黄酒多肽的多级分离纯化及其对小鼠巨噬细胞免疫调节的影响

本研究以黄酒为原料,通过大孔树脂吸附、凝胶色谱等方法多级分离纯化黄酒中活性肽组分,并探究各级分离肽组分对小鼠巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用的影响。通过脂多糖LPS(1μg/mL)刺激RAW264.7细胞建立体外炎症模型,以不同浓度的各级分离纯化的黄酒多肽样品进行干预,对NO释放抑制率最高的黄酒多肽组分进行结构分析。结果表明,可通过大孔树脂初步分离纯化黄酒活性多肽。对3种不同型号大孔树脂的吸附解析性能进行比较,最终选择DA201-C大孔吸附树脂富集黄酒多肽,收集洗脱液旋蒸冻干后获得黄酒多肽SJ组分。采用MTT法检测细胞活力,黄酒多肽SJ作用RAW264.7细胞的安全范围为≤2.5 mg/mL。采用Griess Reagent法检测细胞培养液中一氧化氮(NO)含量,与LPS模型组相比,黄酒多肽SJ浓度为0.3、0.6、1.2、2.5 mg/mL时能明显抑制NO释放(抑制率分别为20.85%、36.42%、68.58%、95.01%)。黄酒多肽SJ经Sephadex G-15凝胶色谱柱分离得到3个组分即G1、G2、G3,分别收集这三组洗脱峰并测定其对RAW264.7细胞NO分泌量的影响。研究发现G1组分活性高于其他2种组分,G1、G2、G3的NO释放半抑制浓度分别是0.68、0.86、0.75 mg/mL。对G1组分进行氨基酸组成分析得知其疏水氨基酸占比32.63%,必需氨基酸占比28.46%。研究结果证明黄酒多肽能显著抑制LPS诱导的RAW264.7分泌NO,对LPS刺激的RAW264.7细胞炎症具有保护作用,从而促使巨噬细胞发挥免疫作用。

黄酒中不同物质对乙醇代谢的影响研究

乙醇作为酒类饮料中含量最高的物质,在酒类饮品导致的各类问题中都是最重要的影响因素。在本研究中,为研究黄酒易上头的问题,以乙醇作为研究目标,在SD大鼠模型中,通过共同摄入乙醇和黄酒中生物胺、高级醇和醛类物质,考察了不同物质对乙醇代谢的影响。结果显示,在考察的10种物质中,所有物质单独与乙醇共同摄入后都明显降低了SD大鼠血液中乙醇浓度。经药物代谢动力学模型分析后,10种物质中抑制乙醇代谢作用的物质由强到弱的顺序为:异丁醇>正丙醇>腐胺>尸胺>组胺>苯乙醇>乙醛>酪胺>5-HMF>异戊醇。因此,黄酒中含有的多种物质可能通过抑制乙醇代谢的作用达到促进黄酒上头、引起饮后舒适度问题的原因。