本草九代对乙型肝炎患者血清TNF含量的调节作用

本草九代对乙型肝炎患者血清ＴＮＦ含量的调节作用钟大光，李求是，焦顺昌，李涛，周严恒（解放军总医院免疫研究室，北京１００８５３）本草九代（即ＧＷｅ）是一种含有糖类和甙类的生物反应调变剂（ＢＲＭ），具有双向免疫调节功能，其不仅可以调节人体内环境，还可以提...

小鼠体内β-胡萝卜素抑制肿瘤生长的免疫调节作用

小鼠体内β┐胡萝卜素抑制肿瘤生长的免疫调节作用①解放军总医院南楼呼吸科，北京１００８５３②解放军第３０７医院药理科，北京１０００３９作者简介：钟大光，男，３２岁，助理实验师，主要从事临床免疫学研究；戴建业，男，３３岁，硕士，主治医师，主要研究内科临床...

心血管疾病的基因组学

心血管疾病是遗传易感因子和环境因子相互作用的结果。在过去几年里 ,对一些遗传性非动脉硬化病如肥大性心肌病、扩张性心肌病、长 QT综合征和原发性高血压的分子基础的认识有了很大进展。本文概述了有关这些疾病的基因多态性研究的最新进展 ,讨论了这些发现如何更新了疾病的诊断观念 ,提出了一些防止和减轻这些疾病进展的预防性措施 ,最后讨论针对基因改变引起特定细胞或分子功能改变的新药开发情况。

微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞脑内移植治疗偏侧帕金森病样大鼠及猴的实验研究

以右侧帕金森病样大鼠和猴为模型，分别将微囊化和非微囊化牛肾上腺嗜铬细胞（ＢＣＣ）及空微囊定向植入右侧脑纹状体内，观察动物行为、脑组织生化和组织学变化。结果表明：植入的ＢＣＣ能够在异种脑内存活、分泌多巴胺等单胺类物质并纠正帕金森病样大鼠及猴的异常行为。海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠微囊具有免疫保护作用，可明显地延长ＢＣＣ在异种宿主脑内的存活时间，作用超过１０个月。微囊化ＢＣＣ脑内移植有望成为治疗帕金森病的一种有效方法。

生物反应调变剂GWe抗肿瘤效应的实验研究

GWe是一种来自中药的有效成份。实验证明,小鼠实验性肿瘤模型经GWe灌胃后,肿瘤的生长明显受抑,瘤体重量下降;同时表现出分裂原反应性、天然杀伤细胞、淋巴因子活化的杀伤细胞活性增强,IL-2产生增加。但血清免疫复合物明显下降。GWe的抗癌效应可能与其刺激机体抗肿瘤细胞免疫机制,并纠正免疫调节紊乱有关。

生物反应调变剂GWe的免疫调节效应

发现一种来自中药的有效成份GWe具有明显的免疫调节作用。小鼠以GWe粗提液灌胃后,其分裂原反应性,LAK细胞毒活性及IL-2产生能力明显增强,同时其血清循环免疫复合物水平下降。GWe主要作用于T细胞,并对低反应状态的免疫反应有更为强烈的促进效应。

GWe治疗乙型肝炎病毒感染的疗效初报

GWe 是天然植物中提取的有效成份,临床试用表明,它对 HBV 感染有较强的治疗作用.服药2月后,e抗原阴转率达95%以上,表面抗原阴转率达70%左右.对e抗体则表现双向作用,同时使血清循环免疫复合物明显降低.

本草九代对慢性迁延性肝炎患者血清可溶性白细胞介素2受体水平的调节作用

用ELISA方法检测了29名慢性迁延性肝炎患者和18名健康献血员血清可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)水平,同时进行了血清IL-2与sIL-2R的相关分析。结果发现,正常人sIL-R为147±72.1u/ml,而慢性迁延性肝炎病人sIL-2R显著升高(210.5±84).GWe治疗3个月后sIL-2水平显著下降(185.8±79);同时发现IL-2水平与sIL-2R 有一定相关性。上述结果提示GWe具有调节机体IL-2功能的独特作用。

