单孔与三孔腹腔镜全腹膜外单侧腹股沟疝修补术的对比研究

目的:对比分析单孔腹腔镜完全腹膜外疝修补术(SIL-TEP)与传统三孔完全腹膜外疝修补术(TEP)治疗单侧腹股沟疝的临床效果。方法:回顾分析2021年2月至2023年3月收治的30例单侧腹股沟疝患者的临床资料,按手术方式分为SIL-TEP组与三孔TEP组,每组15例,比较两组手术时间、术中出血量、术中呼气末二氧化碳分压峰值、术后皮下气肿发生率、术后24 h疼痛视觉模拟评分、术后住院时间、切口满意度、术后并发症发生率及复发率等指标。结果:SIL-TEP组手术时间长于三孔TEP组[(105.1±37.7)min vs.(53.3±9.0)min,P<0.01],术中呼气末二氧化碳分压峰值[(45.3±3.4)mmHg vs.(48.1±3.3)mmHg,P<0.05]、术后皮下气肿发生率[6.7%vs.46.7%,P<0.05]、术后24 h疼痛评分[(2.7±0.9)分vs.(3.5±1.0)分,P<0.05]均低于三孔TEP组,切口满意度评分高于三孔TEP组[(9.8±0.4)分vs.(7.7±0.6)分,P<0.01]。两组术中出血量、术后住院时间、术后切口脂肪液化、血清肿发生率差异均无统计学意义(P>0.05),术后随访,两组均无疝复发、慢性疼痛发生。结论:SIL-TEP治疗腹股沟疝安全、可行,虽然手术时间较长,但对术中呼吸功能影响小,具有疼痛轻、美容效果好等优势,具有临床实用价值。

嗅鞘细胞/细胞外基质夹层支架的制备和形态学观察

目的研究嗅粘膜嗅鞘细胞在细胞外基质夹层支架内的生长特性,为治疗神经系统损伤寻找新的移植供体。方法嗅鞘细胞/细胞外基质夹层支架由四层毯状细胞外基质支架和三层嗅粘膜嗅鞘细胞相间叠加构成。纤维蛋白原、层粘连蛋白和纤粘连蛋白按一定比例混合后,在新鲜大鼠血浆促凝作用下,构建单层毯状细胞外基质支架,在支架表面种植嗅粘膜来源的嗅鞘细胞。于倒置显微镜下观察嗅鞘细胞在支架上/内的生长过程,培养3d后,在细胞表面再次滴加上述细胞外基质混合胶以构建第二层毯状支架,依次重复两次。夹层支架制成组织切片和超薄切片后,用光镜和电镜观察和分析夹层支架的内部结构以及嗅鞘细胞在支架内的生长情况。结果由顶层至底层,支架内的嗅鞘细胞数量逐渐增多,细胞突起逐渐延长,细胞内分泌颗粒逐渐增多及其电子密度逐渐增高;细胞可在支架之间迁移,其水平排列方向具有一致性;嗅鞘细胞的细胞膜可与支架紧密粘附,支架内局部区域出现组织间隙。结论嗅粘膜嗅鞘细胞可在细胞外基质夹层支架内正常增殖和分化,细胞与支架具有良好的组织相容性。该夹层支架可作为嗅鞘细胞三维生长的载体,用于移植治疗神经损伤。

神经营养素受体在幼年大鼠神经系统表达的特点

为了研究神经营养素受体 ( Trks)在幼年大鼠神经系统的表达模式及分布规律。本研究应用免疫组织化学技术对幼年大鼠大脑皮质、小脑、脊髓、背根神经节中 Trks的表达及分布进行了形态学观察及定位。结果证明 ,神经营养素受体 Trk A,Trk B,Trk C在大脑皮质、脊髓、背根神经节中均有表达 ,Trk B呈强阳性且分布广 ,Trk A次之 ,Trk C为弱阳性 ;在小脑 Purkinje细胞Trk C表达阳性 ,Trk A弱阳性 ,Trk B阴性。结论 :幼年大鼠神经系统中 Trks表达存在差异 ,提示神经系统不同部位发育所需的神经营养素不同 ;Trks的分布部位与已报道的神经营养素的分布部位不完全重叠 。

一种新颖的神经胶质细胞—嗅鞘细胞

嗅鞘细胞(OECs)移植治疗脊髓损伤(SC I)已显示出良好的应用前景,不同来源的OECs体外培养时,在不同发育阶段和不同生长环境中具有不同的生物学特性。OECs具有特异性的标志蛋白,如S-100、p75NTR、GFAP等。体外培养的OECs分泌NGF、BDNF、NT-3/4、GDNF等多种促进神经细胞生长、分化和神经纤维再生的神经营养因子。将OECs植入脊髓损伤部位,该细胞能分裂增殖,并可抑制胶质瘢痕的形成,拮抗Nogo等神经再生抑制性因子的活性,包绕再生轴突形成髓鞘。由于OECs具有上述独特的生物学功能,被认为是继神经干细胞和雪旺氏细胞之后可用于移植治疗脊髓损伤的一种新颖的神经胶质细胞。

