泰山磐石散对自然流产模型大鼠子宫蜕膜组织中T-bet/GATA-3的影响

目的 观察泰山磐石散对自然流产模型大鼠子宫蜕膜组织中T盒子转录因子(T-bet)/GATA结合蛋白3(GATA-3)表达量的影响。方法 将15只SPF级雌性妊娠SD大鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组和治疗组,每组5只。空白组于妊娠的第1~11天灌服生理盐水,第6~8天皮下注射生理盐水;模型组于妊娠的第1~11天灌服生理盐水,第6~8天皮下注射0.4 mg/(kg·d)溴隐亭溶液;治疗组于妊娠的第1~11天灌服10 g/(kg·d)泰山磐石散药液,第6~8天皮下注射0.4 mg/(kg·d)溴隐亭溶液。实验期间分别记录3组大鼠妊娠第1天和第11天的体质量,计算3组大鼠体质量增长情况。实验结束次日取材,观察并记录胚胎总数和胚胎吸收数,并计算胚胎吸收率。HE染色观察子宫蜕膜组织形态学的改变;免疫组化法检测3组大鼠子宫蜕膜组织中T-bet和GATA-3蛋白表达水平;Western blot检测3组大鼠子宫蜕膜组织中T-bet和GATA-3的蛋白表达量。结果与空白组比较,模型组大鼠体质量增加缓慢,胚胎吸收率明显升高,子宫蜕膜组织中T-bet的蛋白表达水平明显升高,GATA-3的蛋白表达水平明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠体质量明显增加,胚胎吸收率明显降低,子宫蜕膜组织中T-bet的蛋白表达水平明显降低,GATA-3的蛋白表达水平明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 泰山磐石散可能是通过下调Th1/Th2特异性转录因子T-bet/GATA-3的表达,从而改善胚胎流产情况。

补骨脂素和异补骨脂素对体外细胞色素P450酶活性的抑制和诱导作用

目的探讨补骨脂素(PSO)和异补骨脂素(IPSO)对细胞色素P450(CYP)活性的抑制和诱导作用。方法将人肝微粒体或鼠肝微粒体与PSO或IPSO以及CYP特异性探针底物共孵育30 min,分别以非那西丁O-脱乙基、甲苯磺丁脲4-羟基化、美芬妥因-4-羟基化、右美沙芬O-脱甲基化和咪达唑仑1'-羟基化为同工酶CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6(大鼠2D2)和CYP3A4(大鼠3A1/2)代谢活性的标志,用HPLC-MS/MS法检测相应代谢产物的生成量并计算相应的IC50值,评价PSO和IPSO对5种CYP同工酶的潜在抑制作用。将PSO和IPSO或阳性诱导剂与"三明治"培养大鼠肝原代细胞共孵育72 h后,再加入CYP探针底物孵育1 h,检测相应代谢产物的生成量,与阳性诱导剂组比较,评价二者对CYP1A和CYP3A的诱导作用。结果 PSO和IPSO对人肝微粒体和鼠肝微粒体的CYP1A2均有较强的抑制作用,在人肝微粒体中的IC50值分别为0.17和0.13μmol·L-1;在鼠肝微粒体中的IC50值分别为0.47和0.36μmol·L-1。二者对人肝微粒体的CYP2D6也有中等强度的抑制作用,IC50值分别为3.59和9.51μmol·L-1。PSO和IPSO 100μmol·L-1可分别将大鼠肝细胞的CYP3A活性提高1.18和0.96倍,有一定的诱导作用。结论 PSO和IPSO能显著抑制CYP1A2酶活性,对CYP3A有一定的诱导作用。

超高效液相串联质谱法同时定量检测6个细胞色素P450酶探针代谢产物

应用超高效液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS),建立了同时定量测定6个细胞色素P450酶(CYP)探针代谢产物的方法。用甲醇和乙腈混合溶剂沉淀肝微粒体孵育液中的蛋白,在ZORBAX-C18色谱柱(100 mm×4.6 mm,3.5μm)上,以5 mmol/L甲酸铵和0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度分离待测物。在串联质谱正离子多反应监测模式下定量检测待测物。方法学验证结果表明,6个代谢产物在1.0～1000.0μg/L的范围内均呈良好的线性关系(r2>0.994);定量限为1μg/L;方法的日内和日间精密度(RSD)均小于12%;加标回收率为92.8%～104.4%;不同储存条件下样品稳定性实验的浓度偏差(RSD)小于10%。人肝微粒体活性测定的结果显示CYP1A2和CYP3A4的酶活性最强,分别为(466.1±32.1)和(694.3±11.7)pmole/(mg.min),与最低的CYP2C19酶活性分别相差27.7和41.3倍。本方法简便、快速、灵敏,适用于大量化合物CYP酶诱导和抑制评价的酶活性测定。

