多枝雾水葛木脂素类化合物体外抗炎作用及其机制

目的研究从多枝雾水葛中分离的新化合物雾水葛木脂素(pouzolignan)D,C和E(本文命名为化合物Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ)的抗炎作用,初步探讨其抗炎机制。方法通过脂多糖(LPS)体外刺激小鼠腹腔巨噬细胞建立细胞炎症模型,用Griess法检测细胞培养上清液中一氧化氮(NO)的含量,用酶联免疫分析法(ELISA)检测上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)的含量,实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及环氧合酶2(COX-2)mRNA表达。结果与溶剂对照组相比,化合物Ⅰ和Ⅱ20,40,80,160和320 mg·L-1对细胞无明显毒性,化合物Ⅲ20,40,80和160 mg·L-1对细胞存活率无明显抑制作用。化合物Ⅰ40,80和160 mg·L-1组细胞释放NO含量随着化合物浓度的增加而降低(r=0.675,P<0.05),化合物Ⅰ160 mg·L-1组PGE2和TNF-α含量与模型组相比明显降低(P<0.05)。化合物Ⅱ40,80和160 mg·L-1组细胞释放PGE2量随着化合物浓度的增加而减少(r=0.992,P<0.01),化合物Ⅱ80和160 mg·L-1组TNF-α含量逐渐减少(r=0.995,P<0.01),160 mg·L-1同时也抑制了NO的释放(P<0.05)。化合物Ⅲ20,40和80 mg·L-1明显降低炎症细胞释放的NO,无明显浓度效应关系(r=0.605,P>0.05),同时40和80 mg·L-1组PGE2和TNF-α的释放量也均明显减少,呈浓度依赖性(r=0.993,P<0.01;r=0.984,P<0.01)。实时荧光定量RT-PCR结果显示,化合物Ⅰ和Ⅱ明显降低COX-2和TNF-αmRNA表达(P<0.05,P<0.01),化合物Ⅱ和Ⅲ能明显降低iNOS mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。结论化合物Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ通过减少炎症细胞释放炎症因子NO,PGE2和TNF-α,同时不同程度地影响iNOS,COX-2和TNF-α基因表达而发挥抗炎作用。

复方广金钱草颗粒质量标准研究

目的建立复方广金钱草颗粒的质量标准。方法采用TLC法鉴别方中广金钱草、车前子、泽泻、牛膝及穿破石;采用超高效液相色谱（UPLC）法对制剂中夏佛塔苷进行含量测定,ACQUITY UPLC BEH SHIELD RP18色谱柱（21 mm×50 mm,1.7μm）,流动相为甲醇-水（32∶68,v/v）,检测波长为271 nm,流速为0.2 m L/min,柱温为35℃;采用超高效液相色谱（UPLC）法对制剂中23-乙酰泽泻醇B进行含量测定,ACQUITY UPLC BEH SHIELD RP18色谱柱（21 mm×150 mm,1.7μm）,流动相为乙腈-水溶液（73∶27,v/v）,检测波长为211 nm,流速为0.2 m L/min,柱温为35℃。结果在TLC色谱中,可检测出广金钱草、车前子、泽泻、牛膝及穿破石的特征斑点,清晰,易于观察。通过超高效液相色谱法测得制剂中夏佛塔苷的线性关系为Y=8848.2X＋13306（r=0.999 0）,表明夏佛塔苷在1.5625-400μg/m L范围内有良好的线性关系;23-乙酰泽泻醇B的线性关系为Y=3 077.65X-17 298.15（r=0.999 8）,表明23-乙酰泽泻醇B在25.3-227.7μg/m L范围内有良好的线性关系。结论该方法简便、准确、稳定且无干扰,可作为该制剂的质量控制方法。

多枝雾水葛化学成分研究(Ⅱ)

目的：研究多枝雾水葛[Pouzolzia zeylanica（L.）Benn. var. microphylla（Wedd.） W.T.Wang]的化学成分。方法采用多种柱层析方法进行分离纯化,通过理化性质和波谱解析进行化学结构鉴定。结果从多枝雾水葛的乙酸乙酯部位和正丁醇部位分离得到9个化合物,分别鉴定为槲皮素-3-O-[α-L-鼠李糖（1→6）-β-D-葡萄糖]-7-O-α-L-鼠李糖苷（1）、山柰酚-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷（2）、（6R,9R）-1-酮-α-紫罗兰醇-9-O-β-D-吡喃葡萄糖（3）、蚱蜢酮（4）、苄基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）、3,4,5-三甲氧基苯-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（6）、邻苯二甲酸二辛酯（7）、山柰酚（8）、芹菜素（9）。结论化合物1、3~6、8~9首次从该属植物中分离得到。

多枝雾水葛化学成分研究(Ⅲ)

目的研究多枝雾水葛拔脓消肿有效部位的化学成分。方法采用Sephadex LH-20和ODS柱色谱、中压制备、HPLC制备等手段进行分离纯化,通过理化性质和波谱解析鉴定化合物的结构。结果从多枝雾水葛大孔树脂60%乙醇洗脱部位分离得到5个化合物,分别鉴定为6,7-二甲基-1-(2,3,4,5-四羟基戊烷基)-1,4-二氢喹喔啉-2,3-二酮(1)、芹菜素-6-C-β-L-阿拉伯糖-8-C-β-D-葡萄糖苷(2)、芹菜素-8-C-[α-L-阿拉伯糖-(1→6)]-β-D-葡萄糖苷(3)、刺槐苷(4)、山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷(5)。结论化合物1~5首次从该植物中分离得到,包括1个生物碱和4个黄酮苷类。