盐酸美金刚胺含量分析方法的研究

在一定 p H值下 ,铵离子和二价铜离子反应 ,生成络合物在紫外有最大吸收 ,吸收波长为 36 5 nm,建立一种简便可靠的盐酸美金刚胺分析方法。盐酸美金刚胺在 1 0 0— 5 0 0 μg· m L-1范围内呈良好的线性关系 ,回归方程为 A=0 .0 0 2 6 C(r=0 .9987)。平均回收率为 1 0 0 .7%(n=6 ) ,相对标准偏差为 1 .37%。本方法简便、可靠、准确。

HiTrapQ柱FPLC快速纯化人血清白蛋白(HSA)

为研制新型三、四天线半乳糖肝受体功能显像剂,须将三、四天线半乳糖与人血清白蛋白(HSA)偶联,故必须制备较纯净人血清白蛋白(HSA)。在FPLC上用HiTrapQ柱快速纯化人血清白蛋白(HSA)。经PAGE和SDS-PAGE鉴定只有一条带。在FPLC上用HiTrapQ柱纯化HSA有速度快、纯化量大且方法较为简便等特点。

放射性^(99m)Tc标记的NMDA受体配基N_2S_2-Memantine的合成

以美金刚胺为原料,先与氯乙酰氯反应,再与二硫二氮缩合,最后与醋酸汞硫化氢反应脱巯基保护基得到标记前体N-[2-(N-(2-巯基乙基))氨基甲酰甲基]-N-(2-巯基乙基)-3,5-二甲基金刚烷胺基乙酰胺。关键化合物N-[2-((2-(S-(4-甲氧基苄基)巯基)乙基)氨基)乙酰基]-S-(4-甲氧基苄基)-2-氨基乙硫醇和N-[2-(S-(4-甲氧基苄基)硫基)乙基]-N-[(N-(2-(S-(4-甲氧基苄基)硫基)乙基)氨基)甲酰甲基]-3,5-二甲基金刚烷胺基乙酰胺得到核磁和质谱表征,总收率为32%。

老年性痴呆患者血浆中氨基酸类神经递质的HPLC荧光检测

采用邻苯二甲醛（OPA）柱前衍生反相高效液相色谱法测定了老年痴呆患者（AD）血浆中4种氨基酸类神经递质（天门冬氨酸、谷氨酸、γ-氨基丁酸、甘氨酸）的含量。用Hanbon反相柱分离，荧光检测器检测；流动相A为四氢呋喃-甲醇-0．05mol／L磷酸二氢钾（pH6．0）（体积比2：35：63）；流动相B为90％甲醇；采用二元梯度洗脱。天门冬氨酸、谷氨酸、γ-氨基丁酸、甘氨酸的检出限分别为0．21、0．01、0．05、0．02pmol／L，在对应的浓度范围内线性关系良好，相关系数为0．9975～0．9991，峰面积的相对标准偏差分别为1．08％、1．24％、1．12％和1．35％，回收率为98％～99％。AD患者血浆中天门冬氨酸和谷氨酸的浓度显著高于对照组（P〈0．05），甘氨酸与对照组无显著差异。

离子对色谱法研究吡咯并喹呤醌与D-丝氨酸反应的化学动力学

D-丝氨酸(DSer)作为一种新的神经递质存在于胶质细胞,在中枢神经系统疾病中发挥重要的作用;吡咯并喹呤醌(PQQ)能够促进神经因子的产生和神经保护作用。采用离子对色谱法测定吡咯并喹呤醌(PQQ)与DSer反应中游离PQQ的浓度,通过化学反应动力学研究PQQ与DSer的作用,为PQQ在神经递质的调节作用机制提供重要的信息。采用四丁基溴化铵为离子对试剂,PQQ与DSer孵育反应后各物质在Amethyst C18-P柱上的分离度较好,平均回收率为94.2%～99.3%,相对标准偏差为1.05%～2.03%。PQQ-DSer反应的平均速率常数分别为0.032 h-1(25℃)、0.07 h-1(37℃)、0.17 h-1(50℃);平均反应活化能为54.7 kJ/mol;半衰期分别为22.0 h(25℃)、9.8 h(37℃)和3.99 h(50℃)。动力学结果显示PQQ对脑内DSer的平衡具有重要的调节作用。该方法简便、可靠。

磁性纳米分子印迹聚合物的制备及其对生物体内PQQ-DA痕量产物的研究

以磁性Fe_3O_4为内核,对磁性纳米粒子表面进行包裹和修饰,制备了对吡咯并喹啉醌-多巴胺(PQQ-DA)具有高识别性、高选择性的磁性纳米分子印迹材料,并结合超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)测定了生物体内PQQ-DA的含量。结果显示,PQQ-DA在0.02～0.1 mg/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数(r^2)为0.996 6,检出限为0.2×10^(-11) mg/mL,加标回收率为88.7%～95.5%,相对标准偏差为2.6%～3.2%。该方法灵敏度高、重复性好,可用于生物体内PQQ-DA痕量产物的检测。

