柱前衍生—超高效液相色谱法测定母乳中16种氨基酸的含量

以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)进行柱前衍生,以超高效液相色谱法测定了人初乳、过渡乳、成熟乳中的苏氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、酪氨酸、甘氨酸、谷氨酸、丝氨酸和牛磺酸等16种氨基酸的含量,并与GB 5009.124-2016中氨基酸分析法(GB法)的测定结果进行对比。取解冻后的母乳0.22 mL,加入水、氢氧化钠溶液、盐酸溶液、L-正缬氨酸内标溶液和含0.1%(体积分数)苯酚的盐酸溶液,氮吹5 s,涡旋混匀后,于110℃水解(24±0.5) h。从液面下1 cm处取0.2 mL水解样品,加入氢氧化钠溶液和盐酸溶液,涡旋后过0.2μm尼龙滤膜。取上述滤液10μL,用AQC衍生试剂衍生,于55℃加热10 min,按照优化的仪器工作条件测定。在ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱上进行梯度洗脱分离,在检测波长260 nm处检测,内标法定量。结果显示,16种氨基酸标准曲线的线性范围为0.5~25μmol·L^(-1),检出限(3s)为2.5~10.7 mg·L^(-1)。对实际样品进行3个浓度水平的加标回收试验,回收率为95.0%~108%,测定值的相对标准偏差(n=6)均不大于9.0%。方法用于不同泌乳阶段母乳的分析,除了过渡乳和成熟乳中的组氨酸外,所得其他母乳中的氨基酸的测定值均显著高于GB法的(P<0.05),推测与前处理方法、仪器、取样量等的差异有关,具体原因还待进一步研究。

生物元件的挖掘、改造与标准化

生物元件是合成生物学中的三大基本要素之一,是合成生物学的基石。现阶段,生物元件的挖掘、鉴定和改造仍然是合成生物学领域的重要研究方向之一。合成生物学与基因工程和代谢工程最显著的差别在于能够将大量的生物元件进行快速、随意的组装,而实现这一目标的前提是将生物元件标准化。目前,已经有大量基因组被解析,通过这些基因组数据库的注释与功能验证,并借助于各种生物信息学软件预测启动子、终止子、操纵子、转录因子和转录因子结合位点、核糖体结合位点以及蛋白质编码区等部件,为合成生物学提供丰富的生物元件信息资源。随着元基因组技术的兴起,大量未培养微生物中的基因和基因簇信息被解析,使得我们可以从占自然界中实际存在微生物总数99%的未知微生物中挖掘更多的生物元件。另外,生物元件可以从自然界分离出来,也可以对天然生物元件进行修饰、重组和改造后得到新的元件。酵母是异源蛋白表达的通用宿主和生物基产品生产的细胞工厂,但其本身可用的启动子非常有限,近年来各国学者在酵母启动子改造和文库构建方面做了很多工作,该文也将概述酵母启动子改造和在合成生物生物学研究领域中的应用方面的研究进展。

白蚁肠道元基因组来源高温β-葡萄糖苷酶Bgl17的酶学性质

【目的】对短角球白蚁(Globitermes brachycerastes)肠道元基因组文库中筛选得到的一个新型β-葡萄糖苷酶编码基因bgl17进行酶学性质研究。【方法】通过克隆与异源表达得到纯的Bgl17酶蛋白,根据Bgl17对底物的水解活性测定其稳定性及动力学参数,利用薄层层析确定其水解产物。【结果】该酶属于糖基水解酶第一家族(GHF1),对其特异性底物4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(p NPGlc)的最适反应温度为70°C,最适p H为5.0。在最适反应条件下,该酶以p NPGlc为底物比活力为115.69 U/mg,以水杨苷为底物比活力为297.39 U/mg。以p NPGlc为底物时,其动力学参数Km值和Vmax分别为0.81 mmol/L和227.27μmol/(m L·min)。在稳定性方面,该酶在50°C处理1 h仍可保持50%的活性,在p H 5.0和6.0条件下,该酶的半衰期为1 h。【结论】该酶在较高的温度下具有较高的活性,且对水杨苷水解活性高,这点不同于已知的β-葡萄糖苷酶,推测其更有利于木质纤维素复杂结构的降解;该酶的最适温度远高于白蚁生存环境温度,可为研究白蚁降解纤维素的机理提供参考。

