Ⅰ期肺腺癌VATS肺叶切除与亚肺叶切除预后比较

背景与目的美国国立综合癌症网络(National Comprehensive Cancer Network,NCCN)指南推荐,大部分可手术切除的肺癌首选电视辅助胸腔镜手术(video-assisted thoracoscopic surgery,VATS)解剖性肺叶切除。而研究证实肺段切除I期肺癌对肺功能的保护优于肺叶切除。目前,临床上对I期肺腺癌VATS亚肺叶切除能否获得与肺叶切除同等疗效仍未确定,现分析两种手术方式治疗I期肺腺癌预后的比较。方法回顾性研究2009年1月-2011年12月广州医科大学附属第一医院收治的I期肺腺癌患者,其中VATS肺叶切除222例,亚肺叶切除36例;对两组患者使用倾向评分匹配(propensity score matching,PSM),比较两组患者的临床病理特征及生存预后。结果两组匹配患者35例,匹配后VATS肺叶切除组与亚肺叶切除组的术后无病生存期(disease free survival,DFS)分别为49.3个月、42.7个月,差异无统计学意义(P=0.137);两组术后总生存期(overall survival,OS)分别为50.3个月、49.0个月,差异无统计学意义(P=0.122)。分期分层结果示,Ia期肺叶切除和亚肺叶切除两组术后DFS差异无统计学意义;而Ib期肺叶切除和亚肺叶切除两组术后DFS差异有统计学意义。结论 Ia期肺腺癌VATS亚肺叶切除的生存预后不亚于肺叶切除,Ib期肺腺癌建议选择VATS肺叶切除治疗。

MiR-21对肺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨miR-21对肺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法培养人肺癌细胞HBE、H460、A549和H446,将实验分为miR-21 inhibitor组、miRNA scramble组、空白对照组。荧光定量检测肺癌细胞H460、A549和H446 miR-21的表达;荧光定量PCR检测将miR-21 inhibitor和miRNA scramble转染到培养至对数生长期的人肺癌细胞H460后,对照组不转染的各组细胞的表达量;MTT实验检测转染miR-21 inhibitor后对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测转染miR-21 inhibitor后对细胞凋亡的影响;Western印迹检测与凋亡相关蛋白的活性。结果肺癌细胞H460、A549和H446miR-21的表达显著高于正常肺癌细胞HBE(P<0.01),由于肺癌细胞株H460的miR-21表达在3个细胞株中高表达,因此选择肺癌细胞株H460做后续研究;将miR-21 inhibitor组和miRNA scramble组转染到肺癌细胞株H460后,荧光定量PCR显示,miR-21 inhibitor组的miR-21的相对表达量为显著低于空白对照组(P<0.01),miRNA scramble组的相对表达量与空白对照组无差异(P>0.05);MTT结果显示,转染4 d后,miRNA scramble组与空白对照组细胞增殖率无差异(P>0.05),而miR-21 inhibitor组显著低于空白对照组(P<0.05),且随时间延长,细胞增殖率逐渐下降;流式结果显示,与空白对照组和miRNA scramble组比较,miR-21 inhibitor组细胞的凋亡率显著升高(P<0.01);Western印迹显示,miR-21 inhibitor组Cleaved-caspase-3和Bax蛋白的表达显著高于miRNA scramble组和空白对照组,而miR-21 inhibitor组Bcl-2蛋白的表达显著低于miRNA Scramble组和空白对照组(P<0.05)。结论下调miR-21的表达,可抑制肺癌细胞H460的生长,增加细胞的凋亡,其作用机制可能与Bcl-2家族的调节有关。

miR-24对心脏成纤维细胞生长和迁移的影响及机制研究

目的:探讨miR-24对心脏成纤维细胞的生长和迁移的影响及机制。方法:采用RT-PCR检测心肌细胞和心脏成纤维细胞中mi R-24的表达水平。在心脏成纤维细胞中转染mi R-24 mimics、mimics control、mi R-24 inhibitors、inhibitors control后,通过Western blot检测细胞中Col-1、α-SMA的表达,MTT检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Transwell小室检测细胞迁移能力。通过靶基因预测库预测mi R-24的靶基因,荧光素酶鉴定靶基因的正确性,并通过RT-PCR和Western blot检测转染后细胞中Furin的表达。结果:心脏成纤维细胞HEH2中mi R-24的表达水平与心肌细胞H9C2相比差异显著(P<0.01),心脏成纤维细胞中mi R-24表达上调。mi R-24 mimics组中Col-1、α-SMA的表达水平明显低于mimics control组(P<0.01)。mi R-24 mimics组中细胞OD值较mimics control组显著降低(P<0.01),mi R-24 inhibitors组中细胞OD值较inhibitors control组显著升高(P<0.01)。mi R-24 mimics组、mimics control组、mi R-24 inhibitors组、inhibitors control组细胞凋亡无显著性差异(P>0.05)。mi R-24 mimics组细胞迁移数目明显低于mimics control组,差异显著(P<0.01),mi R-24 inhibitors组细胞迁移数目高于inhibitors control组,差异显著(P<0.05)。mi R-24 mimics组细胞中Furin蛋白和m RNA水平明显降低,野生型Furin和mi R-24 mimics共转染的细胞中荧光素酶活性最低。结论:mi R-24在心脏成纤维细胞中高表达,通过靶基因Furin抑制心脏成纤维细胞合成Col-1、α-SMA,抑制心脏成纤维细胞增殖和迁移。