抗菌药普托马尼中3个工艺杂质的(Q)SAR遗传毒性评价与气相色谱-串联质谱法测定

目的 对新型抗结核分枝杆菌药普托马尼各合成路线涉及的3个共性工艺杂质:(S)-叔丁基二甲基硅烷缩水甘油醚(杂质Ⅰ)、(S)-丁酸缩水甘油酯(杂质Ⅱ)、4-三氟甲氧基溴苄(杂质Ⅲ)进行遗传毒性评价并建立相应的质量控制方法。方法 分别采用基于专家规则和统计学原理的2种互补的(定量)构效关系[(Q)SAR]模型(Derek和Sarah)对普托马尼中3个工艺杂质的遗传毒性进行评价和分类;根据评价结果建立气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法,采用分时段多反应监测(MRM)模式同时对这3个工艺杂质进行测定,并阐述这3个工艺杂质在EI源下的质谱裂解规律。结果 杂质Ⅰ和杂质Ⅲ Derek评估结果均为阳性,Sarah评估结果分别为模棱两可和阴性,依据ICH M7指南分类为3类致突变杂质;杂质Ⅱ Derek评估结果为阳性,Sarah结果显示有明确的Ames阳性实验结果,为2类已知致突变杂质。3个工艺杂质均需按照毒理学关注阈值(TTC)进行控制,建立的GC-MS/MS法经验证3个杂质可有效分离,线性关系良好,方法定量限均低于拟定限度的15%,平均回收率(n=9)分别为105.5%、104.4%和108.5%,重复性RSD(n=6)分别为2.2%、5.8%和2.2%。3批样品均检出杂质Ⅲ。结论 建立的GC-MS/MS法操作简单,专属性强,灵敏度高,可用于普托马尼中3个潜在致突变杂质的测定。由于杂质Ⅱ也是恶唑烷类抗菌药如利奈唑胺、咔哒唑胺、泰地唑胺等的共性工艺杂质,因此本研究也为其他恶唑烷类抗菌药中杂质Ⅱ的质量控制提供了参考。

UHPLC-MS/MS法测定面膜化妆品中甘草、人参和黄芩类功效成分

建立了超高效液相色谱-三重四极杆质谱法(UHPLC-MS/MS)测定面膜化妆品中甘草功效成分(甘草苷、甘草酸)、人参功效成分(人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re)和黄芩功效成分(黄芩苷)的方法,并用该方法对市售20批面膜样品进行风险监测。样品采用0.1%甲酸甲醇超声提取法,以0.1%甲酸水溶液-乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱分离,以UHPLC-MS/MS负离子模式检测。同时对样品前处理条件及色谱-质谱条件进行优化,并对方法学进行验证。结果表明:甘草苷、黄芩苷在0.25~100 ng/mL及人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re和甘草酸在0.50~200 ng/mL质量浓度范围内呈良好线性关系,相关系数大于0.998;检出限为0.41~6.4μg/kg(S/N=3);基质中加标回收率为95.9%~109.1%,相对标准偏差小于4.9%(n=6)。该方法适用于面膜化妆品中甘草、人参和黄芩功效成分的测定。

桑叶干燥过程中黄酮类和生物碱类成分动态变化分析

目的：通过评价不同干燥方法、不同烘干温度对桑叶中黄酮类、生物碱类化合物含量的影响,揭示干燥过程中桑叶中黄酮类及生物碱类化合物的动态变化,为桑叶药材品质评价提供参考与技术支撑。方法：以不同干燥方法、程序升温烘干法、恒温烘干法对桑叶样品进行处理,采用HPLC-PDA联用技术分析桑叶中的黄酮类化合物;采用LC-TQ/MS技术分析评价桑叶中的生物碱类化合物。结果：不同烘干方法桑叶中黄酮类和生物碱类化合物的含量具有明显差异,黄酮类化合物由高到低的烘干方法依次为：冷冻干燥〉阴干〉烘干〉晒干〉微波干燥〉红外干燥;生物碱类化合物由高到低的烘干方法依次为：冷冻干燥〉阴干〉烘干〉晒干〉红外干燥〉微波干燥。随着烘干温度的升高,桑叶中黄酮类化合物的含量先升高后降低,以75~85℃烘干桑叶中黄酮类化合物含量为最高,55~65℃烘干为最低;DNJ含量以85~95℃烘干为最高,55~65℃烘干为最低;荞麦碱含量以95~105℃烘干为最高,45℃烘干为最低。不同含水量的桑叶中黄酮类和生物碱类化合物含量有差异,含水量30%~50%时,黄酮类化合物含量较低;含水量10%时黄酮类化合物含量为最高。两种生物碱类化合物含量随含水量不同表现出不同的变化趋势,DNJ和Fagomine的含量随样品含水量的减少逐渐升高,且55~65℃烘干样品明显高于95~105℃。结论：该研究结果为桑叶适宜的干燥方法和条件提供了参考和依据,为揭示干燥过程中桑叶中资源性化学成分的转化以及药材品质的形成奠定了一定基础。

