二甲肼致大肠上皮细胞转化过程中的基因谱改变研究

目的探讨二甲肼对大肠上皮细胞的作用和基因表达谱改变影响。方法以前期建立的永生化正常大肠上皮细胞为模型,采用软琼脂克隆形成实验探讨二甲肼的诱导转化作用,并用基因芯片技术揭示转化过程中的基因谱变化,实时荧光定量PCR和Western blot技术进行验证。结果经二甲肼作用后大肠上皮细胞在软琼脂中出现细胞克隆,与正常对照细胞比较,转化细胞有265个基因表达发生明显改变,包括148个上调基因和117个下调基因。分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(secretory leukocyte protease inhibitor,SLPI)在转录和蛋白水平上均发生明显上调。结论二甲肼能诱导永生化正常大肠上皮细胞发生恶性转化,初步揭示了转化过程中基因表达谱的改变,为认识大肠癌发生的分子机制提供了有益线索。

康莱特注射液对肺癌A549细胞环氧化酶作用的研究

目的:研究康莱特注射液对IL-1β刺激后A549肺癌细胞环氧化酶(COX)表达的抑制作用.方法:用妹RT-PCR方法检测100～300μL·mL-1不同含量康莱特注射液作用前后A549肺癌细胞COX-1,COX-2 mRNA表达变化,同时用Western-blot检测COX-2蛋白表达变化.结果:A549细胞在康莱特注射液作用前后COX-1的mRNA表达无明显变化,但COX-2的mRNA和蛋白表达随着药物作用浓度增加而逐渐降低.结论:康莱特注射液能选择性抑制A549肺癌细胞COX-2表达.

正常大肠干细胞的条件永生化

目的 :建立正常人大肠干细胞系。方法 :用中性蛋白酶分级分离法从人胚肠中分离正常大肠干细胞 ,以含端粒酶逆转录酶和 SV4 0大 T抗原的重组逆转录病毒感染 ,对其进行永生化 ;然后 ,对建立的正常大肠干细胞系进行生物学特性鉴定。结果 :用中性蛋白酶分级消化获得的 AKP活性阴性的细胞群生长呈多角形。该细胞群转染含端粒酶逆转录酶和 SV4 0大 T抗原的重组逆转录病毒后 8～ 12周出现上皮样细胞克隆 ,经细胞特性鉴定 :PAS染色黏蛋白阳性 ,上皮细胞角蛋白 pan、CK- 8、CK- 19均阳性 ;用 EL ISA- PCR法检测该细胞第 12代和第 4 3代端粒酶活性 ,分别为 0 .4 3、0 .83;用 Western blot法检测发现该细胞系表达端粒酶和 SV4 0大 T抗原 ;用 RT- PCR检测示该细胞株表达 Musashi- 1m RNA;以 1× 10 6细胞数接种裸鼠 ,观察 4个月无肿瘤形成 ,软琼脂克隆试验培养无转化细胞克隆出现。结论 :建立的正常的大肠干细胞系具有干细胞特征 ,可作为体外研究致癌剂

乳腺癌患者生活质量现况调查及影响因素分析

目的对乳腺癌患者的生活质量进行调查,并对其影响因素进行分析。方法调查的对象为在我院处于治疗期间的乳腺癌患者519例。调查采用EORTC QLQ-C30及EORTC-BR23量表,并采用统计学方法对结果进行分析。结果乳腺癌患者年龄较小及月收入较高的患者的生活质量明显优于年龄较大的及月收入较低的患者(P<0.05)。躯体功能、社会功能、恶心呕吐、气促、经济困难、体形、系统治疗不良反应、手臂症状及脱发引起的烦恼得分在不同治疗方案组中差异均具有显著性(P<0.05);不同手术方式的乳腺癌患者的整体生活质量及体形的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论乳腺癌患者具有中等水平的生活质量,患者的经济收入、年龄、所采取的治疗方案及手术方式等均为其生活质量的影响因素。

幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A对人胃腺癌上皮AGS细胞蛋白质组的影响

为明确幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A(CagA)在致病过程中对宿主细胞蛋白质表达的影响及其与CagA磷酸化的相关性,分别用野生型cagA质粒和磷酸化位点突变型cagA质粒转染人胃腺癌上皮AGS细胞,应用表面加强激光解析电离-飞行时间质谱技术,分析细胞蛋白质组的改变。结果表明,在可捕获的400多个蛋白质中,野生型CagA可使AGS细胞质荷比为4229、4714、4728、5129、6546、6657、8162、9084、13803、14021的10个蛋白质表达上调,质荷比为2013、4286、8563、9952、11085、11645的6个蛋白质表达下调。突变型CagA只能使质荷比为4714、4728、6546和6657的蛋白质表达上调。这些结果提示,这16个差异表达蛋白质可能参与了CagA的致病过程,其中质荷比为4714、4728、6546和6657蛋白质表达的改变与CagA的磷酸化作用无关,而其余12个蛋白质表达的改变则都依赖于CagAEPIYA重复序列酪氨酸位点的磷酸化。这些发现为进一步探讨CagA的致病机制提供了实验依据。

