浙江省绍兴市地区孕妇 RCH 感染的检测分析

了解绍兴孕妇 RCH 感染情况,为本地区备孕女士预防 RCH 感染提供科学依据。方法:采用化学发光免疫分析技术检测孕妇血清的 RCH 相关 IgM 水平。结果:风疹病毒 IgM(RUV-IgM)阳性 78 例,阳性率 1.19%,巨细胞病毒 IgM(CMV-IgM)阳性 30 例,阳性率 0.46%,单纯疱疹病毒 IgM[HSV(Ⅰ+Ⅱ)-IgM]阳性 736 例,阳性率 11.22%。结论:在孕前、孕早期进行RCH 筛查,能针对性预防 RCH 感染。在临产前进行 RCH 筛查,能帮助选择分娩方式,有效阻止因产道感染的母婴传播。

CMV-DNA检测在新生儿黄疸并CMV感染中的诊断价值

目的探讨巨细胞病毒(CMV)DNA检测在新生儿黄疸中的诊断价值。方法采用荧光定量聚合酶链式反应检测血液和尿液中的CMV-DNA浓度,采用化学发光方法定量检测血清中的CMV-Ig M抗体。比较不同方法与不同标本的差异性。结果 CMV-DNA阳性:尿液标本中14例(9.3%),血液标本阳性12例(8.0%);CMV-Ig M抗体阳性2例(1.3%)。血液和尿液的CMV-DNA诊断一致性分析Kappa值为0.75,在0.61~0.8间,高度一致。结论 CMV-DNA诊断新生儿黄疸合并活动性巨细胞病毒感染比CMV-Ig M抗体更有价值,尿液和血液CMV-DNA的检出结果一致,可以利用尿液代替血液进行巨细胞病毒的检测。

无创DNA产前检测血浆质控物的研究进展

无创产前基因检测(NIPT)是应用高通量基因测序技术检测孕妇外周血中胎儿游离DNA片段,以评估胎儿常见染色体非整倍体(T21、T18、T13)风险的一种产前筛查方式,为防治出生缺陷做出了极大的贡献。为确保检测结果的准确可靠,须在检测中加入质控物对检测全过程进行严格的质量控制。但目前大多数检测平台的血浆提取过程中缺乏血浆质控物。在不同平台的室间质评中,也需要通用的血浆质控物。为解决这个质控问题,近年来出现了6种NIPT血浆质控物的制备策略,根据其基质和阳性DNA的来源不同,分别具有不同的适用范围和优缺点。

无创产前检测胎儿染色体非整倍体中血浆质控物的研制

目的无创产前检测胎儿非整倍体(NIPT)自制血浆质控物的研制及其性能验证。方法对2019年1月1日到2021年6月30日来绍兴市妇幼保健院遗传咨询门诊就诊、并选择NIPT检测结果为阴性的孕妇随访新生儿性别,将对应储存的孕妇血浆分成男婴孕妇组19份、女婴孕妇组120份。顺序收集2020年9月至2021年9月的9360例病例作为临床验证病例。第1步:用1例47岁未孕健康女性空白血浆作为基质,每管200μl血浆分别加入5个不同体积(0.1、0.2、0.5、2.5和5μl)的胎儿染色体非整倍体(T21、T18、T13)检测试剂盒自带的阳性DNA,根据检测结果选择0.5μl的阳性DNA加样量。第2步:将男婴孕妇组血浆(19份)和女婴孕妇组血浆(20份)分别作为基质,每管(205μl)加入0.5μl的阳性DNA,发现女婴孕妇组血浆的检测结果重复性好,敏感度为100%。第3步:对120份女婴孕妇组血浆的自制血浆质控品进行性能评价,通过计算Z值、胎儿游离DNA浓度的CV值变化等指标来评价储存稳定性、基质均匀性、加入不同批号阳性DNA时的影响。结果女婴孕妇组混合血浆为基质重复性好,敏感度为100%,而男婴孕妇组留存血浆为基质的敏感度只有84%。批内重复性结果显示女婴孕妇组血浆作为基质中胎儿游离DNA浓度的CV值为3.9%;加入0.5μl阳性DNA后,自制阳性血浆质控品的胎儿游离DNA浓度为5.63%±0.42%,Z值均>6,放置3个月,胎儿游离DNA浓度的CV值为7%。阳性DNA的批号不同,浓度会有差异,当阳性DNA的胎儿游离DNA浓度值低于10%时,要加入1μl的阳性DNA。经2020年9月至2021年9月9360例临床检测中的应用,发现所有阳性血浆质控物均呈阳性结果,患者21三体的阳性预测值为100%。结论成功研制NIPT自制阳性血浆质控物,初步实验结果证实重复性好,较为稳定,适合在临床上推广。

两例无创产前检测提示5号染色体短臂末端微缺失的产前病例的分析

患者1女,28岁,第一次妊娠,因胎儿无创产前筛查检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)提示5号染色体部分缺失[del(5p15.33-p15.2)]14.94 Mb前来行产前诊断,早期超声未见异常。患者2女,35岁,孕2产1,孕19周因NIPT提示5号染色体短臂p15.33-p14.1微缺失26.96 Mb前来行产前诊断,早期超声未见异常。患者表型正常,孕期其他检查未见异常,无明显家族史,非近亲婚配。