“互联网+”背景下翻转课堂在临床医学PBL教学中的应用

目的:探讨“互联网+”背景下翻转课堂在临床医学专业PBL教学中的作用。方法:采用“互联网+”背景下翻转课堂进行临床医学PBL教学,对两届学生进行学习效果评价。结果:试验组课堂成绩、人均期中、期末表现评价与对照组无明显差异,但期末成绩、综合成绩明显高于对照组。结论:充分利用互联网进行翻转课堂教学能提高临床医学理论课的教学效果,且不削弱线上PBL课堂讨论效果。

乳鼠成骨细胞的原代培养与鉴定

目的：验证及改良成骨细胞原代培养常用方法，探讨该方法的可行性和应用价值。方法：取材于出生2～3d小鼠颅骨，以含20％胎牛血清的DMEM培养液进行培养，采用胶原酶消化法分离成骨细胞，并进行细胞接种与传代。细胞采用Gomori钙钴法染色并进行细胞形态观察，鉴定成骨细胞起源，根据细胞的生长曲线以及贴壁率观察细胞的生长情况。结果：原代培养48h后，大量细胞贴壁生长，呈长梭形或有2～3个突起，胞质透亮、饱满，7d后细胞铺满整个平皿底面。所得细胞经Gomori钙钴法鉴定，证实为成骨细胞。细胞接种后第1个24h为细胞潜伏适应期，第2～7个24h生长曲线基本为线性曲线，是细胞的对数生长期。细胞贴壁主要发生在接种10h之内。结论：采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养方法。

氟对成骨细胞中微小染色体维系蛋白3表达的影响

目的探讨氟对体外培养成骨细胞中微小染色体维系蛋白3（minichromosome maintenance deficient3，MCM3）表达的影响。方法采用免疫组织化学技术、原位杂交技术以及SYBR GreenI嵌合荧光实时定量PCR（realtime RT-PCR）方法，检测不同剂量氟（0、5、10、20、40mg／L，处理10d）对体外培养成骨细胞中MCM3表达的影响。结果0、5、10、20、40mg／L各组细胞中均有MCM3蛋白及其mRNA表达，主要在细胞核中表达，与对照组比较，染氟实验组阳性表达强度高于对照组，阳性细胞数多于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），其中10mg／L组阳性表达高于其他实验组（P〈0．05），呈现双向作用。real time RT-PCR检测显示，各组均可检测到MCM3mRNA．相对定量比由对照组到高剂量组约为102：259：145：135：100：染氟实验组中5、10、20mg／L组表达量高于对照组和40mg／L组，以5mg／L组表达量最高，随着染氟剂量增加，基因表达量降低。结论不同剂量氟对成骨细胞中MCM3表达的影响不同，低剂量氟可以促进MCM3的表达，随剂量增加氟的促进作用减弱。

氟对小鼠成骨细胞增殖的影响

目的 观察氟对体外培养小鼠成骨细胞增殖的影响。方法 原代培养小鼠成骨细胞，以0（对照组）、5、10、20、40mg／L剂量染氟，光、电镜观察成骨细胞的形态学变化；采用生长曲线、噻唑蓝（MTT）法及流式细胞仪检测细胞周期，观察细胞数量变化和细胞周期时相分布。结果 第10天时，5、10、20mg／L染氟组从形态学上表现出细胞增殖。而40mg／L组中出现细胞凋亡。染氟24h时，20mg／L组与对照组相比细胞增殖明显，差异具有统计学意义（P〈0．05），随着时间延长，染氟组表现出更强的增殖活性，至72h时，各染氟组成骨细胞增殖均高于对照组（P〈0．05）。24h时各染氟组间细胞增殖水平未见明显差异（P〉0．05），48h以后40mg／L组明显低于其他各染氟组（P〈0．05）。而染氟72h时5mg／L组增殖强度也低于10、20mg／L组（P〈0．05）。与对照组相比，10、20mg／L组处于G0／G1期的细胞数减少，而S期细胞数增加（P〈0．05），同时两组的细胞增殖指数也高于对照组（P〈0．05），生长表现出增殖状态；其中10mg／L组与其他染氟组之间，差异有统计学意义（P〈0．05），表现为细胞增殖能力增强。结论 低剂量的氟在较短作用时间内可以促进体外培养小鼠成骨细胞增殖，随剂量增加和暴露时间延长其促进作用减弱。

