高迁移率族蛋白B1促进结肠癌细胞增殖、迁移与侵袭的机制探讨

目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在结肠癌细胞中的表达和对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:采用qPCR与Western blot法检测人结肠癌SW620细胞与正常结肠上皮细胞FHC中HMGB1的mRNA和蛋白表达。通过Lipofectamine 3000转染质粒构建稳定下调HMGB1表达(shHMGB1)的SW620细胞,同时设置阴性对照(shNC)细胞和空白对照(blank)细胞;采用CCK-8、平板集落形成实验和Transwell实验检测细胞的增殖、迁移及侵袭能力。采用Western blot检测HMGB1表达下调对p-ERK、ERK、c-Myc、基质金属蛋白酶(MMP)-2/9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、Bcl-2及Bax的蛋白表达水平的影响。结果:SW620细胞中HMGB1在mRNA及蛋白水平表达均高于正常结肠上皮细胞FHC(P<0.05)。经qPCR与Western blot验证,HMGB1低表达细胞构建成功。与blank组和shNC组相比,shHMGB1组细胞增殖、迁移和侵袭能力受到显著抑制(P<0.01)。Western blot结果表明,同blank组和shNC组比较,shHMGB1组细胞的MMP-2、MMP-9、N-cadherin、c-Myc、Bcl-2及ERK磷酸化蛋白表达显著下调,Bax蛋白表达显著上调(P<0.05)。结论:HMGB1可促进结肠癌SW620细胞的增殖、迁移和侵袭能力,ERK/c-Myc信号通路参与了这一过程。

二甲双胍通过下调c-Myc增强人乳腺癌MDA-MB-231细胞对他莫昔芬的敏感性

目的:研究二甲双胍是否通过下调c-Myc增强人乳腺癌MDA-MB-231细胞对他莫昔芬的敏感性。方法:CCK-8法、平板集落形成实验、流式细胞术和Transwell实验检测二甲双胍和他莫替芬单独/联合作用对MDA-MB-231细胞活力、集落形成能力、肿瘤细胞凋亡率及迁移和侵袭能力的影响;Western blot和免疫组化实验检测细胞和肿瘤组织中c-Myc的表达水平;建立SCID小鼠MDA-MB-231细胞皮下移植瘤模型,以研究二甲双胍和他莫昔芬在体内对三阴性乳腺癌的影响。结果:与对照组和单独用药组相比,二甲双胍联合他莫昔芬协同抑制MDA-MB-231细胞的活力和迁移能力,对集落形成、凋亡诱导和侵袭能力表现为相加效应(P<0.01);二甲双胍和他莫昔芬单独或者联合下调c-Myc蛋白的水平(P<0.01)。进一步研究表明,二甲双胍和他莫昔芬可能通过下调c-Myc抑制SCID小鼠皮下移植瘤的生长(P<0.01)。结论:二甲双胍联合他莫昔芬通过下调c-Myc抑制三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭以及SCID小鼠的肿瘤生长。二甲双胍联合他莫昔芬有望成为三阴性乳腺癌的一种有效的治疗手段。

HMGB1低表达对结直肠癌细胞迁移和侵袭的影响

该文研究了低表达高迁移率族蛋白(high mobility group box 1, HMGB1)对结直肠癌细胞迁移侵袭的影响,构建了稳定低表达HMGB1的结直肠癌细胞系SW480和HCT-15。采用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,免疫印迹法(Western blot)检测蛋白表达水平。Transwell实验结果表明, shHMGB1组(HMGB1低表达组)的迁移侵袭能力明显强于shNC组(阴性对照组)(**P<0.01,***P<0.001)。Western blot结果显示,与shNC组相比, shHMGB1组上皮标志物E-Cadherin蛋白的表达水平下降(*P<0.05,**P<0.01),间质标志物Snail蛋白的表达水平上升(*P<0.05)。此外shHMGB1组的c-Myc和GSK3B蛋白表达水平明显高于shNC组(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001)。上述结果表明,低表达HMGB1能显著促进结直肠癌细胞SW480和HCT-15的迁移和侵袭能力以及上皮–间质化(epithelial-mesenchymal transition, EMT),这为结直肠癌的治疗提供了新的潜在靶点和视角。

二甲双胍通过下调c-Myc增强他莫昔芬对乳腺癌的抗肿瘤作用

乳腺癌是一种常见的高度恶性肿瘤,在临床病人的治疗中,寻找有效的抑制肿瘤生长的治疗方法尤为重要。他莫昔芬目前被用于治疗雌激素受体阳性乳腺癌。二甲双胍是一种抗糖尿病药物,据报道可以降低人类癌症发病率,提高乳腺癌患者的生存率。该文主要研究二甲双胍联合他莫昔芬对乳腺癌细胞的协同作用及其机制。采用CCK-8法和平板克隆形成实验检测细胞活力和增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力;免疫印迹法检测MAPK信号通路和c-Myc蛋白。结果显示,他莫昔芬与二甲双胍联合用药对乳腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移侵袭及凋亡的作用均优于单独用药,表明二甲双胍可以增强他莫昔芬对肿瘤生长的抑制作用,并能下调c-Myc蛋白的表达。该研究结果显示,二甲双胍能明显提高乳腺癌细胞的抗肿瘤作用,这些影响是通过下调c-Myc蛋白介导的。该发现可能对乳腺癌的治疗有潜在的临床应用价值。