血清胱抑素-C与危重病人急性肾损伤

目的测定ICU的急性肾损伤(AKI)患者和ICU非AKI患者的血清胱抑素-C(CysC)、尿素、肌酐、尿酸及β2-MG的水平,研究CysC在AKI中的应用价值。方法采用日立7170全自动生化分析仪测定ICUAKI患者37例和ICU非AKI患者20例的CysC、尿素、肌酐、尿酸和β2-MG,用受试者工作曲线评价CysC的诊断价值,采用SPSS16.0统计软件包进行统计分析。结果ICU的AKI患者的血清CysC水平较ICU非AKI对照组升高,有统计学意义,且与尿素、肌酐、尿酸和β2-MG成正相关,相关系数分别为r=0.516,P<0.01、r=0.552,P<0.01、r=0.569,P<0.01、r=0.360,P<0.05;1/CysC与eGFR呈正相关,r=0.733,P<0.001;与AKI分期差异无统计学意义。ROC曲线分析证实CysC在AKI的诊断中敏感性和特异性最好。结论血清CysC可以做为ICU病人发生AKI的诊断指标,为AKI的及时诊断、肾功能的评估提供了可靠的依据,有助于临床更好的把握治疗时机。

同型半胱氨酸与冠状动脉粥样硬化性心脏病的相关性研究

目的研究冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病CHD)组与健康对照组血清同型半胱氨酸(Hcy)以及CHD不同临床类型血清Hcy水平,探讨Hcy与CHD的关系;研究CHD患者的年龄、血糖、血脂及心肌酶与Hcy的关系,探讨Hcy与CHD传统危险因素的关系。方法采用全自动生化分析仪使用循环酶法测定CHD患者(55例)及健康对照组(30例)血清中Hcy水平,同时测定血清血糖、血脂及心肌酶含量。结果①CHD患者的血清Hcy浓度明显高于健康对照组﹙P<0.05﹚;②不稳定心绞痛组、稳定心绞痛组与急性心梗组间Hcy浓度差异有显著性﹙P<0.05﹚;③吸烟与不吸烟组间CHD患者Hcy浓度比较差异无显著性﹙P>0.05﹚;④心功能Ⅰ级、Ⅱ级及Ⅲ级CHD患者Hcy浓度差异无显著性﹙P>0.05﹚;⑤Hcy与APOA1、Mb及APOB均具相关性。相关系数分别为:-0.570、-0.418和0.299;⑥以Hcy为应变量,依次进入方程的变量为Hcy和年龄。OR值分别为21.2和10.8,P<0.05。结论 Hcy是CHD的危险因素之一,检测血清Hcy对预防和诊治CHD具有重要的临床价值。

亚健康大便不成形人群结肠黏膜蛋白质组学研究

目的:利用蛋白质组学方法建立亚健康大便不成形人群结肠黏膜蛋白质图谱,并对部分表达明显差异的蛋白质进行鉴定,为探讨亚健康大便不成形人群的结肠黏膜改变机制提供理论依据。方法:采用高分辨双向凝胶电泳(2-DE)对亚健康大便不成形人群及健康志愿者结肠黏膜组织进行蛋白质分离,Im-ageMaster 2D Elite分析软件进行图像分析,应用生物质谱、蛋白质数据库及信息技术对表达明显差异的蛋白质进行质谱鉴定分析。结果:大便不成形组平均胶蛋白斑点数为517,正常对照组平均胶蛋白斑点数为535,与正常对照组平均胶蛋白斑点匹配数为366,匹配率为70.79%。对10个表达量存在显著差异的蛋白质点进行质谱分析鉴定出8个蛋白质,其中5个蛋白表达下调,3个蛋白表达上调。结论:亚健康大便不成形人群和正常人的结肠黏膜组织蛋白质表达存在差异,醛脱氢酶A1、线粒体羟甲基辅酶A合成酶、γ-肌动蛋白及膜联蛋白A5等8种蛋白可能与亚健康大便不成形的发生相关。

长沙市健康及亚健康成人血脂生物参考区间建立

目的初步建立长沙市健康及亚健康成人血脂生物参考区间。方法采用Roche Modular PPI全自动生化分析仪对长沙市3183例健康及亚健康成人的血清样本进行血脂(TG、TC及HDL)检测,并对结果进行统计学分析。结果TC与HDL的参考区间与目前使用的参考区间大致相同,但TG上限值明显增高;健康男性TG总体水平明显低于亚健康男性,而HDL则明显高于亚健康男性,健康女性与亚健康女性血脂无明显差异;男女各年龄阶段血脂的参考区间也存在不同程度差异。结论长沙市健康及亚健康成人血脂的参考区间在性别、年龄组间是有差异的;建议各实验室的建立该地区参考区间满足临床需要。

