心肌酶谱与肌钙蛋白I测定对新生儿窒息诊断的评价

窒息是新生儿常见症状和主要死亡原因之一,其本质是缺氧,它可以造成多器官多系统损伤,其中以心脏受累最常见。为了对窒息新生儿心肌损害作出早期诊断,本文对2006年6月1日～2007年3月1日在我院儿科重症监护病房住院的新生儿窒息患儿的心肌酶谱（AST、LDH、CK、CK-MB）与肌钙蛋白I（cTnI）进行定量测定，以讨论心肌酶谱和肌钙蛋白I对新生儿窒息后心肌损伤的诊断价值。

血清胱抑素C检测在评价儿童肾功能中的应用

目的 探讨血清胱抑素C在儿童肾脏病中的变化及其意义。方法 以校正的内生肌酐清除率（Ccr）值将72例1—14岁肾脏病患儿分为4组：A组39例，Ccr≥80ml·min^-1（1．73m^2）^-1（肾功能正常）；B组22例，50≤Ccr〈80ml·min^-1（1．73m^2）^-1（肾功能不全期）；C组7例，30≤Ccr〈50ml·min^-1（1．73m^2）^-1（肾功能不全失代偿期）；D组4例，Ccr〈30ml·min^-1（1．73m^2）^-1（肾功能衰竭期）。采用免疫比浊法测定患儿的血清胱抑素C浓度，并与血清尿素氮、肌酐进行比较．评价血清胱抑素C反映肾功能损害的灵敏度、特异度和准确度，同时以40例正常儿童为对照组。结果 肾脏病患儿的血清胱抑素C水平比正常儿童明显升高（P〈0．05或P〈0．01）。且血清胱抑素C的灵敏度和准确度优于尿素氮和肌酐，血清胱抑素C与Ccr呈明显的负相关（r=-0．765，P〈0．01），其相关性优于尿素氮和肌酐（r分别为-0．675、-0．692，均P〈0．01）。结论 血清胱抑素C水平的检测有助于对肾小球滤过率的评估，是儿童肾脏病早期肾损害的敏感指标。

结缔组织生长因子的分泌表达及ELISA检测法的建立

目的 制备结缔组织生长因子 (CTGF)抗原 ,建立ELISA检测方法。方法 从血管内皮细胞中提取总RNA ,逆转录合成cDNA ,设计特异性引物 ,通过PCR方法扩增CTGFC区 2 4 2～ 349位氨基酸基因 ,插入噬菌体包膜蛋白基因Ⅲ的上游 ,制备CTGF融合蛋白。用纯化后的融合蛋白免疫家兔 ,获得抗体 ,抗体纯化后标记HRP ,建立ELISA。结果 成功克隆CTGFC区基因 ,插入表达载体经IPTG诱导后获得分子量为 2 5 0 0 0的融合蛋白 ,免疫学检测证实为CTGF。所得抗体用HRP标记。建立的ELISA法检测灵敏度为 2ng/ml,批内及批间平均变异系数为 5 .4 %和 7.5 % ,平均回收率为 10 4 .2 %。血红蛋白浓度在 0～ 5 0mmol/L ,总胆红素在 0～ 15 0 μmol/L ,三酰甘油在 0～ 2 .0mmol/L对测定结果无影响。 2例慢性乙型肝炎病人血标本 ,5例糖尿病肾病、3例肾功能衰竭、3例慢性肾炎尿标本为阳性。结论 CTGF可以作为判断纤维化发生、进展及预后的一个新指标。CTGFELISA检测方法的成功建立 。

人心肌肌钙蛋白I化学发光免疫分析方法的建立

目的 建立检测人心肌肌钙蛋白I(cTnI)化学发光免疫分析方法。方法 用重组cTnI免疫新西兰兔获得抗体 ,经DEAE 2 3层析和 (NH4) 2 SO4沉淀纯化后 ,用碳化二亚胺 (EDC)法标记辣根过氧化物酶 ,SephadexG 2 0 0纯化。优化鲁米诺 H2 O2 肉桂酸发光体系 ,建立了cTnI化学发光免疫分析法。用该法检测 138例正常人及病人血清标本 ,确定正常值参考范围 ,并与ELISA法比较。结果 所得抗体的滴度为 1∶80 0 0。优化后的发光体系为 :鲁米诺 (4 .5mmol/L) ,H2 O2 (7.5mmol/L) ,四苯硼钠 (0 .8mmol/L) ,肉桂酸 (0 .4mmol/L) ,比单独用肉桂酸或四苯硼钠作增强剂灵敏度分别增加了 1.19和 1.0 5倍。本法检测灵敏度为0 .2ng/ml,线性范围为 0 .4～ 5 0ng/ml,批内CV平均 9.0 % ,批间CV平均 11.8% ,回收率为 10 4 .2 %。Hb浓度在 0～ 5 0nmol/L ,T Bil在 0～ 15 μmol/L ,TG在 0～ 2 .0mmol/L对测定结果无影响。与ELISA比较 ,两法结果一致 (P >0 0 5 ) ,相关系数r=0 .985 2(P <0 .0 1)。用BioCheck标准品为校正物 ,确定临床诊断参考范围为 <2 .12ng/ml,诊断符合率为 96 .2 %。结论 建立的cTnI化学发光免疫分析法可常规用于临床检验。