乳香-没药配伍前后汤液理化参数变化与化学成分的关联分析

目的探讨乳香-没药水提液(汤液)理化性质与化学成分变化之间的关系。方法测定汤液的理化参数(电导率、盐度、浊度、黏度、pH值);采用UPLC-MS/MS分析汤液中的化学成分组成;采用逐步回归分析方法对汤液的理化参数与化学成分的相关性进行分析,并进行验证试验。结果汤液中的化学成分组成及其含有量变化影响着汤液的浊度、黏度等理化参数;其中五环三萜酸酯类化合物与汤液的浊度呈显著正相关,倍半萜类化合物与汤液的黏度呈显著负相关。结论为深入研究乳香-没药配伍协同增效的物质基础提供了一定的依据。

百合药材UPLC特征图谱及特征峰QTOF-MS分析研究

目的:建立百合药材超高效液相色谱(UPLC)特征图谱,并采用电喷雾离子源-四极杆-飞行时间质谱(ESI-QTOF-MS)对其特征峰进行定性研究。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸为流动相梯度洗脱,流速0.4 mL/min,检测波长320 nm,柱温35℃。质谱检测采用负离子模式;电压3.0 kV;离子源温度120℃;雾化温度350℃;雾化气600 L/h。结果:获得百合药材UPLC特征图谱,共有峰19个,鉴定出12个酚性甘油酯类成分,其中6个通过对照品对照确认,6个通过质谱信息推测。结论:建立的UPLC-UV特征图谱可用于百合药材质量评价,为全面控制其质量提供了科学依据。

加工方法对百合质量的影响研究

目的:研究加工方法对百合质量的影响,为百合加工方法的规范化提供参考依据。方法:新鲜百合样品分别采用煮制和蒸制2种烫片方法、不同干燥方法(包括热风烘干、微波干燥、远红外干燥和冷冻干燥)进行加工,样品中酚性甘油酯类、核苷、氨基酸及多糖等成分分别采用超高效液相-二极管阵列检测器(UPLC-DAD)、超高效液相-三重四级杆质谱联用仪(UPLC-TQ/MS)及紫外-可见分光光度法(UV)测定。结果:烫片过程,煮5～8min和蒸8～10min样品不仅外观色泽较佳,而且各成分含量较高;干燥方法,60～80℃烘干和冷冻干燥法较好。结论:烫片是百合干加工过程中必不可少的环节;确定最佳工艺条件为煮5～8min,60～80℃烘干或冷冻干燥。

应用代谢组学探讨芫花酯甲对人肝细胞L02的毒性作用

目的采用代谢组学分析芫花酯甲抑制人肝细胞L02增殖的差异代谢物,并揭示其毒性机制。方法芫花酯甲0,2.5,5和10μmo.lL-1加入L02细胞孵育48 h后,采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)分析细胞代谢物;运用偏最小方差判别分析模型区别对照组和芫花酯甲2.5,5和10μmo.l L-1作用L02后细胞代谢物的总体差异;计算各组细胞代谢物归一化后的峰面积与细胞毒性强度的相关系数,从而发现并鉴定芫花酯甲损伤L02细胞的差异标志物;采用DAVID数据库分析差异代谢标志物相关基因的信号通路。结果正常对照组及芫花酯甲2.5,5和10μmo.lL-1组间的L02细胞代谢物存在明显差异,共鉴定出5个细胞代谢物峰面积显著下调,与细胞毒性强度的相关系数为-0.53～-0.96;5个代谢物峰面积显著上调,与细胞毒性强度的相关系数为0.72～0.99。代谢物包括磷脂类和脂肪酸类等,主要涉及甘油磷脂代谢、鞘脂代谢、脂肪酸氧化、花生四烯酸代谢和有丝分裂原激活蛋白激酶细胞凋亡等相关信号通路。结论代谢组学方法能够鉴定芫花酯甲诱导人肝细胞L02损伤的差异标志物及其信号通路。

