胃肠间质瘤的分子靶向药物研究与应用进展

胃肠道间质瘤(GIST)是消化道最常见的间充质肿瘤,占所有胃肠道肿瘤的1-2%,约有80%和10%的GIST分别存在的KIT和PDGFRA突变,还有约10%的GIST不存在KIT和PDGFRA突变,称之为野生型GIST。手术切除仍是治疗GIST的首选方法,但对于复发、转移或不可切除的GIST,靶向药物酪氨酸激酶受体抑制剂(TKI)伊马替尼是治疗GIST的首选药物,由于GIST基因突变位点的不同,对不同的靶向药物的敏感度也不同,因此需要不同的药物治疗,并且随着治疗的进行,越来越多的患者会出现继发耐药性,传统的靶向药物已经难以为继,因此需要更换新的靶向药物来治疗,如舒尼替尼、瑞戈非尼、瑞普替尼等药物,因此本文对GIST的靶向药物的研究现状进行综述。

槲皮素对人乳腺癌裸鼠移植瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察槲皮素 ( Quercetin)对人乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法 以 MCF- 7细胞复制裸鼠异种移植瘤模型 ,2 4只荷瘤鼠随机分组用药 :对照组、槲皮素组、5 - Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组。用药 15 d收集肿瘤标本 ,采用光镜、电镜观察 ,Tunel法行原位凋亡检测 ,免疫组化分析 Ki67、Bcl- 2的表达。结果 1槲皮素组、5 - Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组瘤重明显低于对照组 ( P<0 .0 5 ) ;2 Ki67免疫组化显示 :槲皮素组、5 - Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组 Ki67指数 ( Ki67- L I)明显低于对照组 ,差异有显著性 ( P<0 .0 1) ;Bcl- 2免疫组化显示 :槲皮素组、5 - Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组与对照组差异有显著性 ( P<0 .0 5 ) ;3原位凋亡检测显示 :槲皮素组、5 -Fu组、槲皮素 + 5 - Fu组凋亡指数 ( AI)高于对照组 ( P<0 .0 1) ,槲皮素 + 5 - Fu组高于槲皮素组、5 - Fu组 ,差异有显著性意义 ( P<0 .0 5 )。结论 槲皮素可抑制人乳腺癌细胞 MCF-

结直肠高级别上皮内瘤变的临床分析38例

目的:研究结直肠高级别上皮内瘤变的临床病理特征,探讨临床合理治疗决策.方法:回顾性总结38例经内镜检查和病理初步诊断为结直肠高级别上皮内瘤变患者的,临床资料,分析其临床表现、内镜形态学、组织病理学特点、预后等,随访观察3-36 mo.结果:38例患者中,最终确诊17例为结直肠癌.21例仍为高级别上皮内瘤变.治疗前后诊断一致性较差(Kappa值为0.376).结直肠高级别上皮内瘤变合并癌的高危因素包括:肿瘤大小、内镜形态特点、症状严重、绒毛状腺瘤合并高级别上皮内瘤变、CEA或CA19-9增高等.结论:使用WHO新的诊断结直肠高级别上皮内瘤变需引起临床医生重视,特别是对于内镜下单纯活检病例.应当谨慎选择治疗方式和随访时间.

载体肝干细胞分泌表达的Endostatin对血管内皮细胞增殖和凋亡的影响

目的观察携带内皮抑素基因的载体肝干细胞分泌表达的内皮抑素蛋白(Endostatin,ES)对血管内皮细胞体外增殖和凋亡的影响。方法体外扩增培养本室构建的携带内皮抑素基因的载体肝干细胞WB-ES,收集含有分泌型Endostatin的上清液。将人脐静脉内皮细胞ECV304体外增殖培养,加入不同浓度的含倍比稀释Endostatin的上清液,在不同的作用时间(24、48、72 h),通过四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞生长抑制率。采用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,分析载体肝干细胞WB-ES分泌表达的Endostatin对ECV304的增殖和凋亡的影响。结果载体肝干细胞胞外表达的Endostatin对人脐静脉内皮细胞ECV304生长有显著抑制作用,48 h作用达到高峰,随浓度增加抑制作用增强;Endostatin作用的实验组,G1期细胞比例增加,S期细胞数下降,抑制细胞生长的机制可能主要是通过对细胞增殖的影响(P<0.05);实验组细胞存在细胞凋亡增加现象,但与对照组比较凋亡率差异无统计学意义。结论携带内皮抑素基因的载体肝干细胞WB-ES胞外表达的Endostatin在体外可有效抑制血管内皮细胞增殖,载体肝干细胞WB-ES有望成为靶向抗肿瘤血管生成的肝癌基因治疗载体细胞。