微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞脑内移植治疗偏侧帕金森病样猴的行为及神经生化效应

目的 :观察微囊化牛肾上腺嗜铬细胞 ( BCC)脑内移植对偏侧帕金森病 ( PD)样猴的行为和脑组织液中单胺类物质含量的影响 ;评价微胶囊的免疫隔离效果。方法 :以海藻酸钠 -多聚赖氨酸 -海藻酸钠 ( APA)为材料包裹BCC。右侧颈内动脉注射甲基 -苯基 -四氢吡啶 ( MPTP)诱发 PD样猴模型。将微囊化、非囊化 BCC或空微囊分别植入 PD样猴右侧尾状核和壳核 ,观察 PD样猴行为、尾状核及壳核微透析液中单胺类物质的变化。结果 :囊化组 ( n=6)和非囊化组 ( n=2 )移植后 1周开始 PD样猴左侧上肢活动明显增加 ,阿朴吗啡 ( Apo)诱发的异常旋转次数减少。非囊化组猴在移植 1～ 2个月后主动行为及 Apo诱发的异常旋转圈数逐渐退回到移植前水平 ;而移植囊化BCC6只 PD样猴的异常行为纠正效果 ,在观察的 7个月内仍存在。空囊组 ( n=1) PD样猴异常行为无变化。移植前 PD样猴右侧壳核、尾状核细胞外液中 DA、DOPAC和 HVA水平较左侧明显降低 ( P<0 .0 5 )。移植后 2、 7个月时 ,囊化组右侧壳核、尾状核细胞外液中 DA、DOPAC和 HVA水平较移植前明显提高 ( P<0 .0 5 ) ,但仍低于左侧的水平。结论 :PD样猴脑内移植 BCC后异常行为明显改善 ,微囊组的纠正效果明显优于非囊化组 ,其移植区 DA及其代谢产生明显增加。 APA微囊具有良好的免?

TECA型组合型人工肝系统治疗肝功能衰竭患者的初步临床观察

目的 :观察TECA型组合型人工肝支持系统 (HALSS)治疗急性肝功能衰竭 (ALF)患者的有效性和安全性。方法 :分离中国实验用小型猪肝细胞并培养于BALSS的生物反应器中。患者的血浆先经碳吸附或血浆置换后 ,循环流经BALSS的中空纤维管。每次治疗持续 6～ 7h。观察治疗前、后患者生理和血液生化指标的变化。结果 :从每只小型猪的肝脏平均可得到 (1.0～ 3.0 )× 10 10 个猪肝细胞 ,存活率 >85 %。TECA -HALSS治疗结束后 ,患者的血NH3、ALT、AST、TB、DB等水平明显降低 ;PTA水平升高 ;患者的神志由嗜睡或昏迷转为清醒。治疗中患者生命体征平稳、血电解质水平无明显改变。结论 :TECA -HALSS是一种能迅速、安全。

Gwe治疗对慢性肝炎患者血清补体溶解免疫复合物能力的影响

目的：探讨Ｇｗｅ口服液对慢性迁延型肝炎患者血清补体溶解免疫复合物能力（ＣＭＳＣ）的影响。方法：以健康献血员为对照，采用改良的天野氏比色法，测定１８例慢性迁延型肝炎患者服用Ｇｗｅ前后１个月左右的ＣＭＳＣ。结果：患者的ＣＭＳＣ下降为８４．３％（Ｐ＝０．０２），经Ｇｗｅ治疗后恢复正常。血清Ｃ３含量与其ＣＭＳＣ水平呈显著正相关（ｒ＝０．９２２，Ｐ＜０．０１），血清ＣＭＳＣ与Ｃ４之间无显著相关性。结论：Ｇｗｅ治疗后ＣＭＳＣ活性显著升高，有利于减少免疫复合物的沉积，阻断慢性肝炎的病理进程。