多层螺旋CT三维重建对不典型阑尾炎的早期诊断价值

目的探讨多层螺旋CT(multislice spiral CT,MSCT)三维重建对临床表现不典型阑尾炎的早期诊断价值。方法回顾性分析2011年1月至2014年12月收治的108例不典型阑尾炎手术病人的临床资料,对两组在性别比、年龄、主诉、伴随症状、体征和白细胞计数等方面资料进行统计,其中经MSCT检查的病人58例,为MSCT组,50例为非MSCT组。结果 53例术前MSCT检查的不典型阑尾炎经手术、病理证实为急性阑尾炎,诊断符合率91.4%,5例误诊:1例为回肠粘连性肠梗阻,1例右输卵管积脓伴盆腔炎,1例Meckel憩室炎伴鱼刺穿透伤,2例盲肠、升结肠憩室炎;非MSCT组诊断符合率78.0%,11例误诊:3例十二指肠球部溃疡穿孔,2例回盲部肿瘤,2例右侧输尿管下段结石伴肾积水,1例右侧卵巢囊肿蒂扭转,1例右侧卵巢黄体破裂,1例右侧输卵管峡部异位妊娠,1例肠系膜淋巴结炎。结论 MSCT阑尾三维重建技术能提高不典型阑尾炎的早期诊断水平,降低了误诊率,临床受益显著。

大鼠脊髓损伤后HIF-1α和VEGF表达的上调及其在血管新生中的意义

目的:探讨脊髓损伤后神经细胞内缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的变化在血管新生中的意义。方法:应用改良Allen重击法损伤大鼠T12脊髓,按伤后存活时间再分为脊髓损伤1 d,3d,7 d,14 d和30 d组。各组动物的脊髓切片经免疫荧光染色后,用荧光显微镜观察HIF-1α,VEGF的表达和分布,对Laminin免疫反应阳性的血管基膜进行图像分析,比较上述各组的血管密度。结果:HIF-1α和VEGF共定位于脊髓前角运动神经元,脊髓损伤局部的免疫荧光强度高于正常脊髓内的荧光强度,在脊髓损伤后第3天,其荧光强度达到高峰。脊髓损伤后Laminin阳性血管主要分布于损伤坏死组织周围并逐渐向坏死组织内生长,血管密度经历由低到高的过程。结论:脊髓损伤后损伤部位残存神经元可能通过表达高HIF-1α诱导VEGF表达增加,后者通过旁分泌模式作用于周围血管内皮细胞以促进内皮细胞增殖和血管再生。

大鼠嗅粘膜原代培养细胞的分类及细胞社会学特性研究

目的 :探讨嗅粘膜的细胞社会学特性 ,为嗅粘膜混合细胞移植治疗中枢神经系统损伤提供可行性研究资料。方法 :自成年大鼠鼻中隔活体剪取部分嗅粘膜制成细胞悬液接种于玻璃培养皿 ,用含 10 %胎牛血清的F12培养基培养 ,动态观察细胞的贴壁、生长及分化过程 ,并用波形蛋白 (vimentin)、层粘连蛋白 (laminin)、巢蛋白 (nestin)、神经元特异性烯醇化酶 (neuronspecificenolase,NSE)、胶质纤维酸性蛋白 (glialfibrillaryacidicprotein ,GFAP)及神经生长因子受体 p75(nervegrowthfactorreceptorp75,NGFRp75)抗体作免疫细胞化学染色 ,对阳性细胞进行形态学鉴定。结果 :体外培养的嗅粘膜细胞中包含成纤维细胞、神经干细胞、嗅细胞和嗅鞘细胞等 ,不同类型细胞的形态及生长特性存在差异。结论 :嗅粘膜细胞之间具有协调的细胞社会学关系 ;成体嗅粘膜混合细胞群移植治疗中枢神经系统损伤的可行性具有细胞社会学基础。

