基于二代测序探索头颈部高级别转化腺样囊性癌分子遗传学特征

目的:探索头颈部高级别转化腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma with high-grade transformation,ACC-HGT)的临床病理及分子遗传学特征。方法:收集自2020年1月~2022年12月上海第九人民医院口腔病理科诊断的5例高级别转化腺样囊性癌患者的临床病理资料,运用显微切割方法获得肿瘤的高级别转化成分以开展二代基因检测,接着利用免疫组织化学技术进一步验证基因突变对蛋白质生成水平的影响。结果:5例患者都是男性,平均年龄为48岁,追踪观察时间4~30个月,有3例仍然存活,2例已经去世,3例发现局部复发,2例出现血行转移至肺、脑。5例肿瘤中,NOTCH1突变在3例中检出,NOTCH1重排在1例中检出,p53突变在1例中检出,PIK3CA突变在2例中检出,PIK3R1突变在1例中检出,PPP2R2A突变在1例中检出,这些基因突变可引起其下游相关蛋白NICD、p53及PI3K信号通路相关蛋白pAKTSer473高表达。结论:ACC-HGT易复发和血行转移,其遗传改变主要发生在NOTCH、PI3K以及p53通路上。

保存2年头颈部恶性肿瘤石蜡标本中Ki-67蛋白表达对比分析

免疫组化染色是组织中检测特定蛋白表达最常用、最成熟的方法[1]。研究表明,组织固定、蜡块保存时间、抗原修复等是影响免疫组化染色结果的重要因素[2]。其中,蜡块保存时间对免疫组化染色结果影响的研究较少[3]。Ki-67属于大分子量核蛋白,表达于细胞周期的各个活动期,是反映细胞增殖活性的重要指标[4],其在头颈部常见恶性肿瘤的疗效及预后评估中具有重要意义[5-6]。本科室对比分析保存2年的常见头颈部恶性肿瘤石蜡标本中Ki-67蛋白的表达,结果发现Ki-67增殖指数明显降低,提示在临床诊断及科研工作中如果使用保存时间较久的蜡块,需注意时间因素对免疫组化结果的影响,现介绍如下。

启动子甲基化状况对唾液腺恶性多形性腺瘤体外细胞系细胞E-cadherin表达的影响

目的:通过体外改变人唾液腺恶性多形性腺瘤(malignant pleomorphic adenoma,MPA)细胞系细胞E-cadherin基因启动子甲基化情况,探讨启动子甲基化对E-cadherin表达的影响。方法:采用合适浓度的5-Aza-Cd R和TGF-β1处理MPA细胞系SM-AP4和SM-AP1细胞,分别使用蛋白免疫印迹法、亚硫酸盐测序法、实时荧光定量PCR检测用药前、后E-cadherin蛋白表达、E-cadherin基因启动子甲基化状况、m RNA表达;同时采用划痕实验、Transwell小室检测用药前、后细胞迁移能力的变化。应用SPSS13.0软件包对数据进行独立样本t检验。结果:经5-Aza-Cd R处理后,SM-AP4细胞E-cadherin启动子区甲基化率显著降低(P<0.01),E-cadherin蛋白和m RNA表达显著升高(P<0.05),相应的细胞迁移能力显著降低(P<0.05)。而经TGF-β1处理后的SM-AP1细胞表达Vimentin蛋白,E-cadherin启动子区甲基化率显著升高(P<0.01),E-cadherin蛋白和m RNA表达显著降低(P<0.05),相应的细胞迁移能力显著提高(P<0.05)。结论 :DNA甲基化是调节MPA体外细胞系细胞中E-cadherin表达的重要机制之一,E-cadherin表达升高对MPA细胞转移具有潜在的抑制作用。

