“互联网+”背景下动物学野外实习的改革及实践

动物学野外实习是动物学理论知识和实践教育相互结合的重要方式,对培养学生野外科考能力及创新能力有重要意义。该文结合“互联网+”背景及新时代对动物学野外实习变革的需要,从完善实习基地建设及共建共享、实行集中与分散相结合的实习模式、增加电子资源积累、拓展实习内容、建设和利用数字资源、融入课程思政、收集反馈及持续改进等方面出发,以安徽农业大学为例,探讨动物学野外实习改革及改革的措施,以期提高学生动物学野外实习的效果。

柳蚕卵黄原蛋白(Vg)cDNA3′端的克隆及序列分析

柳蚕(Actias seleneHbner)是野生泌丝昆虫。从柳蚕雌蛹脂肪体中提取总RNA,根据已经解析出的其它泌丝昆虫的卵黄原蛋白cDNA序列设计特异性引物,对柳蚕卵黄原蛋白cDNA3′端进行RACE(rapid amplification ofcDNA ends)扩增,经克隆和测序得到了一条1 072 bp的cDNA片段,该序列与柞蚕(Antheraea pernyi)、天蚕(An-theraea yamamai)、野桑蚕(Bombyxmandarina)、家蚕(Bombyxmori)、樗蚕(Samia cynthia pryeri)、蓖麻蚕(Philosamiacynthia ricini)、樟蚕(Saturnia japonica)相应序列的同源性分别为82.5%、82.4%、67.0%、63.2%、80.3%、78.5%、81.0%。同源性分析表明,昆虫卵黄原蛋白的一级结构在进化上具有较高的保守性。

柳蚕小热休克蛋白20.8基因的克隆与表达分析

小热休克蛋白(SHSPs)是从细菌到哺乳动物中广泛存在的一类热应急蛋白质,可调控蛋白的折叠和保护有机体免受外界压力。克隆获得了一个柳蚕shsp的开放阅读框(ORF)序列。该基因cDNA序列全长561bp,编码了一个由186个氨基酸组成的蛋白。预测蛋白分子质量20.8ku,等电点为5.98,故命名为As-SHSP20.8。序列分析和进化树构建结果表明,As-shsp20.8与已知的昆虫shsps家族具有很高的同源性,且与家蚕的shsp20.8聚在同一进化分支上。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)结果表明,As-shsp20.8在柳蚕的各组织中均有分布,但在脂肪体中表达量最高;且As-shsp20.8可被大肠杆菌和白僵菌诱导高表达,推测其可能参与了柳蚕的免疫反应。同时,利用pET-28a(+)载体对As-shsp20.8进行了原核表达,并对重组表达蛋白进行了纯化和抗体制备。将为进一步探索As-SHSP20.8的免疫功能奠定前期基础。

柞蚕真菌蛋白酶抑制剂基因CP8的克隆与表达分析

蛋白酶抑制剂在昆虫免疫中发挥着重要的作用。首次克隆获得了一个柞蚕真菌蛋白酶抑制剂基因ApCP8的开放阅读框(ORF)序列。该基因的ORF序列全长318 bp,编码了一个由106个氨基酸组成的蛋白(包括19个氨基酸的信号肽)。预测蛋白的等电点和分子量大小分别为9.05和11.3 kD。序列分析和进化树构建结果表明,ApCP8与已知的几种昆虫相应蛋白具有很高的同源性,且与印度柞蚕的CP8聚在同一进化分支上。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)结果表明,ApCP8主要在柞蚕脂肪体中高表达;且ApCP8在被白僵菌诱导的初期高表达,推测其可能参与了柞蚕抗真菌的免疫反应。同时,利用pET-32a(+)载体对ApCP8进行了原核表达,并对重组表达蛋白进行了纯化和抗体制备。本研究将为进一步探索ApCP8的抗真菌功能奠定前期基础。

新时期实验技术人员的职业规范与发展

实验技术人才是学校和科研机构人才队伍的重要组成部分,是推动科学技术研究和教学工作,加强科技实践与创新的重要力量。随着国家十四五规划和2035年远景目标纲要的确定,一系列重要指导意见和文件指明了新时期实验技术人员职业发展的方向和要求。结合当前实验技术队伍发展面临的一些具体问题,从职业重要性、道德素养需求以及职业规范发展几个方面,探讨了新时期新条件下实验技术职业发展规律,提出实验技术人员应该不断提高道德素养、专业水平、社会责任、从业操守的综合素质,应该对职业重要性有全面的认识,对职业道德素养有清醒的理解,对职业发展和规划有明确的方向,能够围绕国家重大战略和社会需求,潜心钻研、攻坚克难,提高在关键环节和重点领域解决问题的实际能力。进一步从工作实际出发,介绍了近年来在实验技术人员的职业规范与发展方面开展的一些工作和探索。