用pIII及pVIII噬菌体展示系统展示抗原和抗原表位的免疫原性的研究

目的探索用pIII和pVIII噬菌体展示系统展示抗原和抗原表位的免疫源性以及用噬菌体展示颗粒为免疫原制备抗体的可能性。方法从人心肌组织中获得cTnI基因,突变后克隆入pMDT18载体及pFD5pIII型噬菌体展示载体。合成两条互补寡聚核苷酸单链,退火后变成编码cTnI95～108位氨基酸的双链,与PC89pVIII型噬菌体展示载体连接。含有cTnI及其抗原表位基因的重组质粒转化辅助噬菌体敏感的XL1Blue细胞,用VCSM13超感染获得展示有cTnI及其抗原表位的噬菌体颗粒,测定其表达量。并以此为免疫源免疫新西兰白兔获得抗体,用ELISA方法测定抗体滴度。结果cTnI及其抗原表位在噬菌体颗粒表面得到成功展示,展示量分别为5ng/ml和96ng/ml。免疫后得到的抗体滴度为1∶300和1∶1800。结论制备具有一定空间结构的大分子蛋白的抗体时,可用pIII噬菌体展示系统,制备小分子肽线性表位的抗体时,pVIII展示系统具有独特的优势。

麝香保心丸对急性冠脉综合征患者超敏C反应蛋白的影响

目的:研究麝香保心丸对急性冠脉综合征患者超敏C反应蛋白的影响。方法:选择80名急性冠脉综合征患者,40例采用常规治疗,40例采用麝香保心丸治疗,观察超敏C反应蛋白。结果:麝香保心丸组的疗效优于常规治疗组。结论:麝香保心丸对急性冠脉综合征有较好的疗效。

肿瘤病人血清N-乙酰氨基半乳糖苷酶检测的意义

参考Ｙａｍ ａｍ ｏｔｏ 的Ｎ－乙酰－α－Ｄ－氨基半乳糖苷酶（ＮＡＧａｌ）检测方法， 检测了肿瘤病人在手术前后血清ＮＡＧａｌ的水平，并与正常人对照。结果发现术前增高， 与正常人比较：Ｐ＜ ０．００５ 有显著性差异； 手术后： ０．０５＜ Ｐ＜ ０．１， 酶水平呈下降趋势。而诊断肾小管损伤的Ｎ－乙酰氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧｌｕ） 水平无显著差异（ Ｐ＞ ０．５）。因此ＮＡＧａｌ是肿瘤病人放疗、化疗、手术治疗效果以及预后判断的一个指标。

通过维生素D_(3)结合蛋白介导的溶血磷脂对人外周巨噬细胞的激活作用

目的：揭示溶血磷脂（ Ｌｙｓｏ Ｐｃ） 在人外周巨噬细胞激活中的作用。方法：用 Ｌｙｓｏ Ｐｃ 处理外周淋巴细胞（ 粘附细胞和非粘附细胞） 后加入维生素 Ｄ３ 结合蛋白（ Ｄ Ｂ Ｐ） ，在３７ ℃、含体积分数为０ ．０５ 的 Ｃ Ｏ２ 中孵育３ ｈ ，测上清液超氧阴离子（ Ｓ Ｏ Ｐ） 浓度。结果：用 Ｌｙｓｏ Ｐｃ 处理后 Ｓ Ｏ Ｐ 浓度明显增高（ Ｐ＜０ ．０１） ；未用 Ｌｙｓｏ Ｐｃ 处理或不加入 Ｄ Ｂ Ｐ， Ｓ Ｏ Ｐ 产生无明显升高（ Ｐ＞ ０ ．５） 。结论： Ｌｙｓｏ Ｐｃ 能通过 Ｄ Ｂ Ｐ 激活巨噬细胞，因此 Ｄ Ｂ Ｐ 是巨噬细胞激活因子前体。

厚植创新土壤,孵育“芝兰创客”——初级中学创新实验类课程的开发与实施

本文从普通初级中学的角度审视国内外教育发展的历史及现状,深入思考、构建特色课程,形成了LAPH课程群、STEM课程群以及IC课程群,通过实践探索孵育'芝兰创客'精神。