不同胸腔闭式引流术方案对创伤性(非开放型)气胸疗程比较

目的对比创伤性(非开放型)气胸患者在不同位置留置胸腔闭式引流术的差别,从而对今后创伤性(非开放型)气胸置管方案提供指导意义。方法对创伤性(非开放型)气胸患者分别经锁骨中线第2肋间、腋中线第6肋间行胸腔闭式引流术,对比两种术式并发血胸能否及时引流。结果 67例创伤性(非开放性)气胸中经锁骨中线第2肋间置管33例、经腋中线第6肋间置管34例,后者能及时有效引流(P<0.01)。结论对外伤性(非开放型)气胸置管应首选腋中线第6肋间。

食管癌患者术后肺部感染危险因素分析

目的探讨食管癌患者术后肺部感染的危险因素,建立列线图风险预测模型,为临床制定干预措施提供参考依据。方法回顾性分析2014年9月至2019年5月于新乡医学院第一附属医院胸外科行食管癌手术644例患者的临床资料,采用单因素和多因素logistic回归分析食管癌患者术后并发肺部感染的危险因素,并建立列线图风险预测模型,以一致性指数(C-index)、校准曲线评估模型精准度并进行预测性验证。结果644例食管癌患者术后并发肺部感染率为29.19%(188/644)。单因素分析结果显示,食管癌患者术后并发肺部感染与年龄、体质量指数(BMI)、肿瘤部位、肺部相关疾病史(哮喘、肺气肿、支气管炎)、糖尿病、吸烟史、手术方式及手术时间有关(P<0.05),与性别、高血压、饮酒史、第1秒用力呼气量占用力肺活量的比例、术前外周血白细胞计数、美国麻醉师协会评分、术中出血量及术后营养方式无关(P>0.05)。Logistic回归分析结果显示,年龄、BMI、肺部相关疾病史、糖尿病、吸烟史、手术时间、肿瘤部位以及手术方式是食管癌患者术后并发肺部感染的危险因素(P<0.05)。列线图风险预测模型经C-index、校准曲线验证预测值和观察值基本一致(C-index=0.782),具有较好的预测能力。结论年龄、BMI、肺部相关疾病史、糖尿病、吸烟史、手术时间、肿瘤部位以及手术方式是食管癌患者术后并发肺部感染的危险因素。

敲低ACC1对胶质瘤U251细胞迁移的作用及机制研究

目的:探讨敲低ACC1对人胶质瘤U251细胞迁移的作用及机制。方法:选用人胶质瘤U251细胞系。实验分为三部分,实验一:通过慢病毒转染建立稳定低表达ACC1的U251细胞株(shACC1)及其对照(NC),Transwell迁移及划痕实验检测细胞迁移,WB检测ACC1、Vimentin、Fibronectin、N-cadherin、E-cadherin、Slug蛋白表达;实验二:探索并验证敲低ACC1后下游关键分子PAI-1表达量升高。应用其抑制剂PAI-039处理细胞,Transwell迁移及划痕实验检测细胞迁移,WB检测ACC1、PAI-1、Vimentin、Fibronectin、N-cadherin、E-cadherin、Slug蛋白表达;实验三:探索敲低ACC1调节PAI-1的分子机制,检测细胞乙酰辅酶A水平及组蛋白H3乙酰化。使用乙酰基转移酶抑制剂C646处理细胞,Transwell迁移及划痕实验检测细胞迁移,WB检测ACC1、H3K9ac、PAI-1、Vimentin、Fibronectin、N-cadherin、E-cadherin、Slug蛋白表达,RT-qPCR检测PAI-1 mRNA水平;每项实验重复三次。结果:实验一:对胶质瘤U251细胞进行慢病毒转染,WB结果显示,与NC组相比,shACC1组ACC1表达水平显著降低,提示慢病毒转染成功(P<0.01),shACC1组迁移细胞数明显增多(P<0.01),迁移相关蛋白Vimentin、Fibronectin、N-cadherin、Slug表达上调,E-cadherin表达下调(P<0.01);实验二:与NC组相比,shACC1组PAI-1 mRNA水平上调;进一步使用PAI-1的抑制剂PAI-039,与对照组相比,shACC1+PAI-039组细胞迁移数减少,且呈浓度依赖性(P<0.01),迁移相关蛋白Vimentin、Fibronectin、N-cadherin、Slug表达上调,E-cadherin表达下调(P<0.01);实验三:与NC组相比,shACC1组乙酰辅酶A浓度显著增加(P<0.01),H3K9ac表达水平明显升高(P<0.01);进一步使用组蛋白乙酰基转移酶抑制剂C646处理细胞后,PAI-1 mRNA水平下降,与对照组相比,shACC1+C646组细胞迁移数减少,且呈浓度依赖性(P<0.01),H3K9ac表达水平降低,迁移相关蛋白Vimentin、Fibronectin、N-cadherin、Slug表达上调,E-cadherin表达下调(P<0.01);结论:敲低ACC1通过增加组蛋白乙酰化修饰水平上调PAI-1促进人胶质瘤U251细胞的迁移。