复方柔肝中姜黄素类成分大鼠药代动力学特征

目的 研究复方柔肝（黄芪、姜黄、丹参和熊胆粉）中姜黄素和双去甲氧基姜黄素在大鼠体内药代动力学特征.方法 将SD大鼠随机分为3组,分别灌胃姜黄素和双去甲氧基姜黄素混合物、姜黄提取物、复方柔肝提取物,并采集血浆样本.利用UPLC-TQ/MS测定大鼠血浆中姜黄素和双去甲氧基姜黄素,以多反应监测方式进行正离子检测,应用DAS 3.2计算并比较各组药动学参数.结果 姜黄素在姜黄素和双去甲氧基姜黄素混合物、姜黄提取物和复方柔肝提取物中T1/2、Tmax并无显著性差异,而复方柔肝提取物中Cmax、AUC0～T明显高于姜黄提取物、姜黄素和双去甲氧基姜黄素混合物,姜黄素在姜黄提取物和复方柔肝提取物中MRT0～T略小于姜黄素和双去甲氧基姜黄素混合物,双去甲氧基姜黄素Lmax其他药动学参数均无显著性差异.结论 复方柔肝配伍显著提高姜黄素Cmax,增加了其生物利用度,并加快双去甲氧基姜黄素体内吸收速度,但对其生物利用度影响不大.

连贯抗病毒颗粒的HPLC指纹图谱研究及含量测定

目的:采用指纹图谱结合多成分含量测定,提升院内制剂连贯抗病毒颗粒质量标准。方法:采用HPLC-UV法,色谱柱为YMC-Pack Pro C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为280 nm,柱温35℃,进样量为10μL;建立10批次连贯抗病毒颗粒指纹图谱;同时测定了连翘酯苷A、连翘苷和咖啡酸的含量。结果:指纹图谱中,共标定了13个共有峰,指认了其中4个色谱峰,并测定连翘酯苷A、连翘苷及咖啡酸的含量分别为13.22~18.05、2.432~3.540、0.2711~0.3428 mg·g^(-1)。结论:本文通过指纹图谱定性、含量定量方式,多维度提升院内制剂连贯抗病毒颗粒的质量控制水平。

池州市1557名初中生乙型肝炎知识态度行为分析

目的了解初中生乙型肝炎的相关知识、态度及行为情况,为制定相应的预防措施提供依据。方法整群分层抽取池州市贵池区6所中学的1557名学生为调查对象,采用自行编制的调查问卷以班级为单位进行现场匿名问卷调查。结果初中生乙型肝炎知识得分总体偏低,平均为(7.01±3.56)分(总分为16分),对乙型肝炎的三大传播途径认识不清楚。绝大多数学生表示希望获得乙型肝炎的相关知识,但仅43.5%的学生表示不介意和乙肝病人或携带者一起学习。大多数学生对乙肝疫苗接种认识不足,只有60.9%的学生接种过乙肝疫苗,23.1%的学生希望接种乙肝疫苗。多元Logistic回归分析表明,影响知识得分的主要因素为年级、家庭住址、父亲的文化程度和学习成绩。结论初中生对乙型肝炎相关知识的掌握情况不理想。学校应有针对性地进行健康教育,使初中生建立科学的生活方式。

UPLC法同时测定小儿咳喘灵颗粒中5种成分

目的建立UPLC法同时测定小儿咳喘灵颗粒(金银花、麻黄、板蓝根等)中5种成分的含有量。方法该药物50%甲醇提取液的分析采用Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;检测波长207、237 nm;柱温35℃。结果(R,S)-告依春、绿原酸、甘草苷、甘草酸、苦杏仁苷分别在2.1660~108.3000、1.9999~99.9951、2.0259~101.2928、1.8475~92.3756、2.1405~107.0260μg/mL范围内线性关系良好(r=1.0000),平均加样回收率分别为97.94%、98.29%、102.03%、100.69%、99.78%,RSD分别为0.97%、1.09%、1.64%、1.09%、1.83%。结论该方法简便准确,重复性好,可用于小儿咳喘灵颗粒的质量控制。

