羊栖菜急性毒性实验及体外抑菌活性的研究

目的:初步探究羊栖菜全组分及其水提物的食用安全性及体外抑菌活性。方法:分析羊栖菜全组分及其水提物中多糖、硫酸根、总砷及无机砷的含量,进行小鼠急性毒性实验及体外抑菌实验。结果:羊栖菜全组分组小鼠最大给药量为12g生药量/kg·BW,相当于50kg成人拟定日食用干羊栖菜量的120倍;羊栖菜水提组小鼠最大给药量为120g生药量/kg·BW,相当于50kg成人拟定日食用干羊栖菜量的1200倍。在急毒实验观察期内,各组小鼠均未见任何中毒症状及死亡现象。羊栖菜全组分对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)125mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)250mg/mL;羊栖菜水提物对金黄色葡萄球菌MIC、MBC均为125mg/mL。对大肠杆菌、变异链球菌均无明显抑菌作用。结论:羊栖菜及其水提物毒性较低,且对体外培养的金黄色葡萄球菌有抑制作用。

芦根多糖的分离纯化和体外抗肿瘤研究

从芦根中提取和纯化了芦根多糖,并研究其体外抗肿瘤活性。采用热水浸提法从芦根中提取芦根多糖,经Sevag法脱蛋白,冷冻干燥后,葡聚糖凝胶柱层析分离纯化,得到纯化的芦根多糖,苯酚-硫酸法测定多糖样品中总糖含量,凝胶层析测定多糖分子量,细胞毒性实验研究其体外抗肿瘤作用。结果测得芦根多糖样品中总糖含量为0.872%,分离纯化得到三种芦根多糖组分R-PolyⅠ、R-PolyⅡ、R-PolyⅢ,三者的分子量分别为79781、29073、10605u,细胞毒性实验表明三种芦根多糖组分对Hela细胞和B16细胞均具有良好的抑制作用。这为芦根多糖在食品工业及医药保健等领域的应用奠定了基础。

副溶血弧菌TDH单克隆抗体的研制与性质鉴定

目的:制备副溶血弧菌耐热直接溶血毒素TDH单克隆抗体,并分析其免疫学特性。方法:用纯化的TDH毒素蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,用间接ELISA方法进行阳性细胞筛选,有限稀释法进行亚克隆。并对该单克隆抗体进行了分子量大小、效价、亚类、特异性和亲和力分析。结果:筛选出一株能够稳定分泌TDH单克隆抗体的杂交瘤细胞株命名为T9H4,其免疫球蛋白亚型鉴定为IgG1,亲和力常数可达2.19×109L/mol,并表现出较强的特异性。抗体纯化后效价达1∶1 024 000,SDS-PAGE电泳结果显示单抗蛋白重链分子量约为50 kD和轻链23 kD。结论:成功获得一株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞,为开发免疫学快速检测方法提供重要实验基础。