补骨脂素和异补骨脂素在大鼠和人肝微粒体的酶促动力学

目的研究中药有效成分补骨脂素和异补骨脂素的细胞色素P450(CYP)酶促动力学特征,比较其结构和种属差异,为体内药代动力学特征的预测提供科学依据。方法建立补骨脂素和异补骨脂素的液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)检测方法,在优化人和大鼠肝微粒体孵育体系和评价体外代谢稳定性的基础上,进行了代谢稳定性和酶促动力学研究,应用非线性回归法计算最大反应速率(V_(max))和米氏常数(K_m)。结果应用建立的LC-MS/MS检测方法,补骨脂素、异补骨脂素在肝微粒体孵育液中定量范围为0.1~50.0μmol·L^(-1),线性关系良好,精密度和准确度等满足检测要求。体外代谢稳定性研究显示,当底物浓度为1μmol·L^(-1),蛋白浓度为0.5 g·L^(-1),孵育40 min内,补骨脂素和异补骨脂素在大鼠和人肝微粒体呈线性消除,体外半衰期分别为74.5,95.0,74.5和173.3 min。补骨脂素在大鼠和人肝微粒体中的V_(max)分别为:(1.140±0.080)μmol·min-1·g-1蛋白,(0.620±0.060)μmol·min-1·g-1蛋白;K_m分别为(12.9±0.3)μmol·L^(-1)和(7.4±1.3)μmol·L^(-1)。异补骨脂素在大鼠和人肝微粒体中的V_(max)分别为(0.251±0.012)μmol·min-1·g-1蛋白和(0.103±0.014)μmol·min-1·g-1蛋白;K_m分别为:(3.0±0.4)μmol·L^(-1)和(3.4±0.7)μmol·L^(-1)。结论补骨脂素和异补骨脂素的CYP酶促动力学特征及代谢稳定性具有一定的种属和结构差异,在大鼠两者基于CYP酶的代谢清除过程可能相似。而在人体,异补骨脂素的CYP代谢清除可能慢于补骨脂素,导致药代动力学特征的差异。

同位素稀释-高效液相色谱-质谱联用技术检测大鼠血浆中的芥子气水解产物

应用同位素稀释-高效液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS),建立了同时定量检测血浆中芥子气水解代谢产物硫二甘醇(TDG)和二羟乙基亚砜(TDGO)的方法。应用甲醇和乙腈混合溶剂沉淀染毒大鼠血浆中蛋白,采用ZORBAX-C18色谱柱(100 mm×3.0 mm,3.5μm),以5 mmol/L甲酸铵-甲醇梯度洗脱分离待测物。以d8-TDG为内标,在正离子多反应监测模式下定性和定量分析TDG和TDGO。方法学验证结果表明,TDG在5～800μg/L和TDGO在0.5～80.0μg/L范围内均呈良好的线性关系(r2>0.991),定量限分别为5和0.5μg/L,加标回收率在101%～118%之间,方法的日内和日间精密度(RSD)均小于10%。对SD大鼠(n=6)采用皮下注射方式进行染毒后采样测定,代谢动力学参数计算结果显示,TDG和TDGO的达峰时间(tmax)分别为30和60 min,峰值浓度(cmax)为(1724±227)μg/L和(301±115)μg/L,血浆浓度-时间曲线下面积(AUC)为(3286±249)μg.h/L和(1010±363)μg.h/L。

丙戊酸钠联合喹硫平治疗双相情感障碍躁狂发作的疗效

目的探讨喹硫平联合丙戊酸钠治疗双相情感障碍躁狂发作的疗效及对认知功能的影响。方法选取2013-2014年我院收治的双相情感障碍躁狂发作患者80例,随机平均分为观察组与对照组,分别行丙戊酸钠联合喹硫平与利培酮治疗,均早晚2次服用,持续6周。于治疗前和治疗6周后采用杨氏躁狂量表(YRMS)评定临床疗效,采用威斯康星卡片分类测验(WCST)、持续操作测验(CPT)和霍普金斯词语学习测验修订版(HVLT-R)评定认知功能。结果观察组临床治愈率、显效率、总有效率与对照组相比均无显著性差异(P>0.05)。治疗后2组完成分类数、错误应答数、持续应答数均明显改善,持续注意水平明显改善,观察组错误应答数与持续应答数改善更为明显(P<0.05)。结论喹硫平联合丙戊酸钠能够有效治疗双相情感障碍躁狂发作,改善患者的部分认知功能。

