槐耳清膏通过抑制ROS介导的腺泡细胞焦亡减轻小鼠急性胰腺炎的严重程度

目的探究槐耳清膏对急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)的治疗作用及其潜在机制。方法体内利用雨蛙肽诱导的小鼠AP模型验证槐耳清膏(简称槐耳)的治疗效果,采用HE染色及免疫组化染色评价小鼠胰腺组织的病理改变、采用透射电镜观察小鼠胰腺的焦亡形态;体外以266-6细胞系作为实验载体验证槐耳对腺泡细胞的保护作用,利用电镜及Western blotting评价腺泡细胞的焦亡水平,利用ROS荧光探针检测腺泡细胞的氧化应激状态。结果槐耳治疗明显改善了小鼠AP的严重程度,HE染色表现为胰腺内腺泡坏死和炎细胞浸润减少等,同时伴有血清淀粉酶水平下降;而免疫组化染色和Western blotting发现,槐耳治疗有效抑制小鼠胰腺组织内焦亡相关分子NLRP3、GSDMD等的表达;进一步的电镜观察发现槐耳治疗降低炎症状态下小鼠胰腺腺泡细胞的焦亡水平;此外,体外实验发现,槐耳干预能显著降低胰腺腺泡细胞266-6的ROS水平,且ROS介导的腺泡细胞焦亡能被槐耳有效抑制。结论槐耳能有效减轻AP的严重程度,这一效应是通过抑制ROS介导的胰腺腺泡细胞焦亡所实现的。

基于GEO和TCGA数据库胰腺癌生存相关基因的生物信息学分析

目的基于胰腺癌相关的高通量基因表达(GEO)和癌症基因组图谱(TCGA)数据,采用生存相关算法筛选并验证参与胰腺癌患者生存的关键预后基因。方法采用GEO数据库2个胰腺癌基因芯片(Microarray)和TCGA数据库胰腺癌转录组测序(RNA-seq)数据,利用Kaplan-Meier(KM)分析和Cox比例风险模型进行生存相关基因的过滤并取目的基因交集;对交集基因进行多因素回归分析与临床相关性分析筛选预后相关基因;对预后相关基因进行通路富集分析和CIBERSORT免疫富集分析寻找其调控胰腺癌的潜在分子机制。结果本研究借助TCGA和GEO数据库中包含的生存信息与临床特征的3个胰腺癌数据集,筛选得到了5个与胰腺癌生存相关的基因(CDO 1、DCBLD 2、FAM 83 A、ITGA 3和SLC 16 A 3),且多因素Cox回归分析和临床相关性分析表明,CDO 1高表达是胰腺癌预后的保护性因素,其抑癌作用与抑制肿瘤细胞恶性生物学行为和促进胰腺癌抗肿瘤活性免疫细胞浸润相关。结论本研究首次提出了CDO 1是与胰腺癌预后显著相关的保护性基因,并发现CDO 1的抑癌机制与抗肿瘤免疫微环境形成密切相关,为后续胰腺癌基础研究与临床治疗提供了新靶点。

白藜芦醇通过调节Hippo信号通路抑制胰腺星状细胞活化

目的探讨白藜芦醇对胰腺星状细胞活化的影响及Hippo信号通路的作用。方法组织块胰酶消化法提取原代胰腺星状细胞,给予白藜芦醇干预胰腺星状细胞,Westernblot、免疫荧光染色检测胰腺星状细胞活化的指标,Transwell侵袭实验及Westernblot检测间接共培养条件下胰腺癌细胞Panc-1侵袭能力及EMT指标E-cadherin,Vimentin的变化。结果白藜芦醇能够抑制胰腺星状细胞的活化,抑制α-SMA及YAP、CTGF及CYR61的表达;白藜芦醇干预后的胰腺星状细胞上清与胰腺癌细胞共培养后,Panc-1细胞侵袭能力降低(P<0.05),E-cadherin表达升高,Vimentin表达降低(P<0.05)。结论白藜芦醇能够抑制胰腺星状细胞活化,并降低共培养条件下胰腺癌细胞Panc-1的侵袭能力和EMT转化。