年轻女性乳腺癌中ER、PR、HER-2和Ki67的表达与临床病理意义研究

目的分析研究ER、PR、HER-2和Ki67在年轻女性乳腺癌中的表达与临床病理意义。方法回顾性分析我院近两年来年轻女性乳腺癌患者资料,随机选取266例女性患者作为实验组;另随机选取266位健康女性作为对照组。取两组患者乳腺内相关组织进行化验,比较两组患者ER、PR、HER-2和Ki67水平。结果对照组的ER、PR水平明显高于实验组;同时,实验组的HER-2水平明显高于对照组。结论年轻女性乳腺癌中HER-2和Ki67与乳腺癌的发生发展呈正相关;ER、PR与乳腺癌的发生发展呈负相关。

奥沙利铂与西妥昔单抗联用的分子机制研究现状

目前,奥沙利铂与西妥昔单抗在结直肠癌治疗中的联合应用成为多项大型临床试验及基础研究的焦点。本文阐述了两药联合应用后,通过影响细胞周期、凋亡、DNA损伤修复、活性氧自由基生成,从而产生协同或拮抗作用的分子机制,并探讨了分子标志物对联用效果的预测作用。

开发马肉生产效益可观

我国具有悠久的养马历史,全国现有马匹1108万匹,数量居世界之首,马匹除作为役用外,已开始向多种用途发展,有供观赏、施乐的矮马,也有结合体育运动、民族习惯的赛马,还有生产肉和乳兼用的马。马肉和马奶是远古时期人类的重要食品,现在世界上仍有许多民族,包括我国的少数民族,至今还保留着吃马肉、喝马奶的习惯。70年代以来,欧洲马肉畅销,供不应求,蒙古和日本对马肉的需求量也在剧增。目前马肉最大的出口国是阿根廷,最大的进口国是日本。

原发灶不应预防性切除

结直肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一。近20年来，转移性结直肠癌患者的生存率获得了明显提高，这要归功于外科医生的积极参与、手术技术的不断优化改进、新药的出现。以及化疗、分子靶向治疗和介入治疗等多种综合治疗手段的联合应用。对于转移灶不可切除的晚期患者，如果结直肠癌原发灶伴有出血、穿孔或梗阻等症状，则应选择切除原发灶或放置支架等治疗手段缓解症状，再予以后续的全身治疗。然而，对于原发灶无症状的、转移灶不可切除患者．原发灶是否需要切除目前仍存在较大争议，美国、欧洲以及我国的指南均不推荐常规切除，我们的观点也是反对切除原发灶。

LM-1685对人肺腺癌细胞A549的放射增敏作用

目的 观察环氧合酶-2（COX-2）抑制剂对肺癌细胞的放射增敏作用。方法 COX-2抑制剂LM-1685作用于体外培养的肺癌细胞A549，噻唑蓝（MTT）法检测其对肺癌细胞的抑制效果，克隆形成法检测放射敏感性，流式细胞术检测细胞周期变化。结果COX-2抑制剂LM-1685具有明显的抑制A549细胞增殖的作用，其效应呈时间和剂量依赖性，50μmol／LLM-1685在有或没有IL-1β作用下对A549细胞均有放射增敏作用，其放射增敏比分别为1．12、1．06。50μmol／LLM-1685能去除X射线导致的A549细胞G2／M期阻滞。结论 COX-2抑制剂对肺癌细胞A549具有放射增敏作用，放射增敏机制可能与去除G2／M期阻滞有关。

左右半大肠癌的差异

结直肠癌的发病率在发达国家呈下降趋势，与结肠镜筛查、人口老龄化、饮食结构调整、癌症和糖尿病发病率升高等有关，性别、种族、教育等因素也起一定作用。右半大肠癌中，低分化和晚期疾病比例高，腺癌中黏液成分多，易出现并发症和肠内第二原发肿瘤；而左半大肠癌多呈高分化，诊断时偏早期。分子机制上，右半大肠癌与错配修复基因密切相关，而左半大肠癌与 p53突变联系紧密。左、右半大肠癌存在众多表观和遗传学差异，可能属于两种不同的疾病，在临床工作和试验中应区别对待。