基于RhoA/ROCK通路探讨赤芍总苷对心肌梗死大鼠心肌凋亡的影响

目的基于RhoA/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)通路探讨赤芍总苷(TPG)对心肌梗死(MI)大鼠心肌凋亡的影响。方法冠状动脉左前降支结扎法建立MI大鼠模型,模型成功24只随机分为MI组、TPG组、TPG+RhoA激活剂溶血磷脂酸(LPA)组,每组8只。观察大鼠一般情况;全自动生化分析仪检测心肌损伤指标肌酸激酶同工酶(CK)-MB、心肌肌钙蛋白(cTn)I、cTnT情况;苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织形态学情况;TUNEL、流式细胞术检测心肌组织细胞凋亡情况;免疫组化检测大鼠心肌组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3蛋白表达水平;Western印迹检测大鼠心肌组织中RhoA、ROCK蛋白水平。结果MI组心肌组织中出现大量的心肌细胞坏死现象,细胞核固缩、溶解现象明显,炎症浸润、纤维化现象严重;TPG组优于MI组,TPG+LPA组症状介于MI组和TPG组之间。与MI组相比,TPG组血清中CK-MB、cTnI、cTnT水平,心肌组织TUNEL阳性细胞比例,细胞凋亡比例,caspase3蛋白阳性率,RhoA、ROCK蛋白水平明显降低(P<0.05);与TPG组相比,TPG+LPA组血清中CK-MB、cTnI、cTnT水平,心肌组织TUNEL阳性细胞比例,细胞凋亡比例,caspase3蛋白阳性率,RhoA、ROCK蛋白水平明显升高(P<0.05)。结论TPG通过抑制RhoA/ROCK通路实现对MI大鼠心肌凋亡的缓解。

服用阿司匹林的绝经冠心病患者性激素与P-选择素水平变化及其关系

目的探讨服用阿司匹林的绝经冠心病患者性激素水平与P-选择素水平变化及其关系。方法绝经女性冠心病患者103例,分为阿司匹林组67例(入院前1周口服阿司匹林,100 mg/d,早餐后顿服)、非阿司匹林组36例。采用放射免疫法测定两组性激素[黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、孕酮(PROG)、催乳素(PRL)、睾酮(TESTO)、雌二醇(E_2)]水平,采用酶联免疫吸附法测定P-选择素水平,并对其关系进行直线相关分析。结果与非阿司匹林组比较,阿司匹林组P-选择素低,E_2高(P均<0.05)。E_2与P-选择素呈负相关(r=-0.354,P<0.01)。LH、FSH、PROG、PRL、TESTO与P-选择素之间无相关性,无统计学意义(P均>0.05)。结论绝经女性患者服用阿司匹林后E2水平升高,P-选择素降低,二者存在负相关关系。

HER2胞外段的克隆与原核表达

应用RT-PCR技术从人乳腺癌细胞系SK-BR-3中克隆出人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factorreceptor 2,HER2)基因的胞外段,并插入到表达载体pET-30a中,得到重组表达载体pET30-HER2(Ex)。将该载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)细胞中,加入IPTG进行诱导表达,成功获得HER2胞外段蛋白。分别提取培养液上清、大肠杆菌周质腔、细胞质可溶性及不可溶性组分蛋白进行SDS-PAGE电泳分析,确定目的蛋白定位于大肠杆菌细胞质包涵体中。通过改变诱导温度、诱导物浓度、诱导起始菌体密度和诱导时间,寻找最佳表达条件,使目的蛋白的表达量达到最高。结果表明,在37℃下,OD600达到1.0时,经终浓度为0.1 mmol/L的IPTG诱导4 h,目的蛋白的表达量最高。将重组表达菌进行超声破碎,分离出包涵体组分,经Ni2+亲和层析纯化后获得了纯度>90%的HER2胞外段蛋白,从而为抗HER2抗体的制备及肿瘤疫苗的研究奠定了基础。

卵圆孔未闭封堵术后残余分流对先兆性偏头痛的影响

目的评价卵圆孔未闭(PFO)合并先兆性偏头痛患者行介入封堵术后残余分流对偏头痛的影响。方法分析2019年1月至2020年12月郑州大学附属郑州中心医院170例PFO合并先兆性偏头痛患者行介入封堵术的临床资料,在术前、术后6个月行右心声学造影联合经颅多普勒超声发泡实验(c-TCD)检查、头痛影响测试问卷(HIT-6)评分评估偏头痛程度,根据术后c-TCD将患者分组:无残余分流组141例、轻度残余分流组19例和重度残余分流组10例,比较3组PFO封堵术后残余分流对偏头痛程度的影响。结果3组间的性别、年龄、体质指数、脑卒中、高血压和糖尿病比例、术前HIT-6评分和手术时间比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。而静息状态下大量分流、经食道超声心动图显示大的卵圆孔、大的封堵器、房间隔膜部瘤在重度残余分流组占比更多。与术前比较,术后6个月各组的HIT-6评分均明显降低(均为P<0.05);但重度残余分流组的HIT-6评分仍明显高于无残余分流组和轻度残余分流组[(57.60±7.29)分比(45.30±7.30)分和(45.79±5.25)分,均为P<0.05]。与术前比较,术后6个月的HIT-6评分减轻值重度残余分流组低于无残余分流组和轻度残余分流组[(14.60±7.56)分比(24.13±9.16)分和(24.26±8.23)分,均为P<0.05],而无残余分流组与轻度残余分流组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论PFO封堵术缓解先兆性偏头痛安全、有效,术后无残余分流或轻度残余分流的患者偏头痛症状改善明显,但重度残余分流的患者偏头痛改善情况欠佳。