普萘洛尔对人食管鳞癌细胞生物学功能的影响

目的:探索普萘洛尔对食管鳞癌细胞皮下成瘤和食管鳞癌(ESCC)细胞增殖、迁移、周期、凋亡、自噬的影响及其可能的分子机制。方法:MTT(噻唑蓝)检测细胞增殖:常规培养食管鳞癌Eca109、KYSE-450、TE-1细胞,设置PBS组(不加Propranolol),加药组(40、60、80、100μmol/L),每组5个复孔,分别处理0、24、48、72 h后,每孔加入MTT 10μl(5 mg/ml),490 nm处测定吸光度值。Transwell检测迁移:常规培养食管鳞癌Eca109、KYSE-450、TE-1细胞,设置PBS组(不加Propranolol),加药组(40、60μmol/L),每组2个复孔,40 h后拍照,实验重复三次后统计学分析。流式细胞术检测细胞周期及凋亡:常规培养食管鳞癌Eca109、KYSE-450、TE-1细胞,设置PBS组(不加Propranolol),加药组(80μmol/L),固定、染色,检测488 nm处荧光。Western blot检测蛋白表达:常规培养食管鳞癌Eca109、KYSE-450细胞,设置PBS组(不加Propranolol),加药组(60、80μmol/L),凝胶电泳,湿法转膜,ECL显影,实验重复三次后统计学分析。裸鼠皮下成瘤实验:10只裸鼠,设置PBS组(不加Propranolol)和Propranolol组(加药组),每组5只,均接种Eca109细胞5×10^(6)cells/100μl于右侧腋下,加药组隔日灌胃,每次0.4 ml(6 mg/kg),期间隔日测量肿瘤大小,持续3周。20 d后处死裸鼠取瘤体组织。结果:结果显示Propranolol可抑制Eca109、KYSE-450、TE-1细胞增殖,48h IC_(50)均为70μmol/L;抑制Eca109、KYSE-450、TE-1细胞迁移,且具浓度依赖性(P<0.05);阻滞Eca109细胞周期于G2/M期,阻滞KYSE-450细胞和TE-1细胞周期于G0/G1期,并促进三种细胞凋亡(P均<0.05);细胞免疫荧光结果显示Propranolol处理TE-1细胞12 h、24 h、36 h后LC3荧光强度增加(P均<0.05);Western blot结果显示与PBS组比较,加药组p-mTOR、p-Akt、cyclin D1蛋白表达量下调、cleaved caspase 9蛋白水平上调(均P<0.05);裸鼠皮下成瘤结果显示对照组瘤重(0.91±0.05)g,实验组瘤重(0.65±0.12)g,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:普萘洛尔抑制ESCC细胞增殖、迁移、周期,促进其凋亡和自噬,并抑制裸鼠皮下肿瘤生长,其机制可能与其抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。