一种变频功率标准源的研制

目前,国内外变频功率标准源的输出电压电流范围普遍局限于1 000V/80A以内,且最低频率为10Hz左右,无法满足实际变频电量测量仪器计量检定的需要。大量程宽范围变频功率标准源的研制,可以完善变频电量量值溯源体系,从根本上改变了变频电量测量仪器无法溯源,检定校准无标准可依的局面。

非生物专业生命科学概论课程的教学探索与思考

随着生命科学的迅猛发展及其对社会和人类生活的密切影响,"生命科学概论"正逐渐成为众多高校重要的通识课程之一。安徽农业大学于2012年对非生物专业本科生开设了该门课程。在此,将结合该课程7年以来的教学探索和实践,从教学内容、教学方法与手段、考核方式及存在的问题等多方面加以论述和探讨,以期充分发挥该课程特色,并为高校非生物专业"生命科学概论"课程及相关通识教育课程的教学提供参考。

高等农业院校生物专业动物学教学的探讨

动物学是高等农业院校生物类重要的专业基础课之一,亦是与社会和人类生活密切相关的应用学科。结合安徽农业大学生物专业动物学的教学现状,从教学内容、教学模式、实践方法和考核方式等多个方面对该课程的教学与实践进行了分析和探讨,并提出相应的改进措施。以期充分发挥课程特色,为改善生物专业动物学的教学效果和提升学生综合素养提供一定的参考。

有线电视技术的横向应用

简要介绍了一种采用集中供电方式进行长距离传输电视监控信号的方法 ,通过对设备进行简单改造 ,有效地解决了远端设备供电难的问题 。

蚕业资源综合利用本科课程教学探讨

蚕业资源综合利用课程是蚕学专业的重要专业课之一,针对该课程的教学现状,从教学内容、教学理念、教学模式和考核评价方式等多个方面和角度对该课程的教学现状进行了分析和探索,以期改善该门课程的教学质量,充分发挥该课程的特色。

丽蝇蛹集金小蜂Pacifastin蛋白酶抑制剂基因nvpp-1和nvpp-2的功能研究

Pacifastin蛋白酶抑制剂在昆虫免疫与发育中起着重要作用。为了明确其在寄生蜂中的相关功能,本研究分别克隆获得编码丽蝇蛹集金小蜂Pacifastin蛋白酶抑制剂开放阅读框的cDNA序列nvpp-1和nvpp-2,序列长度分别为723和888 bp,分别编码240和295个氨基酸残基。预测结果表明,nvpp-1和nvpp-2推导氨基酸序列N端均含一个长度为17个氨基酸残基的信号肽序列。序列分析和进化树构建结果表明,NVPP-1和NVPP-2分别含有5个和4个典型的Pacifastin保守结构域,并与疑黑瘤姬蜂Pimpla hypochondriaca毒液蛋白CVP4聚为一类。实时荧光定量RT-PCR结果表明,nvpp-1和nvpp-2于该蜂雌蜂各组织中均发生转录,且在胸、腹部残体(解剖后腹部剩余部分)和毒器官中的转录水平较高;于毒器官中,其在羽化初期(0和1 d)转录水平较高,其转录水平显著降低。Western blot结果表明,NVPP-1和NVPP-2均只在毒液中被大量检出,在其他待测组织中均未被检出,而刚羽化时(0 d)其在毒液中含量较低。利用pET-28a(+)载体分别对nvpp-1和nvpp-2进行了原核表达,并对重组表达产物进行纯化。分别测定重组NVPP-1和NVPP-2对4种不同丝氨酸蛋白酶(胰蛋白酶、糜蛋白酶、蛋白酶K和弹性蛋白酶)的抑制效果,结果表明,重组NVPP-1和NVPP-2分别能显著抑制糜蛋白酶和胰蛋白酶活性。同时还分别测定了两种重组蛋白对寄主家蝇蛹血淋巴自身的酚氧化酶活性及原酚氧化酶激活反应的影响,结果表明,重组蛋白对家蝇蛹血淋巴原酚氧化酶激活反应亦有抑制效果,但其均不能显著影响血淋巴自身的酚氧化酶活性。综上所述,丽蝇蛹集金小蜂毒液中含有Pacifastin蛋白酶抑制剂NVPP-1和NVPP-2,分别为糜蛋白酶抑制剂和胰蛋白酶抑制剂家族成员,均能显著影响寄主家蝇蛹血淋巴原酚氧化酶激活反应,从而削弱寄主体液免疫水平。本研究所获结果加深了我们对昆虫尤其是寄生蜂Pacifastin蛋白酶抑制剂作用的认识。

