纳米免疫磁珠富集单核增生李斯特菌

比较抗体直接偶联、链霉亲和素-生物素介导偶联的免疫磁珠以及免疫磁珠的粒径对单增李斯特菌捕获效率的影响。结果表明:链霉亲和素-生物素介导偶联的免疫磁珠捕获效率约是直接偶联法的3倍;同时,磁珠粒径对捕获效率也有较大影响,当免疫磁珠用量为100μg时,180、350、1150nm的免疫磁珠捕获效率分别为95%、18%和9%。因此,采用链霉亲和素-生物素介导偶联的180nm免疫磁珠是一种低成本、易操作、高效率的单核增生李斯特菌富集方法。

鸡蛋中磺胺类残留物提取方法

为获得鸡蛋中磺胺类药物残留检测的提取方法,分别在鸡蛋中添加高、中、低浓度的磺胺类药物,根据GB/T 20759—2006《畜禽肉中十六种磺胺类药物残留量的测定:液相色谱-串联质谱法》的方法以及自行设计方法对样品进行前处理,用液相色谱-串联质谱检测。结果表明:添加量在10～200ng/g范围内,鸡蛋中回收率为20.8%～69.29%,回收率未能达到标准;GB/T 20759—2006在提取、浓缩、除脂、标准曲线绘制方面对于禽蛋类食品不适用,需根据禽蛋类的特殊性制定专门的检测标准,而自行设计方法所得回收率为77.92%～95.26%,可以满足检测的要求。

单核细胞增生李斯特菌单克隆抗体的制备与鉴定

以单核细胞增生李斯特菌细胞碎片免疫BALB/c小鼠,间接ELISA法成功筛选获得2株稳定分泌抗LM的单克隆杂交瘤细胞株4A7、4H11。抗体效价为1∶160 000以及1∶20 000,亚型为IgG1、IgG2a,Dot-ELISA结果表明4A7和4H11单克隆抗体具有很好的属特异性,Western blot分析表明4A7、4H11抗体分别与单核细胞增生李斯特菌62 kDa以及32 kDa外膜蛋白抗原表位结合,胶体金免疫电镜实验进一步确证以上抗体可有效识别单核细胞增生李斯特菌细胞表面抗原。