米曲霉氨基酰化酶拆分DL-茶氨酸

DL 茶氨酸经乙酰化可生成N 乙酰DL 茶氨酸, 然后利用米曲霉氨基酰化酶拆分N 乙酰DL 茶氨酸可以获得L 茶氨酸。本文对氨基酰化酶酶促反应也进行了初步研究, 考察了反应温度、反应时间、pH值和底物浓度等因素对酶促反应的影响。实验表明, 转化温度40℃、转化时间30 h、pH为7 0和底物浓度0 2 mol/L时, 目的产物L 茶氨酸的产率最高。

中试规模制备L-茶氨酸及其衍生物

报道了中试规模制备L-茶氨酸和L-谷氨酰胺的一种方法。以廉价的L-谷氨酸为原料,采用邻苯二甲酰基作为保护基,保护L-谷氨酸的α-氨基,醋酐回流10 m in使其分子内脱水生成N-邻苯二甲酰-L-谷氨酸酐,在常温、常压条件下,分别与2 mol/L氨水和2 mol/L乙胺水溶液反应生成中间产物N-邻苯二甲酰-L-谷氨酰胺、N-邻苯二甲酰-L-茶氨酸,中间产物在室温条件下与0.5 mol/L水合肼反应48 h脱除保护基,分别以57%、61%的收率得到L-谷氨酰胺和L-茶氨酸。

D-谷氨酰胺的制备

报道了以化学合成和生物转化的方法制备光学纯D-谷氨酰胺.首先在中试规模上用化学方法合成DL-谷氨酰胺.即以廉价的DL-谷氨酸为原料,采用邻苯二甲酰基作为保护基保护L-谷氨酸的α-氨基,醋酐回流15min,使其分子内脱水生成N-邻苯二甲酰-DL-谷氨酸酐,在常温、常压条件下,分别与2mol/L氨水反应生成中间产物N-邻苯二甲酰-DL-谷氨酰胺,中间产物在室温条件下与0.5mol/L水合肼反应48h脱除保护基,以57%总收率得到DL-谷氨酰胺.在37℃,pH4.8的条件下,利用大肠杆菌(E.coli.AS1.505)脱羧酶将底物浓度30g/L的DL-谷氨酰胺中L型对映体在8h内完全转化为4-氨基丁酰胺,分离得到D-谷氨酰胺.

生物转化制备D-谷氨酰胺的研究

报道了制备D-谷氨酰胺的一种新方法,即利用大肠杆菌AS1.505的L-谷氨酰胺脱羧酶立体选择性地将D,L-谷氨酰胺中L型对映体降解为4-氨基-丁酰胺,分离得到D-谷氨酰胺。同时考察了转化体系温度、pH等因素对L-谷氨酰胺脱羧酶活力的影响。实验结果表明最佳条件为:温度37℃,转化体系pH=4.8,菌体质量浓度5 g/L,吐温-80质量浓度0.15 g/L,菌龄14 h,底物质量浓度40 g/L。L-谷氨酰胺脱羧酶在最适转化条件下比酶活可以达到4 200 U,L-谷氨酰胺在8 h内完全转化成4-氨基-丁酰胺,D-谷氨酰胺收率达到理论收率的92%。

酶法制备D-谷氨酸和γ-氨基丁酸的工艺研究

考察了大肠杆菌AS1.505的L谷氨酸脱羧酶对L谷氨酸的专一脱羧作用,分析了转化体系温度、pH值等因素对L谷氨酸脱羧酶活力的影响。实验结果表明最佳工艺为:温度37℃,转化体系pH值4.8,菌体浓度6g/L,吐温800.15g/L,菌龄14h,底物浓度50g/L。L谷氨酸脱羧酶在最适转化条件下比酶活可以达到15036U。1g湿菌体可重复使用3次共转化DL谷氨酸25g,其中L谷氨酸可以完全转化为γ氨基丁酸。D谷氨酸及γ氨基丁酸的总收率可以分别达到理论收率的87%和85%。

10 t/a中试规模制备二肽L-丙氨酰-L-谷氨酰胺

以邻苯二甲酰基为保护基,采用混合酸酐法接肽,中试规模制备了L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(力肽)。结果表明,制备L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的最佳条件为:N-Pht-L-丙氨酸接肽的最佳溶剂是乙酸乙酯,温度为0℃,n(N-Pht-L-丙氨酸)∶n(L-谷氨酰胺)=1∶1。以L-丙氨酸计,总摩尔收率为34.4%。目标产物质量分数达98.6%。