留学生开设组织胚胎学课程的实践与体会

我国医学高等教育日趋国际化,教师必须根据留学生所在国家的国情、文化背景、学生性格特点等方面的不同,在教学实践中做出相应调整,以期达到较好的教学效果。笔者积累了五年的组织胚胎学留学生教学经验,从教学方法的调整、发挥教师与学生的主观能动性、实验教学、学生考核方式等方面探讨了留学生全英语组织胚胎学教学体会。

不同价态形态砷与砷中毒患者病情关系的研究

目的:通过对砷中毒患者血样与尿样进行砷价态形态、肝肾功等指标的检测,初步探索砷不同价态形态与患者病情程度之间的关系。方法:采集150例新疆奎屯农七师、内蒙古呼和浩特市和山西省山阴县等地对照组及患者的血样与尿样,分别检测样品中总砷、As(Ⅲ)(三价无机砷)、DMA(二甲基砷酸盐)、MMA(一甲基砷酸盐)的浓度,以及患者皮肤损害、相关酶和肝肾功的变化;通过统计学分析,了解相互之间的关系。结果:对于重度砷中毒患者,iAsⅢ、MMA和DMA的浓度与GST01(谷胱甘肽硫转移酶)、PNP20(嘌呤核苷磷酸化酶)、PNP51的浓度密切相关;其中MMA与PNP51之间呈正相关,r值为0.72334,P<0.01;iAsⅢ和DMA与PNP51也呈正相关,r值分别为0.57496和0.56569,P<0.05;而iAsⅢ和DMA与GST01之间表现出负相关的关系,r分别为-0.42833和-0.47226,P<0.05;iAsⅢ和DMA与AS3MT(砷甲基转移酶)呈负相关,r分别为-0.50329和-0.65320,P<0.05。iAsⅢ、MMA和DMA含量则表现出与皮肤损害包括色素缺失、色素减少及皮肤角化的弱正相关关系,但相关性较弱,r为0.32389,P<0.05。Logistic有序回归分析结果显示:iAsⅢ、DMA、MMA的回归系数β在α=0.05水平上无统计学意义。结论:砷不同价态形态与患者病情程度相关,主要表现为影响酶的活性。

组织胚胎学实验教学实践与思考

把握好组织胚胎学的实验教学工作是提高教学质量的重要环节。在实验教学过程中我们通过加强实验教学的集体备课,统一实验教学的认识,编写自用实验教学教材,突出图片教学、学生绘图与实验考核等教学方式,以促进实验与理论教学的有机结合,提高学生的实践学习能力。

MTT法检测RAW264.7细胞活力及可能因素分析

目的通过MTT法检测RAW264.7细胞活力并绘制生长曲线,探讨MTT作用环节中的可能影响因素,优化实验方案。方法以对数生长期的RAW264.7细胞为实验对象,分别用正常培养和脱离血清培养法,记录在不同时间点的OD值。并在加入DMSO后,分别在6、12、24和48h及3、15和30d进行OD值测量。结果加入DMSO后不同时间点的MTT法检测结果,随着时间的延长,结果差异越来越大,超过3d后影响较大,与对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。3d内,与对照组比较,差异没有统计学意义(P>0.05)。结论①验证、测量并绘制RAW264.7的生长曲线;②加盖后影响透光度,增大了OD值,影响了实验结果;③随着DMSO时间的延长以第3天为限,否则影响实验结果。