大鼠稳态脑分布模型评价药物的血脑屏障通透性

目的建立大鼠稳态脑分布模型用于评价安替比林、阿替洛尔和ZZB系列新药候选化合物的稳态脑分布和血脑屏障通透性。方法大鼠静脉推注负荷剂量的药物后恒量输注使血药浓度达到稳态,取血和脑组织样品,LC-MS/MS定量测定血浆和脑组织药物浓度,计算稳态脑血比值(Kp值)。在Caco-2单层细胞体外模型上评价受试药物的双向跨膜通透性,计算表观通透系数(Papp)。结果安替比林和阿替洛尔分别为已知的血脑屏障易通透和难通透药物。安替比林的平均稳态脑分布浓度为(2561±125)ng/g,Kp值为0.93±0.04。阿替洛尔则分别为(20.1±0.8)ng/g和0.015±0.002。安替比林的Kp值约为阿替洛尔的60倍。ZZB系列化合物的结构相似,但Kp值的差异较大,从0.044到6.41,并与Caco-2细胞模型的Papp值不相关。结论建立的大鼠稳态脑分布模型可快速形成稳态血浆浓度,适用于药物血脑屏障通透程度的评价,方法简单、可靠且经济。

同时定量检测水胺硫磷和水胺氧磷的液相色谱-串联质谱法及应用

目的建立同时测定大鼠全血中水胺硫磷及其活性代谢产物水胺氧磷的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析方法,用于毒代动力学研究中血药浓度的测定。方法采集大鼠全血样品后即刻用4倍体积冰冷乙腈沉淀蛋白。待测物用Zorbax SB C18柱（2.1 mm×50 mm,1.8μm）分离,以含有0.1%甲酸的水和甲醇为流动相系统进行梯度洗脱。采用ESI源正离子多反应监测模式分析,水胺硫磷、水胺氧磷和内标三唑磷的定量离子对分别为m/z 231→121、274→215和314→162。结果水胺硫磷和水胺氧磷在5μg/L～5 mg/L浓度范围内线性良好,最低定量限为5μg/L,回收率在63.1%～77.8%的范围内,准确度和精密度符合生物样品的检测要求。大鼠静脉注射3 mg/kg水胺硫磷后,水胺硫磷在血中很快下降,消除半衰期为22.2 min。活性代谢产物水胺氧磷的生成也较快,10～15 min达到（257.91±42.00）ng/ml的平均峰值,消除半衰期为17.6 min。水胺硫磷和水胺氧磷的AUC0~t分别为（528.62±49.15）和（191.11±33.23）h.μg/L。结论本研究首次建立了同时定量测定大鼠全血中水胺硫磷和水胺氧磷的LC-MS/MS分析方法,方法的专属性好、灵敏度高,适用于水胺硫磷及水胺氧磷在大鼠体内的毒物代谢动力学研究。

川芎嗪-延胡索乙素凝胶贴膏的制备及评价

目的制备川芎嗪-延胡索乙素凝胶贴膏,并考察其体外透皮能力。方法在Plackett-Burman设计、最陡爬坡实验基础上,以NP-700、CMC-Na用量为影响因素,初黏力、模拟汗液影响、感官评价的综合评分为评价指标,Central Composite Design响应面法优化处方工艺。采用Franz扩散池法,以川芎嗪、延胡索乙素透过量为评价指标,考察不同种类促渗剂对体外经皮渗透的影响。结果最佳处方为NP-700用量14.00 g,CMC-Na用量0.40 g,综合评分为79.17分。以3%氮酮为促渗剂时,川芎嗪、延胡索乙素体外透皮渗透量最优。结论经优化的川芎嗪-延胡索乙素凝胶贴膏制备简便,膏体均匀无气泡、黏性适中、敷贴无残留,体外经皮渗透性能良好。

运用叙事医学培养精神科专科医师人文素质

21世纪医学从生物治疗到身心综合治疗的转向提示现代精神科专科医师需要“既懂病,又懂人”,临床实践中医患之间的摩擦与日俱增不乏与医生的人文素养有关。鉴于精神科患者的特殊性,在临床实践中需要精神科专科医师具备更高的人文素养。在精神科专科医师规范化培训过程中,通过开展“第一人称叙事”练习和医学人文教育等形式,使专科医师受到我院百年进步文化的浸渍,对人文精神有更为深刻的认识。