中国不同哺乳阶段母乳中氨基酸含量研究

目的分析中国不同哺乳阶段母乳中17种氨基酸含量的普遍水平。方法在兰州、广州、成都、天津、上海、长春六个地区招募单胎足月分娩的健康产妇共690例,采集其1~5、10~15、40~45、200~240、300~400 d的母乳,使用全自动氨基酸分析仪和高效液相色谱仪测定母乳中的氨基酸含量。结果母乳中总氨基酸及各单体氨基酸含量随着哺乳时间的延长呈下降趋势,200d后基本趋于稳定。母乳中含量最丰富的单体氨基酸是谷氨酸,其次是亮氨酸,含量最低的是蛋氨酸,其次是色氨酸,各单体氨基酸在总氨基酸中的比例变化趋势不同。不同地区母乳中17种氨基酸含量在初乳阶段差异最大,但各氨基酸占总氨基酸的比例在各哺乳阶段差异都较小。结论不同哺乳阶段、不同地区间母乳中氨基酸的含量及其占总氨基酸的比例存在一定程度的差异,这为中国婴幼儿配方食品国家标准中必需氨基酸推荐含量的调整与制定以及不同年龄段婴幼儿配方食品的研发提供理论参考。[营养学报,2020,42 (5):435-441]

兰州市新生儿出生体质量情况调查及影响因素分析

目的调查兰州市新生儿出生体质量情况及其影响因素,为制订控制新生儿出生体质量干预措施提供依据。方法选取2018年5月—2018年9月于兰州市某三甲医院进行常规产前检查和分娩的80例产妇及其单胎活产新生儿作为研究对象,记录产妇年龄、身高、体质量、文化程度和新生儿出生体质量、性别等资料,分析新生儿出生体质量的影响因素。结果新生儿平均出生体质量为3292.60 g。早产(<37周)新生儿的出生体质量低于足月产新生儿,差异有统计学意义(P<0.05);产妇产前体质量指数(BMI)<24 kg/m2组新生儿的出生体质量低于24~27.9 kg/m2组和≥28 kg/m2组新生儿,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析结果表明,新生儿的出生体质量随胎龄和产妇产前BMI的增加而增大,差异有统计学意义(P<0.05)。结论新生儿出生体质量的大小取决于胎龄和产妇产前BMI,对产妇产前BMI的干预是控制新生儿出生体质量的有效措施。

2018—2019年中国六城市不同泌乳阶段母乳中脂肪酸含量

目的调查中国不同泌乳期母乳中的脂肪酸含量和组成。方法 2018年1月至2019年12月,在成都、上海、天津、广州、长春和兰州招募处于不同泌乳期的健康产妇共690例,收集产妇产后0~5天、10~14天、40~45天、200~240天和300~400天母乳,每个城市每个泌乳阶段收到23例母乳,将其混合成一份混乳,一共获得30份混乳。采用气相色谱联合氢火焰离子化检测器测定混合母乳中的脂肪酸含量。结果母乳总脂肪酸(total fatty acids, TFA)、饱和脂肪酸(saturated fatty acids, SFA)、单不饱和脂肪酸(monounsaturated fatty acids, MUFA)和多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids, PUFA)的含量随着泌乳期的进展而增加,并在40~45天增至高峰后达到相对稳定水平,但SFA、MUFA和PUFA在TFA中的组成比在0~400天内保持相对稳定。六城市0~400天母乳中花生四烯酸/二十二碳六烯酸在1.14~1.55,在整个泌乳阶段无明显变化趋势。亚油酸/α-亚麻酸在3.84~18.94,具有明显的地域差异性。结论中国六城市母乳中脂肪酸的含量和组成存在差异,并随着哺乳时间的推移呈现动态变化的过程。

中国六地不同泌乳期母乳矿物质含量研究

目的调查中国不同泌乳期母乳矿物质含量水平,为婴儿配方(简称婴配)食品研发提供科学依据。方法在成都市、上海市、天津市、广州市、长春市、兰州市等六地区招募处于不同泌乳期的健康产妇690例,收集产妇产后0~5 d、10~14 d、40~45 d、200~240 d和300~400 d母乳,每个城市每个泌乳期收集23例母乳,将其混成1份混乳,共获30份混乳。采用电感耦合等离子体质谱法测定母乳12种矿物质(钾、钙、钠、镁、磷、铁、铜、锌、硒、锰、钼和铬)含量。结果母乳锌含量下降趋势最明显,整个泌乳期下降近90%(均有P<0.05);钾、钠、锌、铁、铜和硒的浓度受泌乳时间影响大,随泌乳时间延长呈下降趋势(均有P<0.05),200 d后趋于稳定;钙磷浓度的下降趋势较平缓;而镁含量在整个泌乳期变化不大。除钙、磷、铜、镁外,其余矿物质含量在地区间差异无统计学意义(均有P>0.05)。结论不同泌乳期、不同地区间母乳矿物质含量存在差异。婴配食品应考虑中国母乳矿物质含量的代表性水平,并针对不同泌乳期婴幼儿的营养需求进行研发,同时提高矿物质吸收利用率,使其更接近母乳,在满足婴幼儿生长发育需求的基础上,不增加其肾脏负担。