过量氟引起成骨细胞内质网应激信号通路的基因差异表达

目的：观察人成骨细胞在过量氟作用下未折叠蛋白反应（UPR）信号通路的差异基因表达，探索在氟中毒条件下成骨细胞内质网应激的作用。方法体外培养人成骨细胞染氟模型，用不同浓度的氟干预24 h后M T S法检测细胞存活率和流式细胞仪检测细胞凋亡百分率，用UPR信号通路PCR Array芯片检测通路中相关基因表达的情况，并用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测蛋白表达。结果在氟化钠浓度为0、5、10、20、40、80 mg/L 时，细胞存活率分别为（100．6785±2．8303）％、（105．3934±2．5384）％、（106．1257±2．0483）％、（77．9773±2．5443）％（与对照组比较 P＜0．05）、（30．2377±0．6327）％（与对照组比较 P＜0．05）。流式细胞仪检测，凋亡率分别为5mg/L组4．8％，10mg/L组13．8％，20mg/L组37．0％，40mg/L组58．9％，80 mg/L组63．2％（P＜0．05）。PCR芯片检测发现1个基因表达下调，14个基因表达上调。Western blot结果显示， BIP、ATF4、CHOP、IRE1均呈现出不同程度的随氟剂量增加蛋白表达逐渐上调。XBP1在NaF 5～20 mg/L表达逐渐增强，在40与80 mg/L时表达减弱。结论氟化钠可以通过PERK和IRE1途径引起成骨细胞内质网应激，并且可以引起成骨细胞凋亡。

人体组织学数字化切片视听课程的构建及探索

互联网时代的迅猛发展和普及，使现代教育面临了前所未有的冲击和考验。如何改变既往的教学模式、教学目标和教学手段，以适应当前网络时代对教育教学的要求，是当今医学教学工作者需要思考的课题。

基于我国实际对PBL与传统教学结合模式的探索和实践

为提高教学质量,解决学生的"学会"与"会学"和教师的"授鱼"与"授渔"问题,在传统教学中引入了PBL教学法,文章分析了PBL与我国实际相适应的切入点,找到了目前PBL在我国实施的有效途径—PBL与传统教学结合模式,并就此从动机和指导思想,运用的方法、效果评价、现存的问题及今后的方向做了总结。

胚胎学资源库及数字化的建设及应用

人体胚胎学是基础医学课程中的重要内容，研究人体发生和发育过程中，经历从时间、空间、量变、质变的动态和连续复杂的变化过程，其内容抽象、机理复杂、空间立体感强[1]。近年来，随着网络技术3G和计算机技术3D的日益发展和普及，

组织胚胎屏障结构教学的经验和体会

组织学与胚胎学是医学生较早接触的一门医学形态学专业课程，是研究机体微细结构、相关功能及人体发生发育的一门学科，是在组织、细胞、亚细胞和分子水平对人体进行的研究。由于其研究内容主要是在光镜和电镜下的微细结构，其中很大一部分时间要借助显微镜观察组织切片进行学习。这使得很多学生对所学知识感觉太抽象，知识点零散。

氟化物对体外培养的小鼠成骨细胞增殖能力的影响

目的:观察氟化钠对体外培养的成骨细胞的增殖能力的影响。方法:采用四唑盐(MTT)比色法,观察不同剂量氟化钠在不同时间对体外培养的小鼠成骨细胞增殖活力的影响。结果:剂量为2.5、5.0mg/L的氟化钠作用2d时,可使成骨细胞增殖活力较对照组明显增强;≥20mg/L时随着氟化钠剂量的增加和作用时间的延长,成骨细胞的增殖活力明显减弱。结论:氟化钠对成骨细胞的增殖呈现双向调节,且随时间的延长对细胞增殖能力的抑制逐渐增强。

乳鼠成骨细胞体外培养

目的：建立乳鼠成骨细胞体外培养方法，探讨该方法的可行性和应用价值。方法：用出生1～3d乳鼠颅骨,采用多次胶原酶消化法进行细胞体外培养。倒置显微镜观察细胞形态，对其碱性磷酸酶（ALP）活性及矿化能力进行鉴定，并测定细胞生长曲线。结果：原代培养24h后,大量细胞贴壁生长．细胞呈圆形，48h后,贴壁细胞呈长梭形、三角形或不规则多边形．并且贴壁细胞伸出2～3个突起,胞质透亮、饱满，7d后细胞铺满整个平皿底面。经鉴定，培养细胞具有体内成骨细胞的生物学特性。细胞接种后第1与第2个24h为细胞的潜伏适应期，第3与第7个24h生长曲线基本为线性曲线，是细胞的对数生长期。结论：采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞的方法切实可行。