海洛因依赖者家属的生活质量对照研究

目的了解海洛因依赖者家属的生活质量及社会支持状况及两者的关系。方法应用世界卫生组织生活质量量表中文版简表(WHOQOL-BREF)及社会支持评定量表(SSRS),对80例海洛因依赖者家属进行测评,以80例正常人群生活质量为对照。结果研究组的生活质量比对照组差(P<0.01),生活质量与社会支持有关。结论海洛因成瘾影响其家属的生活质量,其家属缺乏社会支持的情况不容忽视,有必要进行社会心理干预。

蒲公英-丝瓜络提取物对小鼠乳腺癌4T1细胞增殖与凋亡作用的影响的体外试验研究

目的:研究蒲公英-丝瓜络(PS)提取物对小鼠乳腺癌4T1细胞增殖和凋亡作用的影响。方法:将不同浓度的PS提取物作用于乳腺癌4T1细胞,通过CCK8法和集落形成实验检测PS提取物对细胞增殖的影响;通过Hoechst 33258细胞核染色法和Annexin V-FITC/PI染色法观察细胞凋亡情况;通过Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3、CDK2、Cyclin A2蛋白表达,评估PS提取物对乳腺癌4T1细胞周期与凋亡相关蛋白表达的影响。结果:CCK8结果显示PS提取物各剂量组作用24、48、72 h后细胞存活率下降;不同浓度PS提取物处理4T1细胞后,细胞集落形成能力减弱;细胞周期检测结果表明PS提取物能阻滞细胞周期于S期;Hoechst 33258染色实验观察到细胞核固缩和出现明显的凋亡小体,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测发现细胞凋亡率增加;Western blot结果显示PS提取物可使Bcl-2、周期蛋白Cyclin A2及CDK2表达降低,Bax、Cleaved caspase-3表达增加。结论:PS提取物具有抑制乳腺癌4T1细胞增殖的作用,该作用可能与诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞有关。

2019年广东省严重精神障碍在册率相关因素

目的:分析严重精神障碍在册率的相关因素,为制定精神卫生政策提供依据。方法:采用生态学研究方法,以广东省21个地市为研究对象,通过广东省精神卫生信息平台收集各地市的在册率数据,利用E charts 4.9软件绘制严重精神障碍患者在册率地区分布图,采用SPSS 20.0软件进行相关性分析和多重线性回归模型分析社会经济人口学、精神卫生资源、精神疾病防治经费等指标与在册率的关系。结果:户籍人口数与常住人口数的比值(户常比)和人口密度是在册率的相关因素。地区户常比越高,在册率越高(β=1.80,P<0.05);人口密度越高,在册率越低(β=-0.34,P<0.05)。结论:广东省户常比较低、人口密度较高的地区,严重精神障碍在册率较低。提示户常比低的地区应将社区精神卫生服务的重点放在非户籍常住人口,制定地区在册率标准时应适当考虑本地人口构成特征,予以综合评价。

RNA结合蛋白CELF4对小鼠早期胚胎发育的作用

目的观察RNA结合蛋白CELF4在小鼠早期胚胎中的分布与表达,初步探讨CELF4对小鼠早期胚胎发育的作用。方法利用免疫荧光和Real-Time PCR检测CELF4在小鼠早期胚胎中的定位和mRNA表达,利用显微注射技术在1-细胞胚中注入CELF4抗体,观察其对小鼠体外早期胚胎发育的影响,以及对2-细胞期ZGA标志基因eIF1A、MuERV-L、Zscan4d、Hsp70.1和桑椹胚期Cdx2、Oct4、Sox2 mRNA表达的影响。结果CELF4分布于各阶段早期胚胎的细胞质内,在8-细胞胚和桑椹胚中荧光变强,但在囊胚阶段则明显减弱;CELF4 mRNA在1-细胞胚、2-细胞胚和4-细胞胚表达较高,8-细胞胚至囊胚阶段显著下降;CELF4抗体封闭组囊胚发育率低于对照组,Cdx2 mRNA表达显著下降。结论CELF4在小鼠早胚胞质内的阶段特异性表达提示其可能对早期胚胎发育起一定的作用,其可能通过调控滋养层细胞Cdx2 RNA的翻译或者稳定性从而影响囊胚的形成。

