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传染性支气管炎病毒上海分离株S1基因克隆及遗传变异分析 被引量:2
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作者 钱华冬 吴祖立 +1 位作者 朱建国 华修国 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2006年第1期65-69,共5页
对4株最新鸡传染性支气管炎病毒上海分离株的S1基因进行RT-PCR法扩增、克隆和序列测定分析。结果表明所克隆的S1基因全长约为1.63 kb,与常用IBV疫苗株和其它血清型代表株的S1基因序列及推导的氨基酸序列相比较,核苷酸序列同源性为77.4%... 对4株最新鸡传染性支气管炎病毒上海分离株的S1基因进行RT-PCR法扩增、克隆和序列测定分析。结果表明所克隆的S1基因全长约为1.63 kb,与常用IBV疫苗株和其它血清型代表株的S1基因序列及推导的氨基酸序列相比较,核苷酸序列同源性为77.4%~82.9%,氨基酸同源性为74.7%~82.6%,为研究上海地区IBV分子流行病学积累了资料。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 RT-PCR S1基因 变异
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鸽源冠状病毒PSH中国分离株S1基因克隆及分子进化分析 被引量:1
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作者 钱华冬 吴祖立 +1 位作者 朱建国 华修国 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期514-517,共4页
对分离鉴定的鸽源冠状病毒PSH株纤突蛋白S1基因进行RT-PCR法扩增、克隆和序列测定分析.结果表明其S1基因由1 626个核苷酸组成,编码541个氨基酸,S蛋白的切割识别位点为精氨酸-精氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-精氨酸(RRFRR),与常见的鸡传染性... 对分离鉴定的鸽源冠状病毒PSH株纤突蛋白S1基因进行RT-PCR法扩增、克隆和序列测定分析.结果表明其S1基因由1 626个核苷酸组成,编码541个氨基酸,S蛋白的切割识别位点为精氨酸-精氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-精氨酸(RRFRR),与常见的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S蛋白切割识别位点相似(RRF/SRR).该病毒与火鸡蓝冠病病毒(TCV)Gh、G1株S1基因推导的氨基酸同源性仅为24.7%、25%,而与IBV H52、H120、M41、Beau、Conn、Gray、Hotel、SH1、SH2、SH5、SH6基因推导的氨基酸同源性在75.0%~99.6%,其中与SH2、SH5的氨基酸同源性更是达到了99.6%,进一步证明该冠状病毒可能来源于IBV. 展开更多
关键词 冠状病毒 RT-PCR S1基因 分子进化分析
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鸽源冠状病毒PSH株纤突蛋白基因的遗传变异分析 被引量:1
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作者 钱华冬 吴祖立 +1 位作者 华修国 朱建国 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期199-202,共4页
对鸽源冠状病毒PSH株纤突蛋白基因进行了RT—PCR扩增、克隆和测序。结果表明,PSH株S基因由3504个核苷酸组成,编码1条由1167个氨基酸残基组成的多肽。S基因编码产物裂解后形成的S1和S2亚单位分别由541和626个氨基酸残基组成。PSH株S蛋... 对鸽源冠状病毒PSH株纤突蛋白基因进行了RT—PCR扩增、克隆和测序。结果表明,PSH株S基因由3504个核苷酸组成,编码1条由1167个氨基酸残基组成的多肽。S基因编码产物裂解后形成的S1和S2亚单位分别由541和626个氨基酸残基组成。PSH株S蛋白切割识别位点为精氨酸-精氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-精氨酸(RRFRR),与多数鸡传染性支气管炎病毒(IBV)切割识别位点相似(RRF/SRR)。与GenBank中其他冠状病毒毒株S基因的推导氨基酸序列相比较,PSH株与IBV参考毒株的同源性为79.3%~99.6%,而与其他冠状病毒包括火鸡蓝冠病病毒和SARS病毒的同源性均小于37.8%。表明,鸽源冠状病毒PSH株属于第3抗原群冠状病毒,且与IBV亲缘关系较近。 展开更多
关键词 冠状病毒 纤突蛋白 遗传变异
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RNA干扰技术应用研究进展 被引量:1
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作者 钱华冬 朱建国 华修国 《畜牧与兽医》 北大核心 2005年第10期52-54,共3页
RNA干扰技术作为一个强有力的反向遗传学工具,不仅为抑制基因表达提供了高效、特异性的手段,而且为基因功能研究、抗病毒感染研究和基因治疗研究提供了重要的技术方法。本文就近年来RNA干扰技术在动物抗病毒感染研究、动物基因组学研究... RNA干扰技术作为一个强有力的反向遗传学工具,不仅为抑制基因表达提供了高效、特异性的手段,而且为基因功能研究、抗病毒感染研究和基因治疗研究提供了重要的技术方法。本文就近年来RNA干扰技术在动物抗病毒感染研究、动物基因组学研究及转基因动物等方面的应用最新进展作一简述。 展开更多