改良分类法处置放射性废物效果的研究

目的采用改良分类法对放射性废物库进行分类管理并处置放射性废物;测定放射性废物库辐射波动情况研究其运行效果。方法通过以半衰期相同、相近的分类法对放射性废弃物进行分类,放射性废物采用货架式存放,放射性实验动物尸体采用醇性固定液浸泡防腐;放射性废弃物进、出库前、后对现场辐射水平进行监测。结果改良分类法处置放射性废物后放射性废物库总存量中的多数放射性废物能在较短时间内达到免管废物效果,放射性废弃物的总存量大幅减少到近37%水平。结论处置流程简洁、合理,值得在众多医疗、科研等中、低强度放射性应用单位推广试用。

磷屏成像系统的应用与维护

介绍磷屏成像系统的成像原理、系统特点,将磷屏成像系统与冷冻切片机联合使用,通过具体案例阐述磷屏成像系统的应用与维护注意事项。

外置式真空冷冻干燥样品阀漏气解决方法的研究

找到一种外置式真空冷冻干燥样品阀冬季时段出现非损坏状态却存在漏气故障现象的解决方法。通过空调加热使室内温度升高,使漏气样品阀可以恢复正常使用,从而延长样品阀的使用寿命,还可以减少样品阀误判为损坏而引起的浪费。地处冬季气温≤0℃或类似室内温度过低而引起的外置式真空冷冻干燥样品阀漏气故障的用户可以参照此处理方法。

GC-1200γ计数器在^(125)I体外细胞摄取实验中测量问题分析

目的探讨国产GC-1200γ放免计数器在^(125)I-FSH体外细胞摄取实验中可能会影响测量结果的几个相关问题。方法样品进入测量室前先做本底测量;通过变换空白放免管、低计数管、高计数管在同一测量架的不同位置及在待测区的不同位置所测得的CPM进行统计比较。结果在高计数单个样品达1.9×10~6 CPM时对相邻位低计数管计数的影响为7%;对相邻探测器中低计数管计数的影响为7.33%;将所有样本由高到低排列并将高计数样品架放置于紧贴探测器的待测位置,对低计数管的计数影响为5.33%。结论国产GC-1200γ放免计数器适用于^(125)I核素标记的体外细胞摄取实验的测量。

EGF受体配基N_2S_2-Quinazoline的合成

以6-硝基喹唑啉酮为原料,经过氯化亚砜氯化,间碘苯胺连接,氯化亚锡还原,制得6-氨基-4-[(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉,再与氯乙酰氯反应,二硫二氮缩合连接,最后与醋酸汞硫化氢反应脱巯基保护基得到标记前体N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺,主要产物得到核磁和质谱表征,总收率2.5%。

反相高效液相色谱法测定^(18)F-FECNT的前体化合物nor-CClT

提出了用反相高效液相色谱法测定18F-FECNT的标记前体化合物nor-CClT[2β-甲酯基-3-β(4氯苯基)去甲基托烷]的含量。采用Lichrospher C18色谱柱作为固定相,用甲醇、水及三乙胺以体积比为65比35比0.21混合的溶液作为流动相进行分离。测定中采用紫外检测波长为230 nm,在此条件下,nor-CClT达到了与共存杂质间的良好分离,所测得峰面积值与nor-CClT的质量浓度在0.100~1.200 g.L-1范围内呈线性关系。取0.400,0.600,1.000 g.L-1nor-CClT标准溶液做精密度试验,测得日内相对标准偏差(n=5)依次为0.53%,0.46%,0.32%。

冷冻切片机防卷板远距操作装置的设计与应用

目的:为了防止实验人员操作冷冻切片机防卷板过程中手部长时间受凉、冻伤以及过长时间弯腰而引发劳损。方法:在切片机防卷板侧旁设计、安装一个连轴、变轴装置,一端连接套牢防卷板的操作手柄,一端通过推拉操作防卷板手柄,推拉位置高于切片机玻璃门水平。结果:在安装了远距操作装置后,避免了手部寒冷的感觉,避免了长时间的弯腰动作,操作比原先更方便舒适。结论:冷冻切片机防卷板远距操作装置改善了翻动切片机防卷板的工作环境,避免了操作人员的手部受冻,同时也保护了操作人员的腰部,是一种简单、实用的翻动切片机防卷板辅助装置。

外置式真空冷冻干燥机常见故障分析及处理

观察、归纳外置式真空冷冻干燥机改造过程中的异常状况及故障,分析其产生的原因并采取针对性的维护和修复措施,使故障在短时间内排除,从而提高设备的使用效率,延长设备的使用寿命。