偏侧帕金森病样大鼠脑内微囊化牛嗜铬细胞移植实验

目的:观察偏侧帕金森病样大鼠微囊化牛嗜铬细胞脑移植后多巴胺及其代谢产物含量的变化,探讨大鼠异常旋转行为改善的可能途径。方法:实验于1999-01／12在解放军总医院老年医学研究所完成。选择 6-羟基多巴立体定向损毁右侧黑质诱发的偏侧帕金森病样雌性SD大鼠30只,随机分为2组,微囊组20只,对照组10只。微囊组大鼠水合氯醛麻醉后于右侧纹状体立体定向植入约200个以海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠为材料含牛嗜铬细胞的微胶囊,对照组大鼠未做脑内移植手术。观察移植术前后阿朴吗啡(0．5 mg／kg)诱发的大鼠旋转行为。利用微透析技术采取帕金森病样大鼠脑纹状体区细胞外微透析液,用高效液相电化学层析法测定对照组大鼠在6-羟基多巴损毁右侧脑黑质后 16周时及两组大鼠在牛嗜铬细胞移植后12周时脑纹状体区细胞外液中单胺类物质含量的变化。结果:纳入偏侧帕金森病样大鼠30只,实验过程中微囊组麻醉意外、脑出血、肢体癫痫样抽搐死亡4只,对照组脑出血、不明原因死亡2 只。进入结果分析微囊组和对照维分别为16和8只大鼠。①微囊组移植后1周开始阿朴吗啡诱发的异常旋转次数明显减少,作用持续6个月以上(F=37．89,P<0．01)。②对照组帕金森病样大鼠右侧脑黑质损毁后16周时右侧脑纹状体区细胞外液中3,4-二羟基苯乙酸和高香草酸水平较左侧明显降低(t=7．012,4．394,P<0．01),右侧脑上述物质含量仅为左侧脑的8％和12％。③移植后12周,微囊组帕金森病样大鼠右侧脑纹状体区细胞外液中3,4-二羟基苯乙酸、高香草酸和5-羟基吲哚乙酸水平较对照组显著升高(t=4．273,4.402,6．445,P<0．01),分别提高了 3．1,5.3和2．7倍。结论:帕金森病样大鼠黑质损毁侧纹状体区多巴胺类物质含量明显降低, 移植微囊化牛嗜铬细胞后含量升高,使帕金森病样大鼠的运动功能障碍明显改善。

微囊化牛肾上腺嗜铬细胞植入偏侧帕金森病样猴脑的长期效应:行为和组织学观察

目的 了解微囊化牛肾上腺嗜铬细胞 (APA BCC)脑内移植对纠正偏侧帕金森病 (PD)样猴异常行为的长期效应和脑组织学变化。方法 观察 6只右侧脑尾状核及壳核接受了APA微囊、BCC或APA BCC植入的PD样猴的行为变化及移植后 14个月 ,2 8个月的脑组织形态学改变。结果 (1)植入空微囊 2 8个月猴的PD样症状始终无改善 ;植入APA BCC或BCC的PD猴 ,3d后其PD症状开始得到明显改善 ;植入BCC的改善效应持续 1个月或 2个月 ;3只植入APA BCC的PD猴的行为改善效应持续时间明显长于BCC组 ,分别超过 14个月 ,2 8个月和 4 8个月。 (2 )猴脑组织学观察显示植入APA BCC后行为改善良好的PD样猴脑移植区内存在大量形态完整的微囊 ,囊内可见存活的BCC ,移植区周边纹状体内TH阳性纤维密度明显高于对侧 ;行为改善持续时间短的猴脑内未见完整微囊及存活的BCC ;植入BCC的猴脑内未见存活的BCC ,见局灶瘢痕样组织反应 ;植入空微囊的猴脑组织内存在微囊。结论 植入PD样猴脑内的APA BCC 2 8个月时仍完好存在并可纠正异常行为 ,周围组织反应轻微。

内皮前体细胞移植对新血管形成的促进作用

目的:观察体外培养的内皮前体细胞自体移植后在缺血肢体新血管形成和改善血液灌注过程中的形态学变化及其作用。方法:①实验于2002-08/2003-04在解放军总医院心内科实验室完成。选用成年雄性新西兰白兔20只。随机将动物分为2组,分别为细胞移植组和对照组(肌肉注射磷酸盐缓冲液1mL),各10只。实验2个时间点3,5周各5只。②细胞移植组兔抽取骨髓,分离单个核细胞,采用内皮细胞专用培养基(添加体积分数0.2胎牛血清,肝素1×104U/L和青霉素1×105U/L)体外培养扩增内皮前体细胞并给予鉴定。细胞移植组动物肌肉注射内皮前体细胞悬液,移植细胞数量为(7.4±1.7)×106,共注射5个点。③分别饲养3和5周后行激光多普勒灌注显像显示缺血肢体血液灌注情况;行腹主动脉造影计数右侧大腿自腹股沟韧带至膝关节的血流时间,以股骨中点的垂直线为标准,计数侧支血管数目;行组织学和免疫组织化学检测观察缺血肌肉组织标记细胞是否整合至血管壁内。④采用t检验比较计量资料间差异。结果:①内皮前体细胞贴壁后呈纺锤体形,原代细胞呈集落生长,生长速度较慢,传代以后分布较均匀,生长迅速。原代细胞培养时可见较多杂细胞存在,但传代2次以后细胞形态非常单一。Ⅰ型荆豆凝集素、乙酰化低密度脂蛋白和抗Ⅷ因子相关抗原单克隆抗体鉴定均为阳性,细胞纯度达100%。②内皮前体细胞移植后3周,激光多普勒灌注显像检测显示细胞移植组缺血肢体血液灌注显著改善(t=5.96,P<0.01),血管造影显示细胞移植组侧支血管生成增多(t=5.28,P<0.01),血流速度增快(t=-6.85,P<0.01)。细胞移植后5周,切开动物缺血肢体皮肤发现,细胞移植组皮肤、皮下组织和肌肉基本不形成粘连,而对照组粘连严重,此时激光多普勒灌注显像检测显示细胞移植组和对照组血液灌注检测无显著差别(P>0.05),但造影检测显示细胞移植组侧支血管数目明显多于对照组,血流时间明显短于对照组(t=3.32,-4.62,P<0.01)。③组织学检测显示对照组缺血肢体存在肌肉坏死现象,同时有大量炎细胞浸润,而细胞移植组未见未见肌肉坏死和炎细胞浸润,细胞追踪显示大量标记的细胞整合至血管壁内形成内皮细胞。结论:①骨髓中的内皮前体细胞可以在体外大量扩增,从而达到满足自体移植的需要。②内皮前体细胞自体移植后可以参与新血管形成,进而形成侧支血管,有效改善缺血组织的血液灌注。

