HPLC法测定八珍丸中5个成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定八珍丸中梓醇、麦角甾苷、焦地黄苯乙醇苷B_(1)、角胡麻苷、党参炔苷5个成分的含量。方法:采用Sunfire-ODS C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为磷酸溶液-乙腈,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为205、330、268 nm;柱温为30℃;进样量为20μL。测定7批八珍丸中梓醇、麦角甾苷、焦地黄苯乙醇苷B_(1)、角胡麻苷、党参炔苷5个成分的含量。结果:上述5个成分分别在0.65~7.76μg/mL(r=0.9999)、0.32~3.84μg/mL(r=0.9998)、0.21~2.48μg/mL(r=0.9998)、0.17~2.08μg/mL(r=0.9999)、0.37~4.48μg/mL(r=0.9999)的范围内与峰面积的线性关系良好,平均加样回收率分别为101.41%、101.39%、99.72%、98.55%、98.66%,RSD分别为2.92%、2.54%、2.18%、2.89%、2.72%。结论:该研究建立的HPLC同时测定八珍丸中5个成分含量的方法简便、准确,重复性好,可为八珍丸的质量控制提供参考。

单细胞拉曼光谱研究游离脂肪酸对NIT-1胰岛β细胞生理的影响

运用激光镊子拉曼光谱技术探讨高浓度游离脂肪酸对NIT-1胰岛β细胞生理的影响。实验组细胞以含0.25mmol/L棕榈酸培养12,24,48h,平行对照组中不含任何脂肪酸。通过扫描形式收集各组细胞的拉曼光谱后,使用Hoechs33342/PI荧光染色保留活细胞的光谱,并在OriginPro 8.0系统中比较各组平均光谱的差异。结果显示对照组间的拉曼光谱无明显差异;高脂组光谱在780、1124、1092cm-1及1172cm-1发生拉曼位移,且780、1172、855cm-1及873cm-1峰值强度降低。这些变化的光谱峰在分子归属上指认为细胞内DNA和蛋白质。由此推断高浓度游离脂肪诱导NIT-1细胞损伤在光谱表现为细胞内DNA及蛋白质的结构、含量改变,且该变化与细胞的凋亡有着密切联系。在实验中激光光镊拉曼系统对观察细胞早期损伤有着积极作用。