腺病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因在大鼠成体肝干细胞中的表达

目的:研究腺病毒感染成体肝干细胞介导外源基因表达的可行性及建立稳定表达EGFP的成体肝干细胞.方法:采用细菌同源重组法构建CMV驱动的EGFP报告基因腺病毒载体pAd-CMV-EGFP,在293细胞中包装制备腺病毒,并用重组腺病毒感染体外培养的成体肝干细胞WB-F344,观察腺病毒携带的外源基因EGFP在WB-F344细胞中的表达,及分析病毒对肝干细胞的感染效率.进一步单克隆培养纯化建立稳定表达EGFP的细胞株(WB-EGFP),并采用流式细胞技术、免疫细胞化学技术、诱导分化实验以观察其生物学特性.结果:成功构建腺病毒载体,并包装制备高滴度的重组腺病毒Ad-EGFP.重组腺病毒有效的感染WB-F344细胞,感染率约40-70%.建立WB-EGFP细胞株,持续传代8-9代均较稳定表达EGFP及肝干细胞表面标记,仍保持干细胞样的增生、分化等基本生物学特性.结论:腺病毒可高水平的介导外源基因表达于成体肝干细胞,是有效的基因转移系统.稳定表达EGFP的肝干细胞株观察直观、可连续传代,并保持干细胞的生物学特性,可用于体内外肝细胞研究中的追踪、鉴定.

利用基因表达谱芯片从外周血筛选直肠癌术前放化疗敏感标志物的研究

目的利用基因表达谱芯片在进展期直肠癌患者外周血中初步筛选直肠癌术前放化疗敏感的分子标志物。方法接受术前放化疗并进行直肠癌根治术患者30例,根据放化疗后原发肿瘤降期情况,分为敏感组(第1组)7例、中度敏感组(第2组)15例、耐受组(第3组)8例。采用基因表达谱PCR芯片,应用实时荧光PCR同时对6条经典的肿瘤信息通道标志基因进行表达分析,检测放化疗前(A1、A2、A3亚组)、放化疗后(B1、B2、B3组)外周血游离RNA中肿瘤信号通路的关键基因情况,分析外周血中与放化疗敏感性相关的标记物。结果放化疗前存在29个基因差异,随着放化疗敏感性增加,表达逐渐增加的是DKK1、CD24、CDKN1A、ENC1、FOS、IER3、IFI6、PLEK、PPP2R2D、RCAN1、VDR、ZFP36;放化疗后存在20个基因差异,随着放化疗敏感性增加,表达逐渐增加的是:CEBPB、ARF1、CXCL9、CCND1、DNAJB9、ESR1、IER3、IFI6、IRSI、SEMA3C、TXNIP、TM4SF1。随着放化疗敏感性增加,放化疗前后差异基因在3组中均呈递增表达的基因为IER3、IFI6、PPP2R2D,其中IER3、PPP2R2D在放化疗前后组内比较,差异均有统计学意义(P<0.05);随着放化疗敏感性增加,放化疗前呈递减基因为GADD45B、SOCS3(P<0.05),但放化疗后组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。IER3、PPP2R2D、SOCS3在敏感组与耐受组间基因表达差异在4倍以上。结论利用基因表达谱芯片检测外周血游离RNA,可初步为直肠癌术前放化疗敏感性提供预测指标,其中IER3、PPP2R2D、SOCS3基因有可能成为理想的预测标志物。