UPLC-MS/MS法检测中成药及保健品中非法添加降糖及降脂类化学药物

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时检测中成药及保健品中非法添加的降糖及降脂类化学成分。方法:样品经甲醇超声处理后,采用Waters Acquity BEH-C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 ml·min-1;采用三重四极杆串联质谱(QQQ)作为检测器,电喷雾离子源(ESI),正负离子模式、多反应监测(MRM)模式检测14种降糖降脂类药物,以保留时间、碎片离子比对和峰面积进行定性定量分析。结果:14种降糖、降脂类药物在0.1~500 ng·ml-1范围内呈良好的线性关系,相关系数均大于0.996,检出限为0.000 2~3.940 6ng·ml-1,3个浓度水平回收率均在80%~120%之间。结论:本实验方法准确、灵敏、高效、便捷,可用于降糖、降脂类中成药及保健品中非法添加药物的定性及定量检测。

HPLC-DAD法测定化妆品中非法添加的21种磺胺类抗生素

建立高效液相色谱法同时测定化妆品中非法添加21种磺胺类抗生素的检测方法。采用Waters Symmetry C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以甲醇和0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.9 m L·min-1,柱温为33℃,检测波长为268 nm。21种磺胺类成分的线性范围为1.0~40.0μg·m L-1（磺胺二甲基哒嗪、磺胺喹恶啉和磺胺硝苯的线性为0.5~20.0μg·m L-1）,相关系数均大于0.99。方法的检出限为0.09~0.36μg·m L-1,平均回收率在89.1%~112.8%之间,相对标准偏差小于9%。该方法简单,准确,分离效果好,能够满足化妆品中磺胺类物质的检测。

基于多成分测定的小儿咳喘灵口服液的质量评价

目的建立UPLC测定方法对市售小儿咳喘灵口服液的整体质量进行评估,以期完善小儿咳喘灵口服液质量标准。方法采用Waters Acquity UPLC色谱仪,选用Waters HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,检测波长237 nm[(R,S)-告依春、绿原酸、甘草苷和甘草酸]、207 nm(苦杏仁苷),柱温35℃。对来源于不同厂家的59批小儿咳喘灵口服液进行含量测定,并对质量特征进行统计学分析。结果5个主要成分在59批小儿咳喘灵口服液中均可检出,但含量差异较大。单因素方差分析结果显示,厂家3、4与其他厂家之间5种成分差异均具有统计学意义(P<0.05);差异主要集中在苦杏仁苷和甘草苷2个成分上。结论增加小儿咳喘灵口服液控制指标对于规范药品生产、提高药品品质具有重大意义。

黄蛭益肾胶囊质量标准的提升

目的:提升黄蛭益肾胶囊的质量标准。方法:采用薄层色谱(TLC)法对黄蛭益肾胶囊中的枸杞子、牛膝和车前子进行定性鉴别;采用HPLC-DAD法同时测定毛蕊异黄酮葡糖苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素的含量,采用HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷的含量。结果:枸杞子、牛膝和车前子的薄层斑点清晰,分离良好,阴性无干扰。毛蕊异黄酮葡萄糖苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷分别在1.03~20.52μg·ml^(-1),0.89~17.72μg·ml^(-1),1.51~30.24μg·ml^(-1),1.03~20.62μg·ml^(-1),67.62~563.52μg·ml^(-1)(r=0.9996~1.0000)浓度范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为93.4%,93.0%,100.7%,91.4%,99.5%,RSD分别1.53%,1.73%,1.46%,1.23%,1.85%(n=6)。结论:建立的TLC法专属性强、灵敏度高,HPLC法简便可行,结果准确、可靠,重复性、稳定性好,可用于黄蛭益肾胶囊的质量控制。

谈语文教师在教学中的角色转换

语文教学中,教师要转换不同的角色:扮演节目主持人,创设和谐课堂氛围;扮演“桥”,让学生与教材交流;扮演“导游”,开拓阅读视野;扮演“演员”,感染学生,渗透人文精神;扮演“开路先锋”,引领学生创新。