氯吡格雷联合阿司匹林对急性心肌梗死的疗效

目的:探究氯吡格雷联合阿司匹林对急性心肌梗死的临床疗效。方法:研究对象为2018年12月至2019年12月期间郑州大学附属郑州中心医院收治的88例急性心肌梗死患者,依据是否服用氯吡格雷将其分成两组,对照组43例急性心肌梗死患者接受溶栓治疗+口服阿司匹林,观察组45例接受溶栓治疗+口服阿司匹林+口服氯吡格雷。比较两组患者血管再通率、左室收缩末期内径(LVESD)、血清脂联素水平与凝血酶原时间。结果:观察组患者血管再通率为23例(51.11%)与对照组的20例(46.51%)比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。治疗后两组患者LVESD均低于治疗前,且治疗后观察组LVESD低于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05);治疗前两组患者血清脂联素水平与凝血酶原时间比较,差异无统计学意义(P> 0.05),治疗后两组患者血清脂联素水平均高于治疗前,凝血酶原时间均长于治疗前,且治疗后观察组患者血清脂联素水平高于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05)。治疗后两组患者凝血酶原时间比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论:联合氯吡格雷与阿司匹林,用其治疗急性心肌梗死患者,对心功能改善、血清脂联素水平调节均可产生积极作用,同时出血风险小。

卵圆孔未闭患者介入封堵术中导丝通过卵圆孔困难的影响因素分析

目的观察卵圆孔未闭(PFO)患者术前对比增强经颅多普勒超声声学造影(c-TCD)右向左分流(RLS)分级及经食管超声心动图(TEE)测量的PFO宽度,探讨PFO患者介入封堵术中导丝通过卵圆孔困难的影响因素。方法2021年1月—2022年12月郑州大学附属郑州中心医院行经皮介入封堵术的PFO患者286例,术前均行c-TCD、经胸超声心动图声学造影(c-TTE)评定RLS分级,行TEE检查测量PFO宽度、长度。286例PFO患者中,术中导丝顺利通过卵圆孔者260例为通过顺利组,应用Swartz鞘协助导丝通过者26例为通过困难组。比较2组术前c-TCD RLS、c-TTE RLS、PFO宽度、PFO长度、PFO分型及手术时间;采用多因素logistic回归分析PFO患者介入封堵术中导丝通过卵圆孔困难的影响因素。结果通过顺利组手术时间[(34.20±12.80)min]短于通过困难组[(61.07±30.33)min](t=8.597,P<0.001),PFO宽度[(1.53±0.61)mm]大于通过困难组[(1.14±0.20)mm](t=-3.047,P=0.018),c-TCD RLSⅣ级比率(71.92%)、c-TTE RLSⅢ级比率(81.15%)均高于通过困难组(11.54%、38.46%)(χ^(2)=111.374,P<0.001;χ^(2)=24.603,P<0.001),PFO长度、PFO分型与通过困难组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。c-TCD RLS 0级(OR=944.684,95%CI:75.962~11748.277,P<0.001)、c-TCD RLSⅡ级(OR=72.026,95%CI:10.102~513.544,P<0.001)、PFO宽度≤1.14 mm(OR=0.265,95%CI:0.078~0.900,P=0.033)是卵圆孔患者介入封堵术中导丝通过卵圆孔困难的危险因素。结论c-TCD RLS≤Ⅱ级、PFO宽度≤1.14 mm的PFO患者介入封堵术中导丝通过卵圆孔困难的风险增大,需Swartz鞘协助。

绝经后女性冠心病患者性激素水平与Toll样受体4及核因子-κB表达的相关性

目的探讨绝经后女性冠心病患者Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)及核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)表达与雌二醇(estradiol,E_2)、睾酮(testosterone,T)及E_2/T的关系。方法绝经后女性患者72例,其中24例急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者为ACS组,24例稳定型心绞痛(stable angina pectoris,SAP)患者为SAP组,已排除冠心病的24例患者为对照组。应用实时荧光定量PCR法检测患者外周静脉血单核细胞TLR4和NF-κBp65mRNA表达水平,化学发光法测定血浆E_2及T水平,进行3组间比较,并分析变量间的相关性。结果ACS组TLR4、NF-κBp65mRNA表达水平(0.54±0.15、3.97±0.05)明显高于SAP组(0.27±0.09、2.66±0.16)及对照组(0.20±0.10、1.95±0.11)(P<0.05),且SAP组高于对照组(P<0.05);ACS组E_2、E_2/T[(47.15±1.79)pmol/L、63.11±14.29]低于SAP组[(54.19±4.69)pmol/L、138.5±14.29]及对照组[(75.01±4.96)pmol/L、239.91±11.26](P<0.05),SAP组低于对照组(P<0.05);TLR4与NF-κBp65 mRNA表达水平呈正相关(r=0.901,P=0.000),E_2与TLR4及NF-κBp65mRNA表达水平呈明显负相关(r=-0.654、P=0.000,r=-0.698、P=0.000),E_2/T与TLR4及NF-κBP65mRNA表达水平呈负相关(r=-0.426、P=0.000,r=-0.343、P=0.000)。结论绝经后女性冠心病患者TLR4及NF-κBp65mRNA表达升高、E_2和E_2/T水平下降,疾病的发生、发展与E_2/T失衡致抗炎、抗动脉粥样硬化作用减弱所致TLR4/NF-κB炎症通路过度激活有关。