阴沟肠杆菌AmpC酶的检测及耐药性分析

目的了解某医院阴沟肠杆菌产AmpC酶情况及其对10种常用抗菌药物的耐药性，以指导临床合理选择抗菌药物。方法收集该院2007年8月-2008年7月临床分离的非重复阴沟肠杆菌98株，采用头孢西丁纸片扩散法进行AmpC酶初筛，酶提取物三维试验确证阴沟肠杆菌高产AmpC酶，聚合酶链反应检测AmpC酶基因。以K-B纸片扩散法进行药敏试验。结果98株阴沟肠杆菌中有36株携带AmpC酶，检出率36．73％。在36株产Ampc酶阴沟肠杆菌中，检测到仅携带DHA基因株6株（16．67％）；仅携带ACC基因株20株（55．56％）；同时携带ACC和MIR基因株8株（22．22％）；同时携带ACC、MIR和FOX基因株2株（5．56％）。产AmpC酶菌株对头孢西丁全部耐药，对第三代头孢菌素、联合抑酶剂、氨曲南、阿米卡星及环丙沙星均有不同程度耐药（44．44％～91．67％）；对头孢吡肟及亚胺培南较敏感，耐药率分别为27．78％、0．00％。结论阴沟肠杆菌AmpC酶携带率高，是导致其对第三代头孢菌素耐药的重要原因；治疗阴沟肠杆菌感染应以药敏检测结果为依据。

干化学法与湿化学法测定血氨及影响因素的分析

目的比较干化学法与湿化学法测定血氨水平及分析影响血氨测定的因素。方法分别用干化学法和湿化学法立即测定35例患者的无氨管和普通管血氨值,并对10例样本在4℃和25℃时进行0、0.5、1、2和4h的动态检测,并进行统计分析。结果干化学法测定血氨在(16～486)μmol/L内线性良好,湿化学法测定血氨在(15～473)μmol/L内线性良好;批内重复性较好。干化学法测定血氨水平高于湿化学法,普通管测定的血氨值高于无氨管,但立即检测差异无显著性(P>0.05)。随着标本放置时间的延长,血氨值会不断的升高,温度升高变化更明显,差异有显著性(P<0.05)。结论干化学法和湿化学方法测定血氨线性及批内重复性良好;临床上的血氨标本应采用无氨管,采集标本后应迅速送检立即检测,放置时间不得超出1h。

外周血单个核细胞二维凝胶电泳图谱的建立

目的:利用蛋白质组学方法建立肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)及正常人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)的双向凝胶电泳图谱。方法:利用固相pH梯度双向凝胶电泳分离HCC及正常人PBMC的总蛋白质,凝胶经蓝银显色后,采用PDQuest图像分析软件进行比较分析。结果:得到了分辨率较高、重复性较好的HCC及正常人PBMC双向凝胶电泳图谱,平均蛋白质点数分别为1206±48及1123±37;组内的平均匹配率分别为90.8%及92.6%。结论:建立了分辨率高且重复性较好的HCC及正常人PBMC双向凝胶电泳图谱,为寻找恶性肿瘤早期诊断、治疗及预后监测的有效指标提供了一条新的途径。

纤维支气管镜灌洗液结核分支杆菌实时PCR的诊断价值

目的评价纤维支气管镜(以下简称纤支镜)支气管肺泡灌洗液(BALF)的结核分支杆菌实时PCR对非典型肺结核的诊断价值。方法对83例临床可疑结核病人行纤支镜检查、活检及刷检,BALF行实时PCR与培养查结核分支杆菌。结果经检查临床确诊为肺结核47例,实时PCR其敏感性明显高于培养和刷片镜检,阳性检出率分别为80.9,61.7和34.0%。结论通过三种方法比较分析,证明实时PCR技术是一种速度快、敏感性高及特异性好的检测结核分支杆菌的重要方法,对结核病的早期诊断有重要的参考价值。

