抗RA54自身抗体的识别及其临床意义

本文应用免疫印迹技术（ＩＢＴ），以兔胸腺的盐水提取物（ＲＴＥ）为抗原，在类风湿关节炎（ＲＡ）患者血清中检测到与ＲＴＥ中５４ｋＤ蛋白多肽反应的一种新自身抗体，暂命名为抗ＲＡ５４。通过对３６５例各种不同风湿性疾病患者的检测，观察到抗ＲＡ５４主要见于ＲＡ组，阳性率为１４．５％，对ＲＡ的诊断有高度特异性（Ｐ＜０．００１）。

自动蛋白印迹仪在检测抗可提取核抗原多肽抗体谱中的应用

目的探讨自动蛋白印迹仪在抗可提取核抗原(ENA)多肽抗体谱的检测质量和性能。方法使用相同的免疫印迹法试剂盒,在同一条件下,分别用自动蛋白印迹仪和手工法检测血清抗ENA抗体。用自动蛋白印迹仪对已知阴性和阳性的血清标本各重复测定10次,以评价仪器检测的批内差异。同时用已知阴性和阳性标本各1份交替排列,各测5次,观察仪器是否存在标本间交叉污染情况。结果使用自动蛋白印迹仪进行重复检测10次的结果均一致,阴性和阳性标本之间检测结果无交叉污染,仪器与手工法的检测结果一致。结论自动蛋白印迹仪检测抗ENA多肽抗体重复性好,无交叉污染,可供临床实验室使用。

聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳检测血清肌酸激酶同工酶

聚丙烯酰胺凝胶板电泳检测肌酸激酶同工酶具有高分辨率的性能。由于在阴极的电泳缓冲液中加入已糖激酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶,使偶联酶均匀地分布入凝胶中,提高了四唑盐显色系统的敏感性,可灵敏地检测到CK-MB,同时亦有效地检测到CK-MM亚带(Sub-band),用光密度扫描仪可计算出CK同工酶的含量和CK-MM_3与CK-MM_1的比值。且能作为早期诊断急性心肌梗塞的一种检测方法。

肌酸激酶MB同工酶快速放射免疫测定诊断急性心肌梗塞

采用碘标记肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)、CK-MB标准品和肌酸激酶BB同工酶(CK-BB)抗血清建立CK-MB快速放射免疫测定。灵敏度为0.7ng/ml,测定范围为0.7~50ng/ml。正常值为2.5±0.8ng/ml(83例)。以CK-MB>5.0ng/ml为阳性,心肌梗塞后8小时阳性率为86.4%(男性)和83.3%(女性),24小时阳性率均100%。特异性100%。

一种国产抗环瓜氨酸肽抗体酶联免疫吸附试验检测试剂盒的评价

近年来，国内外均有研究报道抗核周因子（APF）、抗角蛋白抗体（AKA）和抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA）的共同抗原决定簇环瓜氨酸肽（CCP）对类风湿关节炎（RA）具有较高的特异性和敏感性，这对早期诊断RA具有重要意义，被视为RA新的血清学指标。目前，开展抗CCP抗体检测项目的国内医院用的都是国外产品，因国外产品价格偏高。限制了其广泛使用。

抗突变型瓜氨酸波形蛋白检测在类风湿关节炎中的意义

目的:评价抗突变型瓜氨酸波形蛋白(抗MCV)在类风湿关节炎(RA)诊断中的价值。方法:检测225例RA患者、77例其他关节炎患者以及80例正常对照血清中抗MCV、抗CCP和RF-IgM的水平,比较抗MCV、RF-IgM、抗CCP及抗MCV和抗CCP联合检测在类风湿关节炎的诊断中的意义。结果:①抗MCV、RF-IgM、抗CCP敏感性和特异性分别为74.67%、91.71%;77.78%、91.71%;65.33%、94.27%,抗MCV与抗CCP联合检测可明显提高诊断特异性,对RA诊断的敏感性和特异性分别为60.89%、99.36%;②抗MCV与抗CCP检测对RF阴性RA病例的诊断有一定价值(30%,26%);③抗MCV、抗CCP与RF-IgM之间均显著相关(P<0.01);④抗MCV与年龄、病程、功能分级、压痛关节数、ESR、CRP、X线分期及晨僵持续时间存在相关(P<0.01或P<0.05),而与性别、双手平均握力和肿胀关节数无关(P>0.05)。结论:抗MCV对RA有较高的诊断价值,抗CCP和抗MCV联合检测对RA有高度特异性,抗MCV能一定程度反映RA的临床病情,可作为RA的血清学指标。