孕产妇血生化水平及膳食营养状况评价

目的评估孕妇血生化水平及其产后膳食营养状况,为促进孕产妇健康提供参考。方法选取2018年5—9月兰州市某医院83例孕妇为研究对象,观察红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白含量(MCH)、白细胞(WBC)、中性粒细胞百分比(NEUT%)等血生化指标,产后3~5 d对其进行24 h膳食回顾调查。结果产前体质量指数(BMI)与MCV (r=0.255)、MCH (r=0.239)呈正相关。产妇谷薯类日均摄入量为推荐值的2倍,蔬菜水果类摄入量远低于推荐值,畜禽肉和蛋类摄入量约为推荐值70%,维生素A、C及钙摄入量均低于推荐量的30%。产妇文化程度不同,奶类日均摄入量差异有统计学意义(P<0.05),产前BMI与奶类(r=-0.312)、维生素B2 (r=-0.283)日均摄入量呈负相关。结论孕妇血生化指标发生较大变化,产后膳食营养不均衡。建议应动态监测孕妇血生化指标,及时预防疾病;产后应调整饮食结构,注重营养均衡,促进产妇健康。

中医药临床实践指南和专家共识引用 系统评价/Meta分析现况调查

目的对中医药临床实践指南和专家共识引用系统评价/Meta分析证据的情况进行调查。方法计算机检索PubMed、CNKI、CBM和WanFang Data数据库,搜集中医药指南和共识,检索时限为2009年1月1日至2018年12月31日。由两位研究者独立筛选文献和提取信息后,分析引文特征并汇总。结果共纳入142部中医药指南和共识,其中39部(27.5%)未提供相关引文。提供引文的103部(72.5%)指南和共识中,48部(34.3%)引用了系统评价/Meta分析,但43部引用了过时的系统评价;有4部指南和共识引用了Cochrane系统评价。在引文方面,指南的平均引文量为35.1条,共识的平均引文量为42.2条。指南引用系统评价/Meta分析的平均引用量为3.8条,共识引用系统评价/Meta分析的平均引用量为5.5条。结论中医药指南和共识引文报告率和引用系统评价/Meta分析的比例仍需提高。中医药指南制订者应加强系统评价特别是Cochrane系统评价在推荐意见中的作用和意义。

2018—2019年甘肃省贫困农村0~23月龄婴幼儿喂养现状

目的调查甘肃省贫困农村地区0~23月龄婴幼儿的喂养状况和养育人的喂养素养。方法2018年11月至2019年1月,采用多阶段整群随机抽样的方法选取甘肃省4个县40个村1200户0~23月龄的婴幼儿家庭作为调查对象,运用中国营养学会标准化问卷,以一对一问卷调查的方式调查婴幼儿家庭基本情况、母乳喂养和辅食添加情况、养育人喂养知识、态度、行为(KAP)等信息,并运用卡方检验、二元Logistic回归等方法对收集的数据进行统计描述和推断。结果共收集1193名婴幼儿及1165名婴幼儿养育人的有效信息。婴幼儿6月龄内纯母乳喂养率为39.02%;1岁持续母乳喂养率为37.40%,2岁持续母乳喂养率为20.88%,两者间差异有统计学意义(χ^2=13.498,P<0.01)。满6月龄婴幼儿的辅食添加率为94.37%,谷薯类辅食添加比例最高(98.01%),豆类和坚果类比例最低(23.51%),辅食种类在不同年龄段的分布差异有统计学意义(χ^2=52.336,P<0.01)。婴幼儿最低膳食多样性合格率为64.13%,最低进食频率合格率为70.64%,最低可接收膳食摄入合格率为42.16%,各指标合格率在不同月龄间差异有统计学意义(χ^2=85.421,P<0.01;χ^2=19.662,P<0.01;χ^2=17.261,P<0.01)。婴幼儿养育人KAP得分及格率为37.34%,得分在婴幼儿月龄、养育人学历、养育人性别间差异有统计学意义(χ^2=9.411,P<0.05;χ^2=25.901,P<0.01;χ^2=3.874,P<0.05);以低月龄婴幼儿、低学历和男性养育人作为对照,婴幼儿月龄满12月、高中以上学历和女性养育人是KAP得分的保护性因素(P<0.05)。结论2018—2019年甘肃省贫困农村地区婴幼儿母乳喂养和辅食添加不科学问题严重,养育人喂养知识和技能匮乏,且与婴幼儿月龄,养育人学历、养育人性别相关。