荧光定量PCR检测孕妇单纯疱疹病毒的感染

目的探讨荧光定量PCR技术(Fluorescence Quantitative Polymerase Chain Reaction, FQ-PCR)检测孕妇单纯疱疹病毒(HSV)感染的临床诊断价值。方法45例怀疑HSV-Ⅱ感染的孕妇用ELISA法检测血清HSV-ⅡIgM,同时用FQ-PCR 检测血清及宫颈分泌物HSV DNA。结果该组孕妇血清HSV-ⅡIgM阳性率为20.0%,血清HSV DNA阳性率为33.3%,后者检出阳性率明显高于前者(P<0.05)。宫颈分泌物标本HSV DNA阳性率为40.0%,明显高于血清ELISA检测阳性率(P<0.05),但与血清FQ-PCR检出阳性率无显著性差异(P>0.05)。结论荧光定量PCR检测孕妇HSV DNA感染可以提高诊断率及准确率。

HBV相关性肝细胞癌及肝硬化患者外周血单个核细胞质谱分析

目的:建立HBV相关性肝细胞癌(HCC)及肝硬化(LC)患者外周血单个核细胞(PBMC)的双向凝胶电泳图谱,并识别鉴定其差异表达的蛋白质.方法:利用固相pH梯度双向凝胶电泳分离HBV相关性HCC(n=16)及LC患者(n=12)PBMC的总蛋白质,凝胶经蓝银显色后,PDQuest图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质指纹图谱,然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点.结果:得到了分辨率较高、重复性较好的HBV相关性HCC及LC患者PBMC双向凝胶电泳图谱,HBV相关性HCC及LC患者PBMC凝胶的平均蛋白质点数分别为1186±43及1013±41;组内的平均匹配率分别为91.6%,90.2%.对27个差异蛋白质点进行了质谱分析,鉴定出16个蛋白质,在HBV相关性HCC患者PBMC中表达明显增强的有热休克蛋白质(HSP)27、ras癌基因家族(RAB14)、肌动蛋白、α1-抗胰蛋白及RNA结合蛋白调节亚基等13个蛋白点;而PDX6、HSPA8及锰超氧化物歧化酶(MnSOD)在HCC患者PBMC中低表达.这些差异蛋白质点包括蛋白质合成与分解、分子伴侣、解毒和DAN修复相关蛋白质、三大代谢相关酶类、细胞结构相关蛋白质以及信号传导相关蛋白质六类.结论:建立了分辨率高且重复性较好的HBV相关性HCC及LC患者PBMC双向凝胶电泳图谱,并识别鉴定出了一些与HBV相关性HCC癌变相关的差异表达的蛋白质.

肝细胞癌患者外周血单个核细胞中MnSOD及HSP27的表达

目的探讨锰超氧化物歧化酶(MnSOD)和热休克蛋白27(HSP27)与乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝细胞癌(HCC)发生的关系。方法采用免疫印迹(Western blot)技术分析了38例HBV相关性HCC、35例乙型肝炎肝硬化(LC)、36例慢性乙型肝炎(CHB)及30例健康对照外周血单个核细胞(PBMC)中MnSOD和HSP27两种蛋白的表达水平。结果HBV相关性HCC与LC、CHB及健康对照比较,MnSOD表达量明显降低(P<0.01),PBMC中HSP27表达明显增高(P<0.01),两者成负相关。结论MnSOD及HSP27可能成为HBV相关性HCC早期诊断、癌变机制、治疗及预后监测的外周血特异性分子标志物。

人工肝支持系统治疗前后HBV DNA水平的变化

目的探讨重型乙型病毒性肝炎HBVDNA的复制情况及其在人工肝支持系统治疗中的变化。方法采用荧光定量PCR方法检测重型乙型病毒性肝炎患者人工肝前后HBVDNA水平。结果人工肝治疗前后病人血清HBVDNA定量(log值)分别为(6.20±0.53),(5.33±0.47)(=36,<0.01);治疗后血清总胆红素、直接胆红素、总胆汁酸、丙氨酸转氨酶等明显下降(=78,<0.01),凝血酶原时间明显缩短(=78,<0.01)。结论人工肝支持系统治疗可降低重型乙型病毒性肝炎HBVDNA水平并能明显改善其肝功能。

系统性红斑狼疮患者sHLA-Ⅰ类分子的定量检测及意义

目的 :定量检测湖南SLE患者的sHLA -Ⅰ类分子水平。方法 :采用ELISA双抗夹心法检测血浆的sHLA -Ⅰ类分子水平。结果 :血浆sHLA -Ⅰ类分子水平 :2 6例活动期SLE患者为 970 .46± 34 2 .79μg/L ,2 9例非活动期SLE患者为 719.93± 10 2 .2 4μg/L ,37例正常人为 5 5 8.18± 189.6 9μg/L ,与正常人相比SLE活动期 (P <0 .0 1)和非活动期 (P <0 .0 5 )均明显增高 ,且活动期明显高于非活动期 (P <0 .0 1)。结论 :活动期和非活动期SLE患者血浆的sHLA -Ⅰ类分子水平明显增高 。