Hedgehog通路通过非配体依赖途径调控缺氧诱导的胰腺癌EMT及侵袭过程

目的探讨Hedgehog(Hh)通路调控缺氧诱导的胰腺癌上皮间质转分化(EMT)及侵袭机制。方法PANC-1和BxPC-3细胞培养于30 mL/L氧浓度的缺氧环境,观察缺氧对胰腺癌细胞的EMT及侵袭能力的影响,并检测Hh通路中SHH、PTCH、SMO、GLI1的表达情况;运用HIF-1α小干扰RNA干扰HIF-1α的表达,观察HIF-1α对缺氧诱导的胰腺癌EMT及侵袭的影响;运用cyclopamine和GLI1 siRNA分别抑制Hh通路的SMO或GLI1表达后,观察Hh通路在缺氧诱导胰腺癌EMT中的作用。结果缺氧能够积聚HIF-1α,活化胰腺癌Hh通路,但不影响SHH的表达,并可促进胰腺癌EMT及侵袭过程;HIF-1αsiRNA能够逆转缺氧诱导的上述过程,抑制Hh的活化,但不影响SHH及PTCH的表达。cyclopamine抑制缺氧状态下SMO及GLI1的表达,GLI siRNA可抑制GLI1的表达,但不影响SMO的表达,两者均可逆转缺氧诱导的EMT及侵袭过程。结论缺氧可能是通过非配体依赖途径,上调SMO促进胰腺癌EMT及侵袭。

趋化因子受体CXCR7协同CXCR4调控胰腺癌趋向性转移及上皮间质转分化

目的探究CXCL12/CXCR4/CXCR7生物轴在胰腺癌细胞侵袭转移及上皮间质转分化(EMT)中的调控作用及其作用机制,为胰腺癌转移的治疗研究提供新依据。方法利用CXCR4 shRNA及CXCR7 shRNA分别构建低表达CXCR4和CXCR7的胰腺癌细胞株。通过细胞侵袭和细胞迁移实验,观察CXCR4、CXCR7对CXCL12诱导的胰腺癌细胞侵袭转移的影响;Transwell侵袭实验及Western blot法检测间接共培养条件下胰腺癌细胞MiaPaCa-2的侵袭能力及EMT指标E-cadherin、Vimentin的变化。结果 CXCL12/CXCR4/CXCR7生物轴能够调控胰腺癌细胞的侵袭转移。CXCL12能显著增强胰腺癌细胞的侵袭转移能力,与单独沉默CXCR4或CXCR7相比,同时抑制CXCR4和CXCR7可以显著抑制CXCL12的促胰腺癌细胞侵袭转移作用。结论 CXCL12/CXCR4/CXCR7生物轴能够调控胰腺癌细胞侵袭转移及EMT发生。

转基因小鼠源性胰腺癌组织块皮下移植瘤模型的构建与评价

目的构建基于转基因小鼠的胰腺癌组织块皮下移植瘤模型(transgenic mice-derived allografts, MDAs),为胰腺癌的体内及体外研究提供良好的实验载体模型。方法利用LSL-Kras^(G12D/+);Trp53^(fl/+);Pdx1-Cre(KPC)胰腺癌转基因小鼠的组织块进行皮下移植,构建MDAs。利用HE染色、Masson染色和免疫组化染色评价MDAs的组织病理特征及免疫细胞浸润情况。结果 MDAs成功模拟出胰腺癌的大体和组织病理形态,且其保留了胰腺癌高增殖和高间质纤维化的病理特征。MDAs的纤维化和增殖程度较正常胰腺明显增高(P<0.05);MDAs还可成功模拟胰腺癌MPO+中性粒细胞、CD68+巨噬细胞和CD3+T淋巴细胞的浸润状态。结论 MDAs更利于在体内模拟胰腺癌的进展,是一种可行的胰腺癌研究模型。

