液相色谱-串联质谱法检测维生素A、25羟维生素D_(3)和维生素E方法的建立

目的:基于临床实验室建立一种高特异性液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)技术方法,以快速准确检测不同年龄人群的血清维生素A、25羟维生素D_(3)[25(OH)D_(3)]和维生素E水平。方法:采用液-液萃取前处理,建立LC-MS/MS法检测血清中维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E的方法,并通过基质效应、线性、精密度测定、加样回收率等对此方法进行评价。收集健康体检人群标本542例,分析不同年龄组即青少年(1~18岁组)、中年(19~59岁组)和(老年≥60岁组)血清维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E水平,并依据卫生行业标准(WS/T553-2017和WS/T677-2020)判断不同年龄段维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E营养状况。结果:采用LC-MS/MS技术同时检测血清维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E的总检测时间为6.5 min,未见明显干扰因素。标准曲线相关系数r^(2)>0.99。维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E批内不精密度均<6.0%,批间不精密度<7.5%。加标回收率均在100.5%~112.9%。不同年龄组中1~18岁组未见到维生素A缺乏;7~18岁组维生素A不足占8.96%;25(OH)D_(3)缺乏和不足分别占10.12%和38.10%;维生素E不足占5.06%;19~59岁组维生素A和E较少见到缺乏,25(OH)D_(3)缺乏和不足分别占20.90%和46.33%;≥60岁组维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E缺乏和不足总和分别占16.36%、87.3%和12.72%。结论:建立的LC-MS/MS技术方法能够快速准确地检测血清维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E水平。在1~18岁和≥60岁人群中存在一定程度的维生素A、25(OH)D_(3)和维生素E的缺乏,各年龄段均显示25(OH)D_(3)缺乏和不足。

基于液相色谱-质谱的视神经炎患者血清代谢组学初步分析

目的分析视神经炎患者血清特征性代谢物。方法病例对照研究。收集2021年1月至2022年1月北京同仁医院神经内科确诊的视神经炎患者血清样本,同时收集性别、年龄匹配的健康体检者血清样本作为对照组。其中,视神经炎组9例,女性5例,男性4例,年龄(35.8±12.9)岁,对照组9例,女性5例,男性4例,年龄(32.6±8.6)岁。采用液相色谱质谱技术分析视神经炎患者、健康人群血清中的代谢物。选择主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘法分析(OPLS-DA)的多元统计分析方法,采用OPLS-DA模型的变量投影重要性(VIP)值并结合t检验的P值筛选差异代谢物。结果鉴定出37种特征代谢物,VIP>1且P<0.05的差异代谢物共有4种,3种为磷脂类物质,分别为LysoPC(P-16∶0)、LysoPC(16∶0)、LysoPC(P-18∶0),1种为苏氨酸,4种代谢物含量均下调,4种代谢物受试者工作曲线下面积分别为0.951、0.889、0.963和0.944。结论基于代谢组学分析,视神经炎患者血清中的一些代谢物发生了变化,可为视神经炎血清标志物的筛选提供实验基础。

4种血细胞分析检测系统的一致性评价

目的为儿童血细胞分析参考区间在不同检测系统的应用提供一致性数据依据。方法依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP9-A3文件要求,选取45份临床全血标本。以SysmexXN20-A1作为基准检测系统,分别与贝克曼-BECKMAN(DSH800)、西门子-ADVIA 2120i、迈瑞-BC5310检测系统做比对分析。用4个系统分别检测全血细胞计数及白细胞分类,采用广义极端学生化偏差(ESD)法对检测结果离群值进行检验,通过散点图、偏差图、频数分布图选择最佳回归模型。以选定的最佳回归模型拟合回归方程并计算参考区间及医学决定水平处偏移。全血细胞计数以《临床血液学检验常规项目分析质量要求》允许偏移作为可接受范围,白细胞分类以澳大利亚皇家学院室间质评的允许误差作为可接受范围。结果将离群值删除后,散点图显示,基准系统与另3个比对系统所有参数呈线性关系,偏差图显示差值均为非恒定变化,依据频数分布图选取Deming回归或Passing-Bablok进行回归分析。基准系统与另3个比对系统全血细胞计数及白细胞分类绝对值的相关系数R2在0.95~0.99。在参考区间的上、下限处除MONO#项目在0.12×109/L水平处XN-20A1与ADVIA 2120检测系统偏移不可接受外,其他项目偏移均在可接受范围内。疾病诊断层面的医学决定值所有项目偏移均在可接受范围内,PLT项目下限治疗及预后相关的医学决定值部分结果不可接受。结论基准系统与比对系统的全血细胞计数及白细胞分类结果在儿童参考区间范围内具有良好的一致性,为不同检测系统采用统一参考区间的可行性提供科学依据。

醛固酮检测方法及临床应用进展

醛固酮是一种类固醇激素,通过作用于肾脏来维持机体的水钠平衡。原发性醛固酮增多症(简称原醛)是最常见的引起内分泌性高血压的疾病,其临床表现隐匿,具有较高的死亡率。肾素-醛固酮比值(ARR)、血/尿醛固酮的检测是最有效筛查和确诊原醛的方法。人体内醛固酮含量低且存有类似结构的干扰物质,因此对其准确定量具有一定的挑战性。醛固酮检测方法有放射免疫法、酶联免疫吸附法、化学发光法和质谱。每种方法具有各自的优缺点,且不同检测方法诊断原醛的ARR比值也不完全一致。因此本文对醛固酮检测方法及临床应用的研究进展进行综述。