超抗原诱导活化的细胞是Th1而不是Th2

目的：分析超抗原活化的外周血ＣＤ＋４Ｔ细胞Ｔｈ１／Ｔｈ２的平衡状况。方法：在体外检测了细胞因子及细胞因子受体水平。结果：ＳＥＢ能诱导外周血淋巴细胞增殖；增殖反应发生在ＳＥＢ刺激后的ｄ３；６细胞增殖达到高峰，随后下降。而ｍＩＬ－２Ｒ的表达在刺激后的ｄ３表现出明显升高（Ｐ＜０．０１），比ｓＩＬ－２Ｒ的释放提前了３ｄ。ＩＬ－２的释放在刺激后的ｄ３到ｄ４达到高峰；ＩＬ－４的水平为０。结论：早期ｍＩＬ－２Ｒ的表达与后期细胞增殖有关。增殖的细胞是Ｔｈ１而不是Ｔｈ２。

^(19)F磁共振波谱分析CD基因在人结肠癌细胞的表达

为了研究^(19)F-NMR波谱分析胞嘧啶脱氨酶(CD)基因在人结肠癌细胞中表达的可行性,通过逆转录病毒介导方法,将编码大肠杆菌的CD基因转染到人结肠癌细胞系SW1116。通过RT-PCR、MTT方法和^(19)F-NMR波谱分析了 CD基因在人结肠癌细胞中的表达状况。结果显示转基因的肿瘤细胞SWCD_2 中表达CD基因,对前药 5-氟胞嘧啶(5-FC)的敏感性较亲本肿瘤细胞 SW1116明显增高,50％细胞生长抑制率(IC_(50))为 66 μmol/L,而 SW1116细胞IC_(50)为16 mmol/L。^(19)F-NMR波谱分析显示,转导CD基因细胞在774μmol/L 5-FC浓度培养24 h后的样品,在δ-91.7和δ-93.3显示了2个双峰,分别是5-FC和5-氟尿嘧啶(5-FU)的^(19)F-NMR的信号,提示5-FU是 SWCD_2细胞内的 CD酶催化 5-FC的代谢产物。这些结果表明^(19)F-NMR分析是一种能够用于检测CD基因在人结肠癌细胞中表达的新方法,它将有助于对临床基因治疗方案实施监测。