单中心慢性胰腺炎的临床特征和治疗模式10年变迁

目的探讨慢性胰腺炎(CP)的临床特征和治疗模式变迁。方法采用回顾性描述性研究方法。收集2013年1月至2022年12月西安交通大学第一附属医院收治的805例CP患者的临床资料;男575例,女230例;年龄为52(10~87)岁。观察指标:(1)人口学特征。(2)收治科室分布、住院及治疗情况。正态分布的计量资料以x±s表示,偏态分布的计量资料以M(范围)表示。计数资料以绝对数和百分比表示。期望频数是否符合经验分布采用拟合优度χ^(2)检验。结果(1)人口学特征。805例患者中,依据主要诊断标准和次要诊断标准确诊CP分别为435例和370例,首次就诊年龄为52(10~87)岁,其中0~10岁、11~20岁、21~30岁、31~40岁、41~50岁、51~60岁、61~70岁、71~80岁、81~90岁的男性和女性患者分别为1和0例、16和14例、45和26例、82和30例、122和39例、157和51例、119和46例、31和21例、2和3例。2013年,2014年,2015年,2016年,2017年,2018年,2019年,2020年,2021年,2022年收治的0~14岁、15~34岁、35~64岁和≥65岁患者分别为0、6、28和9例,1、21、34和10例,1、8、38和7例,0、7、52和10例,0、11、35和9例,1、15、72和23例,0、9、55和11例,2、19、58和16例,0、20、79和18例,0、25、73和22例。805例患者中,来自陕西省、甘肃省和其他地区分别为702、48和55例;汉族和回族患者分别为802和3例;已婚、未婚、离婚和丧偶患者分别为732、64、7和2例;病例资料中有血型记录为682例,其中A型、B型、AB型和O型占比分别为26.10%(178/682)、34.46%(235/682)、9.97%(68/682)和29.47%(201/682),以2022年陕西省人口血型分布特征(A型28.43%、B型30.50%、AB型9.83%和O型30.50%)为期望频数,两者比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.50,P>0.05)。(2)收治科室分布、住院及治疗情况。805例患者中,肝胆外科,消化内科和其他科室(老年外科、感染科、普通外科等)收治入院分别为594、121和90例,收治患者例次分别为771、121和94例次,同1例患者可能多次收治入院。805例患者住院时间为11(1~67)d,2013年,2014年,2015年,2016年,2017年,2018年,2019年,2020年,2021年,2022年肝胆外科、消化内科和其他科室收治患者的住院时间分别为16(2~48)d、11(5~19)d和24(12~35)d,18(2~63)d、10(3~29)d和14(7~30)d,9(1~35)d、11(2~16)d和10(5~33)d,10(1~55)d、9(4~16)d和16(4~27)d,9(2~38)d、10(4~20)d和11(5~27)d,12(3~46)d、11(2~26)d和13(7~27)d,11(1~33)d、9(3~23)d和14(4~17)d,11(1~67)d、7(1~23)d和16(4~27)d,10(1~35)d、8(1~32)d和14(1~29)d,9(1~42)d、12(3~17)d和11(1~22)d。805例患者中,选择外科手术治疗、胰腺体外冲击波碎石(P⁃ESWL)治疗、内镜治疗和其他治疗分别为258、117、194和236例。258例选择外科手术治疗患者共计行260例次手术,236例患者首选外科手术治疗,22例因其他治疗失败后行外科手术治疗。手术方式包括胰十二指肠切除术79例次,胰体尾切除术(联合或不联合脾脏切除、Peustow术)35例次,胰头部分切除、胰管切开取石、胰肠吻合术77例次,单纯胰管切开取石+胰肠吻合术58例次,胰腺假性囊肿内引流术4例次,胰腺坏死组织清除引流术7例次。术后58例患者发生并发症,包括出血、感染、胃瘫、胰瘘和肠漏分别为9,19,2,21和7例,患者经对症治疗后均好转出院。117例行P⁃ESWL治疗患者中,治疗次数为(1.3±0.7)次/例,共行154例次P⁃ESWL治疗,其中,行1次碎石治疗患者89例,≥2次碎石治疗患者28例。194例行内镜治疗患者中,治疗次数为(1.2±0.6)次/例,共行238例次内镜治疗,包括支架置入术103例,鼻胰管/鼻胆管引流术43例,胰管球囊扩张术7例,胰管取石术71例,十二指肠乳头肌切开术58例,其中,行1次内镜治疗患者168例,≥2次内镜治疗患者26例。患者未发生术后并发症。结论CP患者中男性占比较高,且随着年龄增长至51~60岁占比逐渐升高,患者血型分布与陕西省人口血型分布无差异性。微创治疗(胰腺体外冲击波碎石和内镜治疗)在CP治疗中的占比呈上升趋势,患者住院时间呈下降趋势。

自身免疫性脑炎合并小细胞肺癌胰腺转移1例

患者男性,55岁,因“皮肤、巩膜黄染伴上腹痛5 d”,于2021年11月10日就诊于我科。患者自述有乏力,无发热、寒战、腹胀、呕吐等表现,小便偏黄1个月余,体重未见明显改变。既往史:1年前确诊为抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)型自身免疫性脑炎,给予甲泼尼龙冲击联合丙种球蛋免疫治疗,规律监测病情控制可,未再诉头痛、行为异常等表现;10个月前确右肺上叶小细胞肺癌(广泛期):纵隔淋巴结转移、骨转移,序贯行6个周期依托泊苷联合洛铂方案化疗、33次累及野和缩野推量放疗,经影像学评估病情稳定后定期复查。

胰腺癌动物学模型研究现状

现阶段，胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma, PDAC）研究主要应用的动物模型可以分为移植瘤模型、基因工程鼠模型以及近年来兴起的类器官模型等。动物模型具有动物体型小、繁殖迅速、寿命长（3年）等特点，可以更加真实地反映肿瘤在生物体内发生、发展、转移和耐药等情况，故对于PDAC发生的分子机制研究、抗肿瘤药物筛选等具有重要的意义。