基于发光金纳米粒子荧光增强法测定溶菌酶

参照文献方法合成了BSA修饰的水溶性发光金纳米粒子,并考察了其与溶菌酶之间的相互作用。依据溶菌酶对金纳米粒子的发光增强现象,建立了测定溶菌酶的荧光新方法。考察了发光金纳米粒子的浓度、pH值、反应时间及共存物质对测定的影响。优化条件为:发光金纳米粒子浓度4.0×10-6 mol/L、pH 7.0、反应时间10 min。在此条件下,荧光增强与溶菌酶浓度在2×10-7～8×10-6 mol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为3.0×10-8 mol/L。对4.0×10-6 mol/L溶菌酶平行测定6次,相对标准偏差为2.6%。本方法具有灵敏度高、探针水溶性好和生物毒性低的优点,同时,常见低等电点蛋白质对分析不干扰。本方法用于合成样品及鸡蛋清中溶菌酶含量测定,平均回收率为97.5%～103.6%。