柞蚕铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与表达分析

超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内的重要保护性酶类。采用RT-PCR方法克隆了柞蚕(Antheraea pernyi)铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因的ORF序列。生物信息学分析表明,该序列共编码154个氨基酸,具有Cu/Zn-SOD的保守性结构特征,与家蚕(Bombyxmori)、美国白蛾(Hyphantria cunea)、野桑蚕(Bombyx mandarina)以及果蝇(Drosophila melanogaster)Cu/Zn-SOD基因的同源性分别是81.5%、81.7%、81.5%、66.7%。柞蚕蛹经紫外线照射处理后用半定量PCR方法检测,发现照射不同时间脂肪体内Cu/Zn-SOD基因的转录水平存在差异,在照射5 min后开始增加,至10 min时为转录高峰,15 min时又呈下降趋势。

柳蚕卵黄原蛋白cDNA的克隆及序列分析

经RT-PCR和RACE合成了柳蚕卵黄原蛋白(Vg)cDNA,经序列分析其长度为5701个碱基,由一个ORF组成,编码了1 774个氨基酸。氨基酸序列中有2个保守的多聚丝氨酸区域。并推测氨基酸序列中有8个天冬酰胺连接的糖基化位点(N-linked glycosylation sites)。与樟蚕、天蚕、柞蚕、野桑蚕、家蚕、樗蚕、蓖麻蚕的VgcDNA序列比对后发现有很高的同源性,分别为83.1%、81.1%、81.0%、64.7%、64.6%、79.7%、79.2%,同其它昆虫Vg cDNA序列也具有很高的同源性。根据7种蚕(家蚕、天蚕、柞蚕、蓖麻蚕、樟蚕、野桑蚕、樗蚕)VgcDNA序列建立了系统发生树。

柳蚕S3a基因的鉴定及原核表达分析

采用RT-PCR法克隆了柳蚕S3a基因序列,并通过构建重组质粒,对其进行了原核表达及蛋白纯化。柳蚕S3a基因ORF长度为795 bp,编码264个氨基酸,预测蛋白的等电点和分子量大小分别为9.74和30 kD。序列比对及进化关系表明,柳蚕S3a蛋白与其他物种S3a蛋白相似度介于71%和97%之间,其中与鳞翅目昆虫的同源性最高。SDS-PAGE和Western blotting结果显示柳蚕S3a在大肠杆菌中获得了高效表达,分离获得的重组蛋白的纯度较高。

^(60)Co-γ射线辐射对柞蚕生物学特性的影响

利用^(60)Co-γ射线对柞蚕卵进行辐射,探讨了^(60)Co-γ射线辐射对柞蚕生物学特征的影响。结果表明:120Gy以下辐射剂最对柞蚕卵孵化率及柞蚕死亡率影响不大,但随着^(60)Co-γ射线辐射剂量的增加,孵化率明显降低而死亡率显著升高;血液蛋白质图谱和相关基因序列在辐射前后亦存在差异。这些生物性状的改变说明^(60)Co-γ射线对柞蚕生长发育具有重要的影响。

柳蚕丝素重链基因(Fib-H)cDNA 5′端片段的克隆与表达分析

柳蚕(Actias selene Hübner)是鳞翅目大蚕蛾科的一种珍稀野生绢丝昆虫。利用RT-PCR方法克隆了柳蚕丝素重链基因(Fib-H)cDNA 5′端的一个片段,该片段序列长819 bp,编码273个氨基酸,含有4个保守多聚丙氨酸结构域。序列比对分析表明,该片段序列与樟蚕(Saturnia japonica)、天蚕(Antheraea yamamai)、柞蚕(Antheraea pernyi)、印度柞蚕(Antheraea mylit-ta)和家蚕(Bombyxmori)的Fib-H基因cDNA 5′端同源序列的相似性分别为72.5%、65.8%、65.1%、65.1%、47.1%。半定量PCR分析显示柳蚕Fib-H基因cDNA 5′端片段序列在5龄幼虫第1-12天的表达量呈现逐渐上升的趋势。

阳离子型改性絮凝剂的制备及在废水处理中的应用

采用硝酸铈铵为引发剂 ,淀粉接枝丙烯酰胺单体 ,并使其阳离子化 ,制得阳离子型改性絮凝剂CSGM。考察了各种因素对接枝百分率和阳离子絮凝剂CSGM絮凝性能的影响 ,确定了最佳工艺条件。探讨了CSGM对工业废水的处理效果。结果表明 ,CSGM用于工业废水处理 。