抗类风湿性关节炎54 kD和36 kD自身抗体在类风湿性关节炎诊断中的意义

目的：研究类风湿性关节炎（ＲＡ）中抗类风湿性关节炎５４ｋＤ和３６ｋＤ自身抗体（抗ＲＡ５４和抗ＲＡ３６）的情况。方法：应用免疫印迹技术（ＩＢＴ），在过筛和检测盐水可提取核抗原（ＥＮＡ）的自身抗体谱过程中，发现不仅可检测到抗ＲＡ５４，还可检测到抗ＲＡ３６自身抗体，并对１６９例各种不同风湿性疾病患者测定ＥＮＡ。结果：抗ＲＡ５４和抗ＲＡ３６自身抗体均仅见于类风湿性关节炎（ＲＡ）组（ｎ＝８０），阳性率分别为１５．００％和６．２５％。结论：抗ＲＡ５４和抗ＲＡ３６对ＲＡ的诊断有高度特异性，Ｐ＜０．００５和Ｐ＜０．０１。

P53上游凋亡调节蛋白在依托泊苷诱导直肠癌细胞凋亡中作用机制的研究

目的研究P53上游凋亡调节蛋白(PUMA)在直肠癌细胞HCT116中的表达及其关联性作用机制。方法应用依托泊苷诱导直肠癌细胞HCT116,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、流式细胞仪测定依托泊苷作用前后细胞HCT116的凋亡情况;蛋白印迹法(Western blot)测定PUMA、P53蛋白的表达水平。结果依托泊苷可抑制直肠癌细胞HCT116生长,并呈时效和量效关系;依托泊苷作用前后PUMA、P53蛋白表达水平逐渐升高。结论依托泊苷通过恢复P53的功能增加PUMA的表达,诱导肿瘤细胞调亡,起到抑制肿瘤生长的作用。

抗环瓜胺酸肽抗体和葡萄糖-6-磷酸异构酶抗原在类风湿性关节炎中的意义

目的探讨抗环瓜胺酸肽抗体(cyclic citrullinatedpeptide,CCP)和葡萄糖-6-磷酸异构酶抗原(glucose-6-phosphate isomerase,GPI)在类风湿性关节炎中的意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法检测90例RA患者血液中的CCP抗体,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)同样检测90例RA患者血液中的GPI。结果在GPI组Ⅳ期的RA阳性率明显高于Ⅰ期及Ⅱ期～Ⅲ期患者(P<0.05),有统计学意义。CCP组在Ⅰ期、Ⅱ期～Ⅲ期和Ⅳ期无统计学意义。GPI在ESR>100组的阳性率显著高于ESR<40和40≤ESR≤100组(χ2=10.045,P=0.007);抗CCP在各组的阳性率无显著性差异(χ2=4.432,P=0.109)。结论抗CCP抗体和GPI抗原在RA的诊断中都有重要意义。抗CCP抗体在RA的早期诊断和骨侵蚀方面更有价值,而GPI抗原特异性高于抗CCP抗体和RF,同时,它还能反映关节的炎症程度及RA的活动性。

强直性脊椎炎病人HLA B27等位基因与HLA A、B 抗原关系分析

目的 调查强直性脊椎炎（ Ａ Ｓ） 病人中 Ｂ２７ 等位基因与其它 Ｈ Ｌ Ａ Ａ、 Ｂ 抗原之间的关系，为 Ａ Ｓ 与 Ｂ２７ 关联机理提供线索。方法 Ｈ Ｌ Ａ Ａ、 Ｂ 抗原分型采用 Ｎ Ｉ Ｈ 标准微量淋巴细胞毒方法， Ｂ２７ 等位基因的检测采用聚合酶链反应／ 顺序特异的寡核苷酸探针方法。对上海地区６８ 例 Ａ Ｓ 病人和３１８ 例正常对照进行调查。结果 Ａ Ｓ 病人根据其所检定的 Ｂ２７ 等位基因主要可分为 Ｂ２７０４和 Ｂ２７０５ 二大组， Ｈ Ｌ Ａ Ａ１１ 的频率在 Ｂ２７０４ Ａ Ｓ 组要比正常对照组显著增高（ Ｐ＝ ００００ ９８ ， Ｐｃ＜ ０ ．０１） ，在 Ｂ２７０５ Ａ Ｓ 组则比正常对照组稍低（ Ｐ＞ ０ ．０５） ， Ｂ２７０４ 与 Ｂ２７０５ Ａ Ｓ 组之间差异也有统计学意义（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。结论 上海地区携带 Ｂ２７０４ 的 Ａ Ｓ病人与 Ｈ Ｌ Ａ Ａ１１ 抗原相关，提示 Ｂ２７０４ 与 Ｂ２７０５ 在 Ａ Ｓ 发病中的具体作用可能有所差异，或 Ｂ２７０４ 与 Ａ１１ 之间存在连锁不平衡。