微囊化牛肾上腺髓质嗜铬细胞偏侧帕金森病样猴脑内移植研究

目的:观察微囊化牛肾上腺嗜铬细胞脑内移植对偏侧帕金森病样猴的行为影响、移植物的存活状况、脑组织液中单胺类物质含量的变化及纹状体区多巴胺D2受体的活动性。方法:实验于1999-01/2003-06在解放军总医院老年医学研究所完成。①右侧颈内动脉注射甲基-苯基-四氢吡啶诱发帕金森病样猴模型(n=9),随机分为微囊化牛肾上腺嗜铬细胞组6只、牛肾上腺嗜铬细胞组2只及空微囊组1只。②获取牛肾上腺嗜铬细胞,以海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠为材料包裹牛肾上腺嗜铬细胞,将微囊化、非囊化牛肾上腺嗜铬细胞或空微囊分别植入微囊化牛肾上腺嗜铬细胞组、牛肾上腺嗜铬细胞组及空微囊组帕金森病样猴右侧尾状核和壳核。③观察3组帕金森病样猴移植后的行为改善、移植后14个月及28个月时移植物的状况,微囊化牛肾上腺嗜铬细胞组移植后2个月及7个月时移植区微透析液中单胺类物质变化及48个月时多巴胺D2受体的活动性变化。结果:①囊化牛肾上腺嗜铬细胞组(n=6)和牛肾上腺嗜铬细胞组(n=2)移植后1周开始帕金森病样猴左上肢活动明显增加,囊化牛肾上腺嗜铬细胞组改善时间7～48个月,牛肾上腺嗜铬细胞组一两个月,空微囊组(n=1)左侧上肢活动无改善。②囊化牛肾上腺嗜铬细胞植入28个月时仍存活于帕金森病样猴脑内。③囊化牛肾上腺嗜铬细胞组移植后2,7个月时,右侧壳核、尾状核细胞外液中多巴胺、3,4-二羟基苯乙酸和高香草酸水平较移植前明显提高(P<0.05),但仍低于左侧的水平。④囊化牛肾上腺嗜铬细胞移植48个月时移植区D2受体活性较对侧明显提高。结论:结果表明帕金森病样猴脑内移植的囊化牛肾上腺嗜铬细胞能够长期存活、产生多巴胺、改善其异常行为。

内皮前体细胞自体移植促进缺血心肌血管的新生

目的:观察内皮前体细胞自体移植后能否促进血管新生、改善心肌灌注、进而改善心脏功能。方法:实验于2004-01/05在解放军总医院心内科实验室完成。①实验分组:雄性新西兰白兔32只,体质量3.0～3.5kg,随机分为治疗组和对照组,每组16只。②实验方法:治疗组自骨髓获取内皮前体细胞培养扩增。结扎动物冠状动脉前降支根部。心电图检测至少5个胸前导联出现ST段显著抬高作为模型制作成功标志。2.5g/L胰蛋白酶消化细胞,洗涤干净后5mL磷酸盐缓冲液悬浮细胞,结扎前降支2h后将细胞悬液从耳静脉注入动物体内,移植细胞数量为(9.8±2.9)×106个/只。对照组注射磷酸盐缓冲液5mL。饲养5周。③实验评估:分别行超声心动图检查和左心室压力曲线检测心脏功能和心肌组织的梗死情况以及通过免疫组织化学检测观察血管密度。结果:纳入新西兰白兔共32只,因前降支细小排除2只。对照组因心功能衰竭和腹泻各死亡1只。治疗组结扎前降支后突发室性心律失常死亡1只。最终27只进入实验。①体外培养的内皮前体细胞生长迅速,能够在2～3周达到预定移植细胞数量。②内皮前体细胞移植5周后,超声心动图检测显示治疗组动物心肌功能指数显著降低(P<0.01),左心室射血分数显著高于对照组(P<0.01),左心室舒张末压明显低于对照组(P<0.05),而等容收缩期左室压力最大上升速率显著升高(P<0.05)。③治疗组心肌梗死面积显著减小(P<0.01),而血管密度明显高于对照组(P<0.01)。④标记细胞主要位于梗死心肌组织,大部分整合至毛细血管中,参与血管新生。结论:内皮前体细胞自体移植能促进缺血心肌血管新生,有效改善缺血心肌的灌注,进而改善心脏功能。

老年人肺癌的临床及CT诊断(附124例分析)

目的 :探讨老年人肺癌的临床和CT诊断的准确性。材料与方法 :1987～ 1998年 132例肺部肿块的临床和CT检查资料。结果 :12 4例为肺癌。CT征象 :92例有分叶征象 (74.2 % ) ,5 9例有短而细毛刺 (47.6 % ) ,2 7例有锯齿样改变 (2 1.8% ) ;胸膜凹陷征 5 9例 (47.6 % ) ,血管集束征 38例 (30 .6 % ) ,细支气管充气征 41例 (33 .1% )。结论 :把握CT的肺癌征象 ,结合临床表现及定期查体 ,可提高老年人肺癌的诊断水平。

转移因子免疫活性测定

本文采用化学发光法检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性,方法简便、灵敏、迅速、可靠。一、材料与方法: 材料:①动物:昆明小鼠、雌性、18～20g按体重配对随机分为实验组和对照组,每组各20只。②小鼠血清:取10只正常小鼠血清、混匀。③转移因子(TF-P)致敏小鼠:向小鼠腹腔注射0.5mlTF-P,12小时后检测。④对照组小鼠:向腹腔注射0.5ml生理盐水。⑤配制0.08mM Luminol