狼疮肾炎患者的sHLA-Ⅰ类分子定量检测及mRNA表达水平的研究

目的 :定量检测狼疮肾炎 (LN)患者的sHLA -Ⅰ类分子水平 ,并对其变化的可能机制从分子水平作初步探讨。方法 :ELISA双抗夹心法检测血浆的sHLA -Ⅰ类分子水平 ;RT -PCR检测PBMCHLA -Ⅰ类分子α链mRNA的表达水平。结果 :2 3例LN患者的血浆sHLA -Ⅰ类分子水平为 (96 1.40± 32 4.2 4) μg/L ,LN患者与正常人相比明显增高 (P <0 .0 1) ;LN患者PBMCHLA -Ⅰ类分子α3 结构域 -C末端及变位剪接片段mRNA表达水平明显高于正常人 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。结论 :LN患者血浆的sHLA -Ⅰ类分子水平明显增高 ,增高的可能机制之一是PBMCHLA -Ⅰ类分子α链变位剪接 ,使得 39KD的sHLA

原发性干燥综合征并发血液系统损害与免疫学指标相关性分析

目的探讨原发性干燥综合征(pSS)血液系统损害情况及其免疫学指标的改变。方法研究86例pSS患者血常规、抗核抗体、抗可溶性抗原、补体及免疫球蛋白等检测结果,分析血液系统改变时免疫学指标的改变。结果 86例pSS患者中出现血液系统改变的有58例(67.4%),其中贫血46例(53.5%),血小板减少16例(18.6%),白细胞减少20例(23.3%)。有血液系统损害的pSS患者出现抗SSA抗体阳性率高于无血液系统损害组,补体明显低于无血液系统损害组。结论血液系统损害在pSS中多见,以贫血最为常见,抗SSA抗体与补体可能与pSS的血液系统损害存在相关性。

血清EPO、铁蛋白、叶酸和维生素B_(12)在急性白血病患者中的水平变化及临床意义

目的探讨血清促红细胞生成素(EPO)、铁蛋白、叶酸和维生素B12在急性白血病(AL)患者中的水平变化及临床意义。方法 102例急性白血病患者根据临床资料分成:初治组42例、缓解组34例、复发组26例。另选取30名健康体检者为正常对照组。应用化学发光法检测血清EPO、铁蛋白、叶酸和维生素B12水平。结果1急性白血病中血清EPO、铁蛋白及维生素B12水平较正常组显著升高(P<0.01)。2血清EPO、铁蛋白及维生素B12三项联合检测在急性白血病中的阳性率(90.2%)明显高于各指标单项阳性率(P<0.05)。3血清EPO、铁蛋白及维生素B12水平在急性白血病初治时升高,缓解后降低,复发时复升;而叶酸水平在初治时降低,缓解时升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。4血清EPO与铁蛋白水平之间、铁蛋白与及维生素B12水平之间呈正相关(r=0.318,0.389;P<0.05)。结论血清EPO、铁蛋白、叶酸和维生素B12水平的检测对急性白血病的诊断及病情监测有一定参考价值。

血清t-PSA及f-PSA/t-PSA联合诊断前列腺癌的价值评价

目的应用logistic回归模型结合多指标联合诊断试验ROC分析评价血清t-PSA及f-PSA/t-PSA在前列腺癌诊断及联合诊断中的效果。方法采用酶联免疫荧光法对56例前列腺癌和80例良性前列腺增生患者进行血清t-PSA和f-PSA检测。分析ROC曲线,确定两项指标最佳诊断值及其灵敏度、特异度。采用Logistic回归建立预测概率模型,获得新的统计量,计算各曲线下面积(AUC),获得最佳诊断点。结果 t-PSA和f-PSA/t-PSA比值对前列腺癌具有最佳诊断价值的切点分别为7.69 ng/mL,0.165,AUC分别为0.784和0.817,二者联合检测AUC为0.868。结论 t-PSA和f-PSA/t-PSA比值的联合诊断有效的提高了前列腺癌的诊断率,ROC曲线结合logistic回归模型简单有效,适用于多指标联合诊断试验的分析评价。