NMDA受体显像剂^(99)Tc^m-NCAM的制备和受体结合分析

用99Tcm标记新的美金刚胺(memantine)衍生物N-[2-(N-(2-巯基乙基))氨基乙酰基]-N-(2-巯基乙基)-3,5-二甲基金刚烷胺基乙酰胺(N2S2-memantine,简称NCAM),并通过优化标记条件获得放射化学纯度达95%以上的标记化合物99Tcm-NCAM。脂溶性实验测得其脂水分配系数lgP=1.90。放射性受体结合分析显示,其与N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体结合具有饱和性,根据受体B区理论编制的计算机程序求出NMDA受体结合参数最大结合容量Bmax=56.8μmol/g,平衡解离常数Kd=706.3 nmol/L,特异性NMDA受体拮抗剂能阻断其与NMDA受体的结合。结果显示99Tcm-NCAM与NMDA受体结合具有中等程度的亲和力和结合特异性,具有较好的脂溶性,易透过血脑屏障,有可能成为一种新的NMDA受体显像剂。

注射用重组人甲状旁腺素代谢产物PTH(1-34)的测定及其药动学

目的:注射用重组人甲状旁腺素PTH(1-84)在体内的代谢产物PTH(1-34)对骨质疏松症具有较好的疗效,本试验通过测定人血浆中PTH(1-34)浓度的变化,了解PTH(1-34)在体内的分布,对注射用重组人甲状旁腺素PTH(1-84)的药效及作用机制具有重要意义。方法:采用固相萃取法结合放射免疫分析(RIA)测定人血浆中注射用重组人甲状旁腺素代谢产物PTH(1-34)的浓度,采用DAS2.0数据处理系统进行药动学分析。结果:PTH(1-34)的线性范围为10～1 280 pg.mL-1,最低检测限为10 pg.mL-1(RSD为3.51%),采用固相萃取柱Styre Screen H2P在血浆样本萃取效率大于85%。结论:本法测定注射用重组人甲状旁腺素在血浆中的代谢产物PTH(1-34)的方法是可行的,特异性、灵敏度、精密度和准确度较高,可应用于临床样本的检测。

柱前衍生HPLC-UV法测定盐酸美金刚胺中主药及有关物质的含量

目的:建立以柱前衍生高效液相色谱-紫外分光光度法测定盐酸美金刚胺中主药及有关物质含量的方法。方法:色谱柱为Hypersil ODS2 C18,衍生试剂为对硝基苯甲酰氯,流动相为乙腈-水(85∶15),流速为1.0mL·min-1,检测波长为220nm,柱温为室温,进样量为5μL。结果:盐酸美金刚胺检测浓度的线性范围为0.2～1.0mg·mL-1(r=0.9993),平均加样回收率为98.5%,RSD=1.42%,最小检测限为3.0ng(S/N≥3),平均有关物质含量均小于0.16%。结论:本方法操作简便,结果准确可靠、重现性好,可用于该制剂的含量测定。

毛细管电泳分析生物样本中儿茶酚氧甲基转移酶COMT活性

采用毛细管电泳快速检测生物样本中儿茶酚氧甲基转移酶（COMT）的活性。运行缓冲液为60%200 mmol/L PBS＋40%75 mmol/L硼酸（含0.05%三氟乙酸）,p H 10。在25~200μg/m L范围内线性关系良好,回归方程为Y=1.66×105x＋1.17×104,相关系数r2=0.9951。检出限0.02~0.5μmol/L（S/N≥3）。分析了抑郁症模型鼠以及叶酸和不同剂量PQQ腹腔注射后脑组织COM T活性的变化,为抑郁症的发病机制和药物作用靶点提供了新的依据。

放射免疫分析法测定重组人甲状旁腺素(1-84)的血药浓度及其药动学研究

目的:建立测定注射用重组人甲状旁腺素(rhPTH)(1-84)血药浓度的方法并对其药动学进行研究,为rhPTH(1-84)Ⅰ期临床试验提供准确的测定方法。方法:采用放射免疫分析(RIA)法,以甲状腺素放射免疫试剂盒(ELISA-rhPTH)测定rhPTH(1-84)血药浓度。结果:rhPTH(1-84)血药浓度在24～520pg/ml范围内线性关系良好(r=0.9989),最低定量限为10pg/ml;血浆提取回收率为86.7%～92.8%;日内RSD<7%,日间RSD<9%;血浆样本-80℃贮存80d稳定性良好。患者皮下注射2.0μg/kgrhPTH(1-84)后的主要药动学参数分别为:tmax(0.63±0.28)h、cmax(146.55±46.35)pg/ml,AUC0-10h(532.36±132.54)pg/ml。结论:本法特异性好、灵敏度高、操作简便。