切缘定位装置在冷冻制片中的应用研究

目的:探讨应用切缘定位装置和传统方式制作冷冻切片时的时间和效果,分析切缘定位装置在多切缘同时送检时的应用价值。方法:收集上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面头颈肿瘤科2023年6月1~3日间行手术且需要行术中切缘快速冷冻制片的病例15例,随机分成实验组(采用切缘定位装置)、对照组和常规组,采用3种不同方式制片,对制片时间、切缘直径差值(D差)和完整性进行评估。结果:实验组所用冷冻切缘的制片时间要明显短于常规组(P=0.001),长于对照组(P=0.166)。实验组D差值明显小于对照组(P<0.001),与常规组相比无明显差异(P=0.181)。实验组切缘制片的完整性优于对照组(P=0.001),与常规组切缘完整性之间无统计学差异(P=0.538)。结论:手术切缘定位装置在制片时间方面要优于传统制片方式,直径差值和完整性方面与传统方式相接近,可作为术中多个切缘冷冻制片的一种选择。

IgG4相关唾液腺炎临床病理特征分析

目的探讨IgG4相关唾液腺炎(IgG4-related sialadenitis,IgG4-RS)的临床病理特征。方法收集2019年1月至2022年12月于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科诊断为IgG4-RS的患者共40例,男性26例,女性14例,年龄(59.4±11.8)岁(29~77岁),其中23例患者年龄>60岁。收集患者的病变部位、影像学表现、组织病理学特征、血清学检查结果及治疗信息,采用免疫组化方法检测组织中IgG4和IgG蛋白表达。结果颌下区肿胀是IgG4-RS最常见的首发症状[95%(38/40)],所有患者血清IgG4水平均>1.35 g/L,血清IgG4水平在年龄>60岁的患者(Z=-2.45,P=0.014)和累及多组腺体的患者(Z=-2.04,P=0.042)中均显著升高。36例大唾液腺活检组织中,所有患者均可见致密淋巴细胞、浆细胞浸润,淋巴滤泡形成、席纹状纤维化和闭塞性静脉炎分别见于88.9%(32/36)、63.9%(23/36)和30.6%(11/36)的患者。21例唇腺活检组织中,66.7%(14/21)可见淋巴细胞、浆细胞浸润,19.0%(4/21)可见淋巴滤泡形成,33.3%(7/21)组织学表现无明显异常,所有唇腺活检组织中均未见纤维化及闭塞性静脉炎表现。95.0%(38/40)患者中IgG4阳性浆细胞>10个/高倍视野,82.5%(33/40)患者中IgG4/IgG阳性浆细胞比值>40%。所有患者经糖皮质激素治疗后血清IgG4水平均有所下降,仅21.4%(6/28)患者可恢复到正常水平(≤1.35 g/L),且后续血清IgG4水平仍有显著波动。结论IgG4-RS主要好发于中老年男性患者,血清IgG4水平与患者年龄及是否累及多组腺体密切相关。唇腺活检不能替代下颌下腺进行组织病理学评估。治疗后血清IgG4水平不能恢复至正常水平是常见现象。

p16/Ki-67蛋白双染检测法在人乳头瘤病毒阳性口咽部鳞状细胞癌诊断中的应用探究

目的探讨p16/Ki-67蛋白免疫组织化学双染技术在人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)阳性口咽部鳞状细胞癌(oropharyngeal squamous cell carcinoma,OPSCC)诊断中的应用价值,提高HPV检测阳性准确率的最优指数。方法选取上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科自2014年5月至2020年5月诊断为OPSCC的患者153例,其中男性130例,女性23例,年龄(58.6±10.0)岁。选择HPV RNA原位杂交法为金标准判断其HPV状态。对所有患者行p16免疫组织化学法、p16/Ki-67蛋白双染法检测及预后分析,并以p16/Ki-67双阳性指数20%、40%、60%为阈值,分别与HPV RNA原位杂交法比较灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及预测患者预后的能力。结果153例OPSCC患者中HPV阴性114例,HPV阳性39例,OPSCC患者的HPV感染率为25.5%(39/153)。单一的p16阳性患者仅58.1%(36/62)为HPV阳性,且无法区分患者5年总体生存率。p16/Ki-67双阳性指数为40%时,HPV诊断能力最高(灵敏度=86.8%,特异度=94.8%,阳性预测值=84.6%,阴性预测值=95.6%,曲线下面积=0.897),且p16/Ki-67双阳性指数<40%与≥40%的患者5年生存率差异有统计学意义(P=0.012)。结论与p16单染相比,p16/Ki-67蛋白双染法可提高HPV阳性诊断准确率,且以双阳性指数40%为阈值判断HPV状态时对HPV阳性OPSCC的诊断最准确。相对于单一的p16染色,p16/Ki-67蛋白免疫组织化学双染技术可以更好地检测HPV。