临床护理路径模式在双相障碍患者中的应用效果

目的:分析临床护理路径模式在双相障碍患者中的应用效果。方法:选取2018年10月-2019年10月笔者所在医院收治的90例双相障碍患者的临床资料,将其随机分为两组,每组45例。对照组行常规护理,研究组行临床护理路径模式护理。比较两组临床疗效、HAMD评分、BRMS评分、疾病知识掌握情况及住院时间。结果:护理后,研究组总有效率为95.56%,高于对照组的77.78%,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组疾病知识掌握得分为(88.64±6.82)分,高于对照组的(73.76±5.49)分,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组住院时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组HAMD及BRMS评分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:将临床护理路径模式应用于双相障碍患者的护理中,能提高患者临床效果,改善心理及精神症状,增强患者对疾病知识的掌握程度,缩短住院时间,应用效果显著。

雌激素受体α抑制剂MPP在小鼠囊胚形成和滋养层干细胞中影响YAP核定位

目的研究雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)抑制剂甲基-哌啶-吡唑(methyl-piperidino-pyrazole,MPP)在小鼠桑葚胚和滋养层干细胞(trophoblast stem cells,TSCs)中对YAP的影响。方法收集昆明(kunming,KM)小鼠8-细胞胚,置于0μmol/L(对照组)和5μmol/L(实验组)MPP中培养,分别于8h、12h和24h后收集各组桑葚胚,采用免疫荧光技术观察YAP表达,采用Real Time-PCR检测MPP处理24h后Yap mRNA表达变化;将小鼠TSCs置于0μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L和10μmol/L MPP中培养,48h后观察细胞形态改变,分别检测Sox2、YAP、Cdx2 mRNA和蛋白表达水平。结果小鼠8-细胞胚经MPP处理24h后,桑葚胚YAP蛋白核定位水平降低,Yap mRNA水平无显著改变;经MPP处理48h后,5μmol/L组小鼠TSCs细胞出现细胞团块,10μmol/L组细胞增殖明显受抑制;与对照组相比,5μmol/L组细胞Sox2 mRNA表达水平升高,Yap和Cdx2 mRNA水平无显著改变,团块状细胞中的YAP蛋白失去明显的核内定位,SOX2和CDX2阳性细胞的表达更加密集。结论 ERα在小鼠桑葚胚和TSCs中调控YAP核定位,其在TSCs细胞中的作用与CDX2和SOX2的表达有关。

UPLC法测定大黄䗪虫丸中5种蒽醌类活性成分的含量

目的采用超高效液相色谱法同时测定大黄䗪虫丸中5种蒽醌类活性成分芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量。方法色谱柱:Syncronis aQ柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相:甲醇-0.1%甲酸水;流速:0.20 mL/min;柱温:30℃,进样量:2μL;检测波长:254 nm。结果在所建立的色谱条件下,5种蒽醌类活性成分在各自的线性范围内具有良好的线性关系(r≥0.9993),方法的精密度、重复性、稳定性、回收率考察,RSD均小于5%,符合分析要求。对3个厂家共9批大黄䗪虫丸样品的检测结果显示:芦荟大黄素含量0.253~0.496 mg/g、大黄酸0.158~0.805 mg/g、大黄素0.196~0.448 mg/g、大黄酚0.784~1.805 mg/g、大黄素甲醚0.192~0.386 mg/g。结论本方法快速、准确,可同时测定大黄䗪虫丸中5种蒽醌类活性成分的含量,可用于大黄䗪虫丸的质量控制;不同厂家大黄䗪虫丸中5种蒽醌类成分的总含量差异较小,但单一成分含量与所占比例差异较大。

提高生活垃圾焚烧发电厂总热效率的措施研究

随着近年来经济的不断发展,我国对于电力能源的需求量在不断增加。除此之外,生活垃圾的处理已经成为经济高速发展中大中型城市的重要难题。相关工作人员认为将两者进行有机的结合,能够在燃烧生活垃圾的同时提高生活垃圾焚烧发电厂的总热效率,这是我国未来研究的主要方向。在进行燃烧时,能够有助于将垃圾的体积减小并且减轻垃圾的质量,同时还能够利用燃烧产生的热能再次产生经济效益,生活垃圾焚烧发电在目前的各个环境中得到了极大的应用。自1988年起,我国建立了第1座垃圾焚烧发电站,在近30年的时间内发展极为迅速,所以相关工作人员想要使生活垃圾焚烧的整体质量得到提升。首先需要对生活垃圾焚烧发电厂建设过程中的问题进行分析,并不断对一系列的内容进行优化,这样才能有助于起到节能降耗,并且提高发电厂总热效率。

细化初一英语阶段性分层作业

近年来,有关英语分层作业,不断有人在分析、探讨、研究。但初一分层作业的成功与否直接决定着整个初中阶段的英语作业分层是否有效成功。所以把初一英语作业分层做到细化很有必要。