TOFA对人食管鳞癌Eca109和KYSE-450细胞生长的影响

目的:探讨5-十四烷氧基-2-呋喃酸(TOFA)对人食管鳞癌(ESCC)细胞Eca109和KYSE-450细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法:将Eca-109细胞和KYSE-450细胞分为对照组(DMSO)和实验组(TOFA),细胞(4×10^(3) cells/100μl)接种于96孔板中,每个浓度设置5个复孔,培养24 h后,给予DMSO(对照)和不同浓度(1、3、5、10μg/ml)TOFA处理,继续培养24、48和72 h;MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,Western blot检测p21、Cleaved caspase-3表达水平及p-AKT、p-mTOR、p-4EBP1修饰水平,专用试剂盒检测细胞内游离脂肪酸。结果:与DMSO组比较,TOFA以浓度和时间依赖性方式抑制Eca109和KYSE-450细胞增殖(P均<0.05),处理48 h的IC_(50)分别为4.65和3.93μg/ml;实验组细胞G2/M期细胞百分比增加,细胞凋亡率增高,p21、Cleaved caspase-3蛋白表达水平上调(P均<0.05),p-AKT、p-mTOR、p-4EBP1修饰水平下调(P均<0.05)。结论:TOFA抑制人食管鳞癌细胞增殖、阻滞细胞周期并促进细胞凋亡,其机制可能与其抑制AKT/mTOR/4EBP1信号通路有关。

猪的科学免疫程序

一、种公猪免疫程序 (1)每年春秋两季各肌肉注射一次猪瘟猪肺疫两联苗；(2)每年春秋两季各肌肉注射一次猪丹毒疫苗；(3)每年肌肉注射一次猪细小病毒疫苗；(4)每年在右侧胸腔注射一次猪喘气病疫苗；(5)每年4—5月注射一次乙型脑炎弱毒苗；(6)每年春秋两季各注射一次猪传染性萎缩性鼻炎疫苗；(7)每年春秋两季各注射一次猪口蹄疫O型灭活疫苗。

高海拔地区纤维支气管镜行小儿食道检查治疗1例报告

用纤维支气管镜行食道检查及治疗在内地应用较早,拥有一些临床经验,但在高海拔地区尚属首例。纤支镜不同于胃镜,只能吸引,不能进行充气、注水操作,食道在肌肉松弛状态下是闭合的,加之纤维支气管镜非常柔软,不能通过食道的第一狭窄部位,需要与麻醉医师进行良好的沟通和配合,方能完成诊疗过程。通过对此例患者的治疗,我们总结了一些用纤支镜行食道诊疗的方法,也发现了这种治疗的弊端,对今后相似患者的治疗提供了一种思路。

拉萨市双侧肺大疱同期经双侧乳晕单孔全胸腔镜切除术报告

资料患者男性,35岁,瘦高体型,胸廓稍扁平,因外伤致左侧胸痛3天入科,入科胸部CT:双侧肺尖多发肺大疱,左侧第4肋前肋骨折,断端错位不明显。入科第2天突发左侧胸痛、胸闷,行胸片:左侧低4肋骨折,左侧自发性气胸,左肺压缩约40%(图1)。余相关检查未见明显异常。明确手术指征,患者取仰卧位,全麻,插双腔气管插管,上身抬高约15度,先行左侧肺大疱,手术床向右倾斜约20度,常规消毒铺巾,沿左侧乳晕下缘做一长约3cm弧形切口(图4),切开皮肤及皮下组织、肌肉,单肺通气(建侧通气)经下一肋上缘进入胸腔,置入胸腔镜探查见左肺尖多发簇状肺大疱(图2),余肺叶未见明显异常,用有齿卵圆钳钳夹肺大疱,腔镜用直线切割吻合器行肺大疱基底部楔形切(图3),再次探查未见明显肺大疱及活动性出血,胸腔注水后鼓肺检查,未见明显漏气,术毕,吸尽胸腔内液体,于左侧锁骨中线第2肋间及腋中线第6肋间各放置大号深静脉管1根于胸腔内,用于术后引流胸腔内的气液(代替胸腔闭式引流管)(图4),双肺通气,夹闭引流管,清点纱布器械无误,逐层关胸,经乳晕皮肤切口予皮内美容缝合后,打开锁骨中线第2肋间引流管,嘱麻醉医师单肺通气(术侧通气)并鼓肺排气后,夹闭引流管。