结肠腺瘤癌变过程中PI3K/AKT/mTOR信号通路表达谱的改变

目的探讨结肠腺瘤恶性转化过程中PI3K/AKT/mTOR信号通路分子表达谱的改变。方法采用表达谱PCR芯片技术对PI3K/AKT/mTOR信号通路的主要分子进行实时荧光PCR检测,分析其在结肠低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变及腺癌中的表达。结果 PI3K/AKT/mTOR信号通路在大肠腺瘤恶性转化中发生多位点基因mRNA表达改变,以3条子通路PI3K亚基P85与细胞迁徙调节因子、AKT/PI3K家族及调节因子、mTOR信号途径多基因表达改变为主。其中结肠癌变过程c-FOS和PTEN可能为PI3K/AKT/mTOR通路中关键基因改变,在癌变过程中发挥重要作用。结论 PI3K/AKT/mTOR信号通路分子在大肠腺瘤癌变过程中基因表达谱异常,该通路关键基因可望成为临床治疗的分子靶点。

幽门螺旋杆菌与残胃癌发生的研究进展

残胃癌发病率呈上升趋势,其发生机制与多种因素有关,其中幽门螺旋杆菌感染被认为是重要因素,但尚无肯定的结论.本文就残胃幽门螺旋杆菌感染与残胃癌发生及相关机制作一综述.

进展期胃癌根治术(毕Ⅱ式)后幽门螺旋杆菌感染情况及药物干预的临床效果观察

目的观察进展期胃癌根治术(毕Ⅱ式)对幽门螺旋杆菌(Hp)感染的影响及药物干预的临床效果。方法 103例可行根治性远端胃癌切除术的胃癌患者,采用胃镜活组织病理、13C尿素呼气试验(UBT)检测Hp感染,在进行胃癌根治手术(毕Ⅱ式)术后继续监测Hp感染状态,同时胃镜观察吻合口、残余胃组织,诊断是否存在吻合口炎、吻合口糜烂、吻合口溃疡、慢性胃炎及糜烂、胃黏膜肠化等病理改变,随访患者消化道症状。对术后4周仍存在Hp感染者60例随机分为两组,对照组30例给予临床观察,实验组30例给予根除Hp治疗;术后随访观察3年,术后每6个月随访胃镜、CT,记录消化道症状和胃镜结果,检查肿瘤是否复发转移。结果该组胃癌患者术前Hp感染率为73.8%(76/103),术后4周残胃Hp感染率58.3%(60/103),术后6个月Hp持续感染率为41.7%(43/103),术后6个月内残胃吻合口溃疡发生率为11.7%(12/103),吻合口炎发生率为80.0%(82/103)。其中,实验组(抗Hp治疗组)Hp根除率高于对照组(P<0.05);实验组残胃炎发生率低于对照组(P<0.05),实验组残胃癌复发率、吻合口溃疡发生率与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);胃癌术后Hp持续阳性患者残胃癌发生率与Hp阴性患者相比有增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论进展期胃癌根治术后残胃Hp感染率下降,对于术后残胃Hp感染持续阳性者,抗Hp治疗可改善其症状,是否降低残胃复发率及残胃癌发生率,仍需扩大病例进行观察总结。

槲皮素逆转肿瘤多药耐药的研究进展

槲皮素是一种天然黄酮类物质 ,对癌具有化学预防及治疗作用 ,近年研究表明它也是一种有效的多药耐药(MDR)逆转剂。本文就槲皮素逆转肿瘤MDR的机制及研究进展进行综述。

T4期直肠癌术前同步放化疗的效果

目的对T4期直肠癌采用调强放疗结合同步化疗进行术前治疗,观察临床疗效及安全性。方法按照入选标准选择T4期直肠癌患者30例,进行术前调强放疗和单药卡培他滨化疗,并完成直肠癌手术,对临床肿瘤降期、肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、不良反应及随访数据等相关资料进行分析。结果 30例患者放化疗后出现病理缓解22例,降期率73.3%,其中7例出现完全病理缓解,完全缓解率23.3%;8例出现肿瘤未降期或进展。放化疗不良反应以轻度直肠炎、粒细胞减少为主,发生率10.0%。分析放化疗降期相关因素,放化疗前CEA越高,放疗后yp T分期越晚(P<0.01)。放疗前CEA水平与近期复发转移相关,完全缓解者近期复发转移率也明显低于肿瘤进展或未降期者(P<0.05)。结论 T4期直肠癌采用改良的术前放化疗,可取得较好的临床效果,可进一步推广应用;CEA对直肠癌术前放化疗敏感性有一定的预测价值。