强直性脊柱炎与TNFβ遗传多态性研究

关于强直性脊柱炎（ａｎｋｙｌｏｓｉｎｇｓｐｏｎｄｙｌｉｔｉｓ，ＡＳ）发病机制，除发现其与ＨＬＡＢ２７的强相关之外，很多证据提示还可能有其它遗传因素参与〔１〕。肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）β是一种参与免疫应答的细...

强直性脊柱炎与HLA-DPB_1等位基因关联的研究

强直性脊柱炎与ＨＬＡＤＰＢ１等位基因关联的研究蒋黎华范丽安杨珏琴姚芳娟周嘉陵许荣钟丽民强直性脊柱炎（ＡＳ）发病机制中有一个重要发现是其与人类白细胞抗原（ＨＬＡ）Ｂ２７之间的强相关，但其关联机制迄今不明。近年来有人认为，与某些肠本课题受国家自然科学基...

骨桥蛋白介导类风湿关节炎发病机制的初步研究

目的研究骨桥蛋白(OPN)介导类风湿关节炎(RA)发病和促进炎症因子产生的作用。方法采用实时定量聚合酶链反应(PCR)的方法检测OPN在RA患者外周血、关节液和关节滑膜组织和在T淋巴细胞亚群中的表达;从蛋白水平分析RA患者关节液中促炎症细胞因子和抗炎症细胞因子的分泌格局,分析OPN与细胞因子的相关性。结果RA患者关节滑液和关节滑膜组织的OPN表达远远高于外周血单个核细胞的OPN基因表达,CD4+T细胞OPN基因表达均高于CD8+T细胞;RA患者关节液中OPN的表达显著高于血清,白细胞介素(IL)-10,干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平比自身血清及对照组血清增高,IL-18和IL-12水平比正常对照组明显升高。结论OPN可能通过调节病灶部位的细胞因子的分泌来调控RA病理过程中的炎症反应。

葡萄糖6-磷酸异构酶检测在类风湿关节炎中的意义

为评价葡萄糖6-磷酸异构酶(GPI)在类风湿关节炎(RA)诊断中的价值。检测225例RA患者,77例其他关节炎患者以及80例正常对照血清中GPI、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体和RF-IgM的水平。比较GPI、RF-IgM、抗CCP及GPI和抗CCP联合检测在RA的诊断中的意义,发现:①GPI、RF-IgM、抗CCP敏感性和特异性分别为59.11%、84.71%;77.78%、91.71%;65.33%、94.27%,抗CCP与GPI联合检测可明显提高诊断特异性,对RA诊断的敏感性和特异性分别为45.78%、97.45%;②GPI与抗CCP检测对RF阴性RA病例的诊断有一定价值(14%、26%);③GPI、抗CCP与RF-IgM之间均显著相关(P<0.01);④GPI与病程、功能分级、肿胀关节数、压痛关节数、握力及晨僵持续时间存在相关(P<0.01或P<0.05),而与X线分期、年龄和性别无关(P>0.05)。因之,GPI对RA有较高的诊断价值,CCP和GPI联合检测对RA有高度特异性,GPI能一定程度反映RA的临床病情,可作为RA的血清学指标。

IgG—RF ELISA定量检测法的建立和应用

本工作以ＩｇＧＦｃ片断为靶抗原，用自制抗人ＩｇＧＦａｂ－ＨＲＰ标记物为第二抗休建立了定量测定血中ＩｇＧ－ＲＦ的ＥＬＩＳＡ。经验证，本法可测范围为１０－２５６０ＩＵ／ｍｌ，批内ＣＶ４．８％，ＲＸ ＵＪ 艰１．７％。