痰热清胶囊HPLC指纹图谱研究

文章的研究目的:初步建立痰热清胶囊的HPLC(高效液相色谱)指纹图谱方法,为其品质评价研究提供依据。方法:采用Ultimate XB-C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm);以乙腈(A)-0.2%甲酸(B)为流动相,进行梯度洗脱;流速为0.8~1.0m L·min^(-1);检测波长280nm;柱温30℃;进样量10μL。测定3批痰热清胶囊的色谱图,应用相似度分析软件建立痰热清胶囊共有模式,并对指纹共有峰进行指认。结果:首次建立了痰热清胶囊HPLC指纹图谱方法并建立了其共有模式,3批痰热清胶囊的相似度可达1.000;确定共有峰16个,并对其进行药材归属和指认。结论:文章建立的HPLC指纹图谱方法操作简便,可靠、稳定、准确,重复性好,为痰热清胶囊的质量控制提供科学依据。

HPLC法同时测定痰热清胶囊中7种成分的含量

目的:建立同时测定痰热清胶囊中7种成分含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Ultimate XB C_(18),流动相为乙腈-0.2%甲酸溶液(梯度洗脱),流速为0.8 mL/min,检测波长为325 nm,柱温为35℃,进样量为10μL。结果:绿原酸、异连翘酯苷A、连翘酯苷A、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C和黄芩苷检测进样量线性范围分别为0.025~0.5μg(r=0.999 6)、0.025~0.5μg(r=0.999 7)、0.050~1.0μg(r=0.999 9)、0.025~0.5μg(r=0.999 7)、0.025~0.5μg(r=0.999 6)、0.025~0.5μg(r=0.999 6)和0.750~1.5μg(r=0.999 9);定量限均≤1.5 ng,检测限均为0.5 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3.0%;加样回收率为95.28%~106.30%(RSD为0.97%~2.14%,n=9)。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于痰热清胶囊中7种成分含量的同时测定。

基于HPLC-ESI-MS/MS技术分析痰热清胶囊和痰热清注射液化学成分的差异

目的:阐明痰热清的化学成分以及痰热清胶囊与痰热清注射液化学成分的差异。方法:采用高效液相色谱法串联质谱(HPLC-ESI-MS/MS)技术,乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源负离子模式下采集数据,并通过准分子离子及二级碎片离子对化学成分进行鉴定。结果:痰热清胶囊中鉴定有机酸类成分7个、黄酮类成分10个、环烯醚萜类成分4个、木脂素类成分3个、苯乙醇苷类成分9个、胆汁酸类成分4个以及未知成分4个等共41个化合物。其中,经由对照品确证化学结构25个,推测化合物结构16个(含4个未知成分)。痰热清注射液中共鉴定化合物23个,相比胶囊注射液中连翘种苷异构体(3个),獐芽菜苷,连翘酯苷B,异连翘酯苷A,连翘酯苷A,芦丁,连翘种苷A异构体(2个),金丝桃苷,aldosecologanin,松脂素-β-D-葡萄糖苷/表松脂素-4'-O-葡萄糖苷/马台树脂醇-4'-O-葡萄糖苷异构体(2个),连翘苷,黄芩素,牛磺鹅去氧胆酸和黄芩提取物中所含的1个未知化合物等18个成分均缺失,可能是注射液无菌生产过程采用活性炭吸附、高温灭菌、配液等工艺以及过程控制中采用超滤技术,从而造成两种制剂化学成分的差异。结论:通过该研究建立的HPLC-ESIMS/MS分析方法,能有效表征痰热清胶囊和痰热清注射液的化学成分差异,可以为两种制剂的质量控制提供依据。