敲低乙酰辅酶A羧化酶1通过上调热休克蛋白27促进食管鳞状细胞癌迁移

目的探讨敲低乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)对食管鳞状细胞癌(以下简称食管鳞癌)KYSE-450细胞迁移的影响及分子机制。方法慢病毒转染法建立对照组细胞系sh-NC和敲低ACC1的细胞系sh-ACC1,脂质体法转染人热休克蛋白27(HSP27)siRNA建立对照及敲低HSP27的细胞系si-NC和si-HSP27,选择性乙酰基转移酶p300/CBP抑制剂C646抑制组蛋白乙酰化并设置对照组DMSO。Transwell法检测细胞迁移能力,实时荧光定量聚合酶链反应检测HSP27 mRNA的表达,Western blot检测ACC1、H3K9ac、HSP27和上皮-间充质转化相关蛋白E-cadherin和Vimentin的表达。结果sh-NC组细胞中ACC1的表达水平高于sh-ACC1组(P<0.01)。sh-NC组细胞迁移数[(159.00±24.38)个]低于sh-ACC1组[(361.80±26.81)个,P<0.01],sh-NC组细胞中E-cadherin蛋白表达水平高于sh-ACC1组,Vimentin蛋白表达水平低于sh-ACC1组(均P<0.05)。sh-NC+si-NC组细胞迁移数[(189.20±16.02)个]低于sh-ACC1+si-NC组[(371.60±38.40)个,P<0.01],sh-NC+si-NC组细胞迁移数高于sh-NC+si-HSP27组[(83.80±24.38)个,P<0.01],sh-ACC1+si-NC组迁移细胞数高于sh-ACC1+si-HSP27组[(152.40±24.30)个,P<0.01]。sh-NC+si-NC组细胞中E-cadherin蛋白表达水平低于sh-NC+si-HSP27组,高于sh-ACC1+si-NC组,Vimentin蛋白表达水平高于sh-NC+si-HSP27组,低于sh-ACC1+si-NC组(均P<0.05);sh-ACC1+si-NC组细胞中E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平与sh-ACC1+si-HSP27组比较,差异有统计学意义均(均P<0.01)。C64620μmmo/L处理细胞24 h后,sh-NC+DMSO组细胞迁移数[(190.80±11.95)个]低于sh-ACC1+DMSO组[(395.00±17.10)个,P<0.01],sh-NC+DMSO组细胞迁移数低于sh-NC+C646组[(256.20±23.32)个,P<0.01],sh-ACC1+DMSO组细胞迁移数高于sh-ACC1+C646组[(87.80±11.23)个,P<0.01]。sh-NC+DMSO组细胞中H3K9ac、HSP27、E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平与sh-ACC1+DMSO组和sh-NC+C646组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01),sh-ACC1+DMSO组细胞中H3K9ac、HSP27、E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平与sh-ACC1+C646组比较,差异有统计学意义均(均P<0.01)。结论敲低ACC1通过增加组蛋白乙酰化上调HSP27促进食管鳞癌KYSE-450细胞迁移。

基于SEER数据库预测食管癌患者生存

目的构建预测食管癌患者生存的Nomogram模型。方法下载1973~2015年美国国立癌症研究所的监测、流行病学和结果(SEER)数据库食管癌患者临床病理信息,按7∶3分为建模组与验证组,应用相关系数图评估多个变量间共线性情况,应用Lasso回归筛选有预测价值的变量,应用曲线拟合明确预测生存时间区间,据此,构建Nomogram预测模型,应用受试者工作特征(ROC)曲线、校准曲线评估模型可靠性,应用决策曲线分析(DCA)评估模型的临床应用价值。结果相关系数图显示多个变量间存在共线性情况,Lasso回归确定有预测价值的变量为Grade分级、T分期、N分期、M分期、手术,其中手术因素影响权重最大;ROC曲线提示模型具有较好区分度,校准曲线显示预测模型与理想模型拟合良好,DCA显示出临床净获益。结论基于Grade分级、T分期、N分期、M分期、手术因素构建的Nomogram模型具有可靠的预测性能及临床实用价值,对临床上实施个体化预测生存时间及制定治疗、护理方案具有重要参考意义。