兰州市城关区2008-2017年围生儿出生缺陷监测分析

目的了解兰州市城关区2008-2017年围生儿出生缺陷的检出情况及主要特征,为兰州市城关区妇幼保健工作的决策提供参考。方法收集兰州市城关区2008年1月-2017年12月出生的围生儿资料,分析出生缺陷现况。结果兰州市城关区2008-2017年出生缺陷检出率平均为165.53/万,先天性心脏病的顺位在2008-2017年间一直排第1位,其次为唇裂合并腭裂、多发缺陷、多指(趾)、神经管畸形,神经管畸形的检出率有所下降,唇裂合并腭裂的检出率2014年后有所升高。结论兰州市城关区2008-2017年出生缺陷的检出率总体呈上升趋势,其中先天性心脏病在出生缺陷顺位中排第1位。应重点加强对先天性心脏病的预防,加强兰州市城关区的出生缺陷防控工作。

兰州市城区102例乳母膳食营养状况及其与乳汁成分关系

目的了解兰州市城区乳母膳食营养状况及其与乳汁成分的关系。方法招募102位乳母,通过问卷调查其基本情况和膳食状况,计算膳食营养素摄入量,采集血液样本检测血红蛋白和微量元素水平,采集母乳分析体质指数及宏量营养素摄入和乳汁成分的关系。结果乳母能量摄入量中位数为1 507.5(1 245.5,1 954.5)kcal,能量和宏量营养素及多种微量营养素摄入量均不足,蛋白质、脂肪和碳水化合物供能比分别为13.72%、25.67%、60.90%;乳汁中脂肪、总蛋白质、糖类、干物质、能量的含量分别为(4.33±1.23)g/100 mL、(1.23±0.24)g/100 mL、(7.07±0.32)g/100 mL、(12.82±1.13)g/100 mL、(73.70±10.93)kcal/100 mL。不同BMI分组乳母乳汁中脂肪、干物质以及能量含量不同(均P<0.05),超重/肥胖组乳母乳汁中能量、脂肪以及干物质含量高。乳汁成分和乳母膳食宏量营养素之间未发现相关性(均P>0.05)。乳母血红蛋白平均含量为(137.23±1.10)g/L,7例(7.53%)贫血,乳母缺乏的微量元素主要为镁(24.73%)和铁(7.53%)。结论需要加强对乳母的营养宣教,鼓励其合理膳食,定期检测血红蛋白浓度,及时发现健康问题并改善。

3~8岁学生食品安全行为现状及影响因素分析

目的了解兰州市和陇西县3~8岁学生食品安全行为形成情况并分析影响因素,为开展食品安全健康教育,引导学生形成良好的食品安全行为提供科学依据。方法采用自填问卷对3~8岁学生家长的食品安全知识、态度、行为(KAP)及学生食品安全行为进行调查,并通过多元线性回归分析学生食品安全行为的影响因素。结果 3~8岁学生食品安全行为总形成率为67.45%,各行为形成率在22.41%~90.18%之间。兰州市的学生行为得分[(7.57±0.94)分]高于陇西县[(6.98±1.15)分],女生[(7.39±1.04)分]高于男生[(7.27±1.09)分],少数民族[(7.67±0.85)分]高于汉族[(7.30±1.08)分]。多元线性回归分析发现,家长知识得分、家长行为得分、居住地和学生性别与学生行为得分呈正相关(P<0.05);学生的年龄和民族与学生行为得分呈负相关(P<0.05)。结论 3~8岁学生食品安全行为总形成率较低,家长应丰富食品安全知识,规范自身食品安全行为,与学校一起督促学生形成健康的食品安全行为。

2019年兰州市部分孕乳母营养素补充剂使用情况调查

目的了解兰州市区孕乳母的营养素补充剂使用情况及其影响因素,为本地区孕乳母营养素补充剂的合理使用提供参考依据。方法在兰州市妇幼保健院招募195名孕乳母为研究对象,调查其基本信息和营养素补充剂摄入状况,并分析其影响因素。结果孕妇:营养素补充剂的总使用率为83.52%(76/91),使用过一种营养素补充剂者所占的比例最大,叶酸的使用率最高。孕前使用率为27.47%(25/91),孕期75.82%(69/91)。参加孕妇学校孕妇的钙剂使用率高于未参加者(P<0.01);乳母:总使用率为93.27%(97/104),使用过2种及以上营养素补充剂者所占比例最大,钙剂的使用率最高。孕前使用率为43.27%(45/104),孕期81.73%(85/104),哺乳期29.81%(31/104)。叶酸的使用受孕前BMI和现阶段BMI的影响(P<0.01)。复合维生素的使用受乳母文化程度和是否在孕期参加孕妇学校的影响(P<0.05)。孕乳母使用营养素补充剂原因均以医生建议为主。结论兰州市区孕妇营养素补充剂的使用水平不高。