DOP液相催化加氢制DEHCH及其动力学研究

以邻苯二甲酸二异辛酯(DOP)为原料,考察了4种金属催化剂作用下加氢制取环己烷二甲酸二异辛酯(DEHCH)的催化效果,系统研究了反应温度、氢气压力、反应时间和催化剂用量的影响。结果表明,Rh/C的催化活性最高;反应温度对加氢反应速度的影响较小,而氢气压力和催化剂用量的影响比较显著。实验确定了DOP加氢的适宜工艺条件为:温度为170℃,氢气压力2.0 MPa,反应时间为4.0 h。在此条件下,DEHCH是反应的唯一产物,收率高达99.5%以上。DOP加氢的表观动力学分析表明,催化剂表面上的吸附氢气浓度是加氢过程的控制步骤。

甘油脱水制丙烯醛催化剂的研究进展

伴随着生物柴油的产量不断增大,大量副产的甘油导致了市场过剩。甘油脱水制取丙烯醛是提高生物柴油经济性的一条有效途径。本文结合近年来甘油脱水制丙烯醛的研究进展情况,分析了液相、气相以及超(亚)临界条件下该反应的特点,重点阐述了气相脱水催化剂的研究进展,讨论了催化剂的微观结构、活性组分的酸碱性和氧化还原位等对催化剂活性、选择性和寿命等的影响,分析了催化剂失活的原因。此外,还讨论了甘油脱水过程的反应机理,指出了今后甘油脱水制丙烯醛的研究方向。

精氨酸脱亚胺酶发酵条件研究

对一种新型肿瘤增殖抑制酶类一精氨酸脱亚胺酶的发酵生产工艺进行了研究。运用单因子扫描方法，考察了不同碳源、氮源等影响因子对粪肠球菌（Enterococcus faecalis）NJ402产精氨酸脱亚胺酶的影响。优选出其较佳培养基组分为（g／L）；蔗糖15，蛋白胨5，酵母膏5，牛肉膏2．5，NaCl3，KH2PO42，MgSO40．01，MnSO40．0025，L-精氨酸15；接种量以4％～5％为宜，最佳培养温度是37℃，最适起始pH为7．5。100L发酵罐实验表明，发酵到10h时，菌量与比酶活量均为最大，分别为40mg／mL和2．57U／mL。

微波促L-苯丙氨酸消旋反应研究

介绍了微波促L苯丙氨酸消旋反应是一种新的可适合于工业化的生产方法,具有对环境友好的优点。使用微波作为热源不仅可加速反应和节约能源,也可提高反应的收率和产品的纯度。本方法确定了在微波辐射下,以1.0mol/L氢氧化钠水溶液替代低级脂肪酸作为反应溶剂,用物质的量比为0.10的水杨醛为催化剂,L苯丙氨酸可以快速消旋;在此条件下,消旋反应随微波辐射功率的提高而加快,在66%输出功率下反应已接近最大反应速率。从实验中得出微波促L苯丙氨酸消旋的反应是一级不可逆反应。考察了此消旋反应的影响因素,同时讨论了微波作用下L苯丙氨酸的消旋反应机理。

酶法分离制备γ-氨基丁酸和L-天冬氨酸

以L-谷氨酸(L-G lu)和L-天冬氨酸(L-Asp)两种混合酸性氨基酸〔m(L-G lu)∶m(L-Asp)=1∶1〕为原料,利用大肠杆菌菌体内脱羧酶对L-谷氨酸的专一脱羧作用,酶法分离制备了γ-氨基丁酸和L-天冬氨酸。考察了转化体系温度、pH等影响L-谷氨酸脱羧酶活力的主要因素,实验表明,最佳工艺条件为:温度35℃,转化体系pH=5.0,ρ(菌体)=6 g/L,ρ(Tween80)=0.15 g/L,菌龄16 h,ρ(底物)=60 g/L。L-谷氨酸脱羧酶在最适转化条件下比酶活高达15 036 U。1 g湿菌体可重复使用3次共转化L-谷氨酸和L-天冬氨酸混合物30 g,其中L-谷氨酸完全转化为γ-氨基丁酸。γ-氨基丁酸及L-天冬氨酸的总收率可分别达到理论收率的88%和90%。

Activity and Stability of Arginine Deiminase for Producing L-citrulline

A novel Enterococcus faecalis strain designated N J402 was found with high activity of arginine deiminase （ADI）. The optimum condition for catalytic activity was determined in terms of temperature （about 40℃）, thermostability （available 37℃） and pH （6-7）. The effects of substrate and product concentration were studied. The effects of various metal ions added in reaction mixtures on the biocatalyst were investigated and ADI of N J402 was found to exhibit Co^2＋ dependence, different from previous reports. Surfactant, cetyl trimethyl ammonium bromide, was one of the most important keys for producing L-citrulline. The enzyme in resting cells possessed the quality of high stability for reuse.