3种品牌POCT血糖仪与生化分析仪己糖激酶法检测血糖的比对

目的以己糖激酶法检测血糖作为参比方法,评价3种品牌各10台POCT血糖仪的正确度和精密度。方法采集血糖浓度分布于2.8~22.2 mmol/L的5份静脉血,平均分成2份,一份用AU680全自动生化仪平行检测2次,取其均值作为靶值,另一份用POCT血糖仪重复检测10次,取其均值与靶值比对,评价其正确度。选取低值约4.5 mmol/L的L样品、高值约10.0 mmol/L的H样品,用POCT血糖仪重复测定20次,评价其精密度。结果 A品牌血糖仪检测L样品的标准差(s)为0.20~0.49 mmol/L,变异系数(CV)为3.41%~8.48%,精密度合格比为9/10;检测H样品的s为0.35~0.59 mmol/L,CV为3.35%~5.30%,精密度10台均合格;与靶值比对,1台合格率为80%,另9台合格率为20%~40%,正确度合格比为1/10。B品牌血糖仪检测L样品的s为0.36~0.54 mmol/L,CV为9.23%~13.74%,精密度合格比为2/10;检测H样品的s为0.19~0.46 mmol/L,CV为1.90%~4.64%,10台均合格;与靶值比对,2台合格率为80%,另8台合格率为100%,10台的正确度均合格。C品牌血糖仪检测L样品的s为0.17~0.42 mmol/L,CV为3.66%~9.12%,10台均合格;检测H样品的s为0.24~0.34 mmol/L,CV为2.53%~3.82%,精密度10台均合格;与靶值比对,10台的合格率均为100%,正确度均合格。结论 A品牌血糖仪的正确度、B品牌血糖仪的精密度在此次比对中未通过,不能投入医疗机构使用。C品牌血糖仪的精密度和正确度性能均优秀。临床科室在选择血糖仪时,需考虑其所采用的检测方法。

胸腹水脑脊液中结核杆菌的检测

目的 为临床结核性胸膜炎、腹膜炎、脑膜炎结核杆菌的检测寻找一个敏感、快速、可靠的实验检测方法。 方法 采用直接涂片、血清抗体检测和荧光定量—聚合酶链反应 (FQ -PCR )方法 ,对 85份结核患者和 13 1份非结核患者脑脊液和胸腹水标本中结核杆菌和抗结合抗体进行分析 ,其中胸水 67份 ,腹水 2 1份 ,脑脊液 12 8份。 结果 临床治疗性确诊的 85例结核性胸膜炎、腹膜炎、脑膜炎患者的胸腹水脑脊液标本 ,FQ -PCR检测出 5 3例结核杆菌检出阳性(FQ -PCR) ,阳性率为 62 .4% ,13 1例非结核患者均为阴性 ;85例结核患者胸腹水直接涂片抗酸染色镜检 11例阳性 ,阳性率仅为 13 .0 % ,13 1例非结核性标本中 ,结核抗体检出 3 6例阳性 ,假阳性率达 2 7.4%。 结论 荧光定量—聚合酶链反应 (FQ -PCR)快速诊断结核性胸膜炎、腹膜炎、脑膜炎与其他传统方法相比较 ,具有快速、灵敏、高特异性等优点 ,并能克服一般聚合酶链反应假阳性多的缺点。

造血干细胞移植受者免疫抑制治疗与巨细胞病毒感染的关系

目的:探讨异基因造血干细胞移植(HSCT)术后免疫抑制治疗个体外周血中巨细胞病毒(CMV)脱氧核糖核酸(DNA)与免疫抑制剂环孢素A(CsA)血药浓度变化的关系,并评价其潜在的临床应用价值。方法:选择行异基因HSCT的32例患者进行回顾性分析。移植前采用更昔洛韦预防CMV感染。移植后应用核酸扩增(PCR)荧光检测法定期进行CMVDNA监测。根据CMVDNA检测结果将患者分为CMVDNA阴性组和CMVDNA阳性组。用酶放大免疫技术(EMIT)定期监测CsA血药浓度,分析CMVDNA与CsA血药浓度的关系。结果:异基因造血干细胞患者CMV感染率为53.13%(17/32);DNA阳性组的CsA血药浓度明显高于CMVDNA阴性组(P<0.05);通过ROC曲线得出异基因干细胞移植患者使用CsA药物第7,14,21天时曲线下面积与0.5比较,差异具有统计学意义(P<0.05),分别对应的血药浓度为203.15,215.55和302.65ng/mL。结论:免疫抑制药物浓度可影响CMVDNA的动态变化,CsA血药浓度偏高可能是导致造血干细胞移植受者移植后对CMV易感的原因之一,适时监测CsA血药浓度对指导临床用药有一定的辅助价值。