分泌型人内皮抑素基因过表达慢病毒的构建与表达

目的构建包装分泌型人内皮抑素(Endostatin)基因过表达慢病毒并表达。方法人工合成含人胰岛素信号肽和人Endostatin基因序列,利用pLVX-mCMV-ZsGreen载体质粒,构建慢病毒pLVX-hEndostatin-mCMV-ZsGreen质粒,通过293细胞包装制备慢病毒。利用重组慢病毒,转染肝干细胞,筛选胞外表达分泌型Endostatin的肝干细胞,观察其能否稳定表达。结果成功构建pLVX-hEndostatin-mCMV-ZsGreen,酶切鉴定及测序正确;该载体可通过293细胞包装慢病毒,该病毒携带人胰岛素信号肽和Endostatin基因序列,在肝干细胞中稳定表达分泌。ELISA检测Endostatin表达水平为18.58～34.20 ng/ml。结论分泌型人Endostatin基因过表达慢病毒成功制备并表达,可用于肿瘤血管生成相关实验。

肝干细胞与肝癌关系的研究进展

肝干细胞是肝内具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的成体干细胞,与肝脏发育和再生修复密切相关。近年研究表明,肝干细胞有多种来源,与肝癌的发生密切相关,支持肝癌干细胞来源于正常肝干细胞转化的假说。肝干细胞的研究可能为肝癌靶向治疗提供新的靶点。

miR-4516在恶性肿瘤中的研究进展

microRNAs(miRNAs)是一组小的非编码RNA,在恶性肿瘤的生物过程中发挥着关键作用。miR-4516是其主要成员之一,在多种肿瘤中异常表达,与肿瘤的侵袭、转移、预后及对化学药物敏感性等密切相关,具有重要的临床研究价值。该文对miR-4516在消化系统肿瘤、胶质母细胞瘤、乳腺癌、视网膜母细胞瘤、甲状腺癌等恶性肿瘤中的研究进展作一综述。

PI3K/Akt/mTOR信号通路在大肠腺瘤恶性转化中的表达及意义

目的探讨大肠腺瘤恶性转化中PI3K/Akt/mTOR信号通路分子的表达及意义。方法采用免疫组织化学技术检测PI3K/Akt/mTOR信号通路的主要分子在46例大肠低级别、高级别腺瘤及腺癌中的表达。结果PI3K表达强度在各组织间差异有统计学意义(P<0.01),其在腺癌中表达最强;磷酸化的(p-)Akt、mTOR表达强度在各组织间差异也有统计学意义(P<0.01);PI3K/Akt/mTOR信号通路负性调控蛋白PTEN表达率各组织间差异有统计学意义(P<0.05),随大肠腺瘤的恶性转化其表达降低,并与p-mTOR表达呈负相关(P<0.05)。结论 PI3K/Akt/mTOR信号通路分子在大肠腺瘤恶性转化中表达异常,与腺瘤癌变进展相关,可望成为临床干预的分子靶点。

64排螺旋CT三期增强扫描判断胃癌淋巴结转移的临床价值

目的:探讨64排螺旋CT三期增强扫描判断胃癌淋巴结转移的指标参数及临床应用价值。方法:确诊为胃癌的患者,术前利用64排螺旋CT三期增强扫描检出胃周围淋巴结,与术后病理结果对照,从淋巴结短径、淋巴结CT值、淋巴结短长径比值、门静脉期与平扫期CT值之差等参数分析确定对判断淋巴结转移有价值的指标。结果:淋巴结门脉期CT值≥65 Hu、淋巴结短径≥6mm、淋巴结短长径比≥0.6、淋巴结门静脉期与平扫期CT值差≥35 Hu,以上4项中有两项符合要求判断淋巴结转移,敏感性为93.1%,特异性为50%,有三项符合要求判断淋巴结转移,敏感性为73.5%,特异性为75%。结论:64排螺旋CT三期增强扫描综合应用淋巴结的各项指标参数,可以对胃癌胃周围淋巴结是否转移作出比较可靠的判断,为术前制定合理的个性化治疗策略提供参考。