超高效液相色谱法同时测定化妆品中7种美白成分

建立了超高效液相色谱-二极管阵列检测器（UPLC-DAD）同时测定化妆品中奥扎格雷、烟酰胺、阿魏酸、苯酚、水杨酸、苯乙基间苯二酚和辛酰水杨酸7种美白成分的方法。样品用50%甲醇水溶液超声提取20 min,采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.8μm）,以5 mmol/L的癸烷磺酸钠溶液（含0.1%磷酸）-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 m L/min,检测波长为220和277 nm,柱温为30℃。结果表明,奥扎格雷、辛酰水杨酸和水杨酸的线性范围分别为0.25~10,0.5~20和2.0~80 mg/L,其他4种化合物的线性范围均为1.0~40 mg/L,相关系数均大于0.999。保留时间和峰面积的日内和日间精密度均较好,相对标准偏差（RSD）均小于2.0%。7种美白成分的方法检出限为0.39~4.33 mg/kg,平均回收率为91.9%~108.2%,RSD为0.1%~2.6%。该方法简单、快速、准确、可靠,适用于化妆品中多种美白成分的同时检测。

减肥类保健食品中蒽醌类成分及非法添加化学药物的测定

建立同时测定减肥类保健食品中非法添加化学药物氟西汀、比沙可啶以及蒽醌类成分番泻苷A、番泻苷B、大黄素、大黄素甲醚、大黄酸、大黄酚、芦荟苷和芦荟大黄素的高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)方法。采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.02 mol/L乙酸铵溶液(含0.4%乙酸)(B)为流动相,梯度洗脱(0~5 min,85%B;5~25 min,85%B^35%B;25~50 min,35%B;50~55 min,35%B^85%B),测定波长为268 nm,流速1.0 m L/min,柱温25℃。对HPLC-DAD检出氟西汀和比沙可啶的样品进行电喷雾飞行时间质谱(ESI-Q-TOF/MS)一级扫描及二级碎片离子比对进行阳性确证。结果表明:10种待测物线性关系良好(r≥0.995),平均回收率位于90.3%~104.7%之间,RSD均小于5.0%。实际样品测定发现25种减肥类保健食品中有2种检出氟西汀,1种检出比沙可啶,另有1种样品同时检出芦荟苷和芦荟大黄素。本文建立的方法具有较高的选择性和灵敏度,方法分离效果好,耐用性较强,能够用于减肥类保健食品中这10种成分的定性、定量测定。

减肥类保健食品中25种非法添加化学物质的UPLC-DAD快速筛查

目的建立快速检测减肥类保健食品中25种非法添加的化学物质的分析方法。方法样品甲醇提取液的分析采用Waters BEH C18柱(2. 1 mm×100 mm,1. 7μm);流动相为甲醇-乙酸铵(含0. 4%乙酸),梯度洗脱;体积流量0. 3 mL/min;柱温30℃;样品室温度10℃;检测波长200～400 nm。利用保留时间及光谱图做定性分析,对检出成分进行定量测定。结果 17批样品中1批检出比沙可啶,1批检出盐酸西布曲明、盐酸苄基西布曲明及酚酞,3批检出盐酸西布曲明,4批检出酚酞及盐酸西布曲明。25种标准品的线性范围为2. 5～50. 0μg/mL (盐酸芬氟拉明,盐酸利莫那班的线性范围为5. 0～100. 0μg/mL),相关系数均大于0. 99。结论该方法简单便捷,准确,分离效果好,能够达到快速检验减肥类保健食品中非法添加化学成分的目的。

超高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品中38种抗感染药

建立了同时测定2种不同基质类型化妆品中非法添加38种抗感染禁用药的超高效液相色谱-串联质谱方法。样品经溶剂提取后,采用Waters Acquity BEH C;(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,流动相A为0.1%乙酸铵缓冲液(pH=4.0),流动相B为0.1%甲酸甲醇,梯度洗脱;使用三重四极杆质谱多反应监测模式(MRM)检测,以保留时间和相对离子丰度定性,外标法定量。结果表明,氯霉素在质量浓度100~1 000μg/L范围内,其余37种抗感染药在质量浓度15~150μg/L范围内均呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.99;方法检出限和定量限分别为0.3~240.4μg/kg和1.1~801.2μg/kg。3个不同浓度加标水平下,38种抗感染化合物的加标回收率为79.0%~119.8%,相对标准偏差为0.3%~9.7%(n=6)。该方法准确、灵敏、快速,适用于水剂和膏霜化妆品中38种抗感染药的同时测定。