛选获得3株XRCC6-Flag稳定表达细胞株。结论:构建了XRCC6-Flag稳定细胞株,为研究XRCC6基因及其蛋白产物的生物学功能奠定了基础。

最小生态安全距离的生态学意义及模型

最小生态安全距离的提出最初是为解决城镇化进程中的环境问题,但其在生态安全格局构建和生物多样性保护等生态学主题上同样具有重要意义。本文基于生态安全理论、大气污染扩散与控制理论以及生态城市建设等基础理论,从多个角度深入挖掘最小生态安全距离的生态学意义和内涵,并结合大气污染扩散模型和最小累积阻力模型,探索最小生态安全距离的测算方法与应用前景。研究表明:1) 最小生态安全距离旨在满足生态系统良性循环、生态系统服务功能正常运转以及环境容量不超载,作为复合生态系统的城市之间或城市各功能单元之间在社会经济活动空间上必须间隔的最小距离;2) 该距离受区域资源环境承载力、环境本底和区域发展目标的约束;3) 最小生态安全距离可综合应用于城市生态安全格局构建、生物多样性保护、城市生态规划和大气污染控制等领域,其在区域生态安全格局构建和减缓城市交叉复合污染方面前景更加广阔。最小生态安全距离的确定是一个综合性的建模求解过程,需要多学科理论和技术的支持,并通过大量丰富的实证研究,才能拓展和深化最小生态安全距离的生态学意义和内涵。

坚持环境健康创新驱动 共筑幸福美好未来——成都市环境健康先行区建设实践

随着人民对美好生活的向往越来越强烈,公众对环境质量的获得感逐步提升。降低环境有害因素对健康的影响,开展环境健康试点管理工作,持续优化和改善人居环境,实现生态价值转化,既是污染防治攻坚战成果的体现,更是“绿水青山就是金山银山”的重要内涵。文章围绕成都市获批国家环境健康试点以来开展的重要意义、系列工作及取得的成效展开论述。

利用CRISPR/Cas方法建立RNaseL基因稳定敲除细胞株

目的利用CRISPR/Cas9技术建立人RNase L基因稳定敲除的细胞株。方法根据Gen Bank中RNase L基因序列,设计RNase L敲除的小指导RNA(sgRNA)序列,将其克隆到p Cas-Guide真核表达载体中,获得p Cas指导RNA(gRNA)载体;设计供体DNA的同源臂序列,通过搭桥PCR将左同源臂、潮霉素B抗性基因和右同源臂扩增成为一条片段作为同源重组的修复模板,并将其克隆到p Back Zero-T表达载体上,获得p Back Zero-T-RNase LK载体。将上述两个载体共转染HEK293细胞,用潮霉素B筛选,通过Western印迹和DNA测序等技术验证RNase L从基因组上敲除。结果与结论成功构建了载体p Cas-gRNA和p Back Zero-T-RNase LK,Western印迹和DNA测序结果表明,成功获得5株RNase L缺失的细胞株,为探讨RNase L的生物学功能和研究其分子机制奠定了基础。

血浆miRNA快速制备方法建立和优化

目的建立并优化用于血浆microRNA(miRNA)检测分析的miRNA快速提取方法。方法使用含表面活性剂的提取液和加热方法提取血浆miRNA,采用RNA酶抑制剂抑制RNA降解,利用检测miRNA的poly(A)加尾、逆转录反应和实时定量PCR法检测血浆miRNA表达水平,评估方法的可行性。结果成功建立了提取液和加热提取miRNA一步法,实时定量PCR结果表明该方法具有良好的扩增特异性、可重复性,方法稳定可靠。结论提取液和加热一步法简便、快速、低成本,血浆用量少,为临床血浆miRNA检测分析提供了一种新的技术方法。