唾液腺腺泡细胞癌中NR4A3基因重排及NOR-1蛋白表达分析

目的:探讨NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达在唾液腺腺泡细胞癌中的表达及在鉴别诊断中的价值。方法:收集2020年5月—2024年1月于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔病理科诊断的唾液腺癌119例,包括腺泡细胞癌(acinic cell carcinoma,AciCC)63例,黏液表皮样癌(mucoepidermoid carcinoma,MEC)31例,分泌性癌(secretory carcinoma,SC)25例。分别使用荧光原位杂交和免疫组织化学染色检测NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达情况,采用SPSS 18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:AciCC主要发生于大唾液腺。与MEC和SC相比,AciCC好发于女性(P=0.006)。NR4A3基因重排在AciCC、MEC和SC中的阳性率分别为76.2%(48/63)、0%(0/10)和0%(0/7),NOR-1蛋白表达在AciCC、MEC和SC中的阳性率分别为92.1%(58/63)、9.7%(3/31)和0%(0/25),差异具有统计学意义(P<0.001)。单独使用NR4A3基因重排诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为76.2%和100%。单独使用NOR-1蛋白表达诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为92.1%和94.6%。联合使用NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达诊断AciCC时,灵敏度和特异度分别为96.8%和94.6%,曲线下面积为0.896,诊断价值最优。结论:AciCC好发于女性,主要发病部位为大唾液腺。NR4A3基因重排仅见于AciCC中,在诊断工作中具有100%的特异性,但敏感性较低。NOR-1蛋白表达检测具有很好的灵敏度和特异度,可作为鉴别AciCC、MEC和SC的初筛和替代方法。联合使用NR4A3基因重排和NOR-1蛋白表达检测具有最优的诊断价值。

β连环素和Ki-67表达在唾液腺腺样囊性癌和基底细胞腺癌鉴别诊断中的作用

目的探讨β连环素(β-catenin)和Ki-67表达在唾液腺腺样囊性癌(ACC)和基底细胞腺癌(BCAC)鉴别诊断中的作用。方法回顾性分析56例唾液腺ACC患者(A组)和32例BCAC患者(B组)的临床资料,比较两组组织病理学特征。通过免疫组化染色检测并比较两组β-catenin和Ki-67蛋白的表达。结果 A组神经侵犯比例和肿瘤位于小唾液腺比例高于B组(P<0.01),而两组肿瘤最大径和血管侵犯比例差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化染色结果显示,两组β-catenin染色部位差异明显,A组患者β-catenin均表达于肿瘤细胞膜和细胞质,而B组患者中29例(90.6%)可见β-catenin表达于肿瘤细胞核(P<0.01)。A组Ki-67指数高于B组[(15.5±1.6)%vs.(4.2±0.7)%](P<0.01)。结论β-catenin在细胞内表达定位和Ki-67指数可以作为辅助鉴别诊断唾液腺ACC和BCAC的指标。

基于高等教育质量监控视角的学生满意度测评

高等教育质量监控体系可分为内部检测体系和外部保障体系。学生作为高等教育的直接受体,将学生对高等教育质量的满意度评价作为一项因子,构建具体的学生满意度评价体系,并将其纳入质量监控体系之中,有利于提高高等教育的质量,符合高等教育建设之路的改革目的。