关键词 RNA干扰 基因沉默 小干扰RNA 抗病毒治疗 基因治疗
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鸽源冠状病毒核衣壳基因克隆及分子进化分析
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作者 钱华冬 朱建国 +1 位作者 吴祖立 华修国 《中国病毒学》 CSCD 2006年第3期301-303,共3页
The nucleoprotein (N) gene of the coronavirus of pigeon origin (PSH) was cloned and sequenced A pair of primers based on the nucleoprotein gene sequences of group 3 coronaviruses was designed and used to amplify the N... The nucleoprotein (N) gene of the coronavirus of pigeon origin (PSH) was cloned and sequenced A pair of primers based on the nucleoprotein gene sequences of group 3 coronaviruses was designed and used to amplify the N gene of PSH The PCR product was purified and cloned into the pMD18-T vector. The positive recombinant pTN was used for sequencing. The cloned 1275bp fragment covered all the open reading frame of N gene and potentially encoded 409 amino acids. The results of comparative sequence analysis indicated that the nucleotide sequence of N gene of this strain shared 67.4%~96.6% identity with group 3 coronaviruses, and the predicted amino acid sequence shared 67.4%~97.8% identity, while only limited identity (<41.5%) was observed with group 1 and group 2 coronaviruses. Based on these results, PCoV PSH strain was identified as a member of group 3 coronaviruses. 展开更多
关键词 冠状病毒 核衣壳基因 克隆 序列分析
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猪链球菌2型四川株与江苏株对SPF猪的致病性 被引量:11
6
作者 崔立 朱建国 +4 位作者 华修国 王姝优 钱华冬 陆承平 吴忠亮 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2006年第1期54-57,共4页
以SPF巴马小型猪为实验动物,分别用猪链球菌2型四川分离株以及江苏分离株进行攻击,通过临床症状观察、病理解剖检查、病原分离鉴定以及病原组织分布检测等,比较二者的致病性。结果表明:四川株攻击猪40 h后出现神经症状,关节肿大和全身... 以SPF巴马小型猪为实验动物,分别用猪链球菌2型四川分离株以及江苏分离株进行攻击,通过临床症状观察、病理解剖检查、病原分离鉴定以及病原组织分布检测等,比较二者的致病性。结果表明:四川株攻击猪40 h后出现神经症状,关节肿大和全身出血等不很明显;病程为6 ̄7 d,而江苏株攻毒后18 h即出现神经症状,20 h即有死亡者,关节肿大和全身出血明显。死后病理解剖观察可见,四川株猪主要表现为肺淤血、肿大以及脑水肿,而未见败血症的变化,全身性出血不明显;而江苏株猪除了肺淤血、肿大以及脑水肿外,出现明显的败血症变化。均分离到与攻击相同的细菌,细菌溶血特性不明显,革兰氏阳性染色典型。细菌在组织中分布不同菌株也有一定的差异。 展开更多
关键词 猪链球菌2型四川分离株 猪链球菌2型江苏分离株 致病性 SPF巴马小型猪 动物模型
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鸽冠状病毒的分离与鉴定 被引量:4
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作者 吴祖立 钱华冬 姚从斌 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2005年第3期275-279,共5页
从有呼吸道症状、有胰脏充出血、肺脏肉样病变的肉鸽中,通过鸡胚接种、电镜观察和反转录套式PCR分析,证实分离的病毒为冠状病毒;经过动物试验,鸡传染性支气管炎标准毒株I(BVM41)不引起试验鸽感染,而本次分离株对试验鸽具有一定的致病性... 从有呼吸道症状、有胰脏充出血、肺脏肉样病变的肉鸽中,通过鸡胚接种、电镜观察和反转录套式PCR分析,证实分离的病毒为冠状病毒;经过动物试验,鸡传染性支气管炎标准毒株I(BVM41)不引起试验鸽感染,而本次分离株对试验鸽具有一定的致病性,表明该分离株与IBV有较大差异,暂命名为鸽冠状病毒P(SH)。 展开更多
关键词 鸽冠状病毒 分离 鉴定 反转录套式PCR
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