大鼠脊髓损伤后NGF及其受体TrkA在运动神经元及神经胶质细胞表达的变化

为探讨脊髓损伤后运动神经元及神经胶质细胞内神经生长因子(NGF)及其高亲和力受体(TrkA)表达的变化,用改良Allen重击法损伤SCI组动物T12脊髓,按伤后存活时间再将动物分为脊髓损1 d组、2 d组和5 d组。各组动物的脊髓切片经ABC法免疫组织化学染色,用光镜观察TrkA及NGF在脊髓前角运动神经元表达的变化和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及NGF免疫反应阳性胶质细胞的反应性增生程度,并进行图像分析。结果显示:脊髓损伤后前角运动神经元TrkA及NGF的表达随脊髓损伤后动物存活时间的延长逐渐上调;脊髓白质和灰质内尤其是皮质脊髓束内GFAP及NGF阳性胶质细胞明显增生;与此同时,室管膜细胞内亦可见明显的NGF免疫反应产物。上述结果表明,脊髓损伤可刺激脊髓前角运动神经元表达TrkA及NGF,通过自分泌维持受损神经元的存活;损伤部位反应性增生的胶质细胞亦可产生NGF,通过旁分泌作用于脊髓前角运动神经元或皮质脊髓束的轴突末梢,以维持运动神经元的存活及促进皮质脊髓束的再生;适时补充外源性神经营养素或改变损伤局部的微环境将有利于受损脊髓的修复和再生。

成年大鼠活体嗅粘膜原代培养细胞中神经干细胞的生长特性及形态学观察

为建立成年活体嗅粘膜神经干细胞的简便、实用的体外培养方法 ,进而为神经干细胞自体移植治疗中枢神经系统损伤的研究提供更为安全的候选细胞 ,本实验自成年大鼠活体分离剪取部分嗅粘膜经胰酶消化制成细胞悬液 ,接种于玻璃培养皿 ,用含 10 %胎牛血清的 F12培养基培养 ,动态观察神经干细胞克隆球的形成及分化过程 ,并用 nestin、NSE、GFAP、vim entin及laminin等抗体作免疫细胞化学染色 ,对阳性细胞进行形态学鉴定。结果显示 ,成年大鼠经嗅粘膜活体取材后 ,可长期存活。成体嗅粘膜细胞混合体外培养时不同类型细胞的贴壁时间存在差异 ,神经干细胞呈球形 ,不直接贴附于培养皿 ,仅粘着在首先贴壁的扁平基底细胞上分裂形成克隆球 ,球内细胞 nestin免疫细胞化学染色阳性。原代培养 14 d后克隆球不再生长 ,球周细胞逐渐向外迁移分化为嗅细胞和嗅鞘细胞。提示 ,成体嗅粘膜神经干细胞可在普通培养基中形成干细胞克隆球 ,嗅粘膜中的其它细胞作为神经干细胞的基底饲养细胞有助于干细胞克隆球的形成 ;活体分离成体嗅粘膜作混合细胞体外培养获取神经干细胞的方法简便、安全、可行 ;本结果为嗅粘膜神经干细胞自体移植治疗中枢神经系统损伤的可行性研究提供了动物实验资料。

纤维蛋白支架移植对大鼠脊髓损伤后神经再生和胶质瘢痕形成的影响

观察纤维蛋白-纤粘连蛋白-层粘连蛋白复合支架移植对大鼠脊髓损伤后神经再生和胶质瘢痕形成的影响,评价该支架移植修复脊髓损伤的可行性。本研究将圆柱状复合支架移植入大鼠脊髓完全横断缺损部位,同时以该模型动物作为对照组。分别于术后4w、8w、12w对动物下肢运动功能进行BBB评分。然后取出支架/脊髓组织,用免疫荧光双标和免疫印迹技术分析损伤部位神经纤维再生和胶质细胞增生情况;并用透射电镜观察支架移植部位的组织学结构。结果显示:术后4～12w支架移植组动物BBB评分明显高于对照组(P<0.05)。于术后4w,移植组可见支架内有少量神经纤维,此后神经纤维逐渐增多,而胶质细胞增生不明显;对照组脊髓损伤局部可见坏死空洞,空洞周边胶质细胞增生明显。免疫印迹检测结果表明,移植组神经丝蛋白(NF-200)相对含量高于对照组;对照组胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的相对含量高于实验组。以上结果提示:纤维蛋白支架移植可促进大鼠脊髓损伤后神经再生,并抑制胶质瘢痕形成。纤维蛋白(原)作为生物材料用于构建修复脊髓损伤的组织工程支架具有良好的应用前景。

他莫昔芬对人胶质瘤细胞的抑制作用

目的:探讨蛋白激酶C(PKC)抑制剂,他莫昔芬对人胶质瘤细胞U251生长的作用。方法:U251细胞PKCα和雌激素受体(ER)的表达用免疫组化,细胞活性分析用台盼蓝实验和四唑盐(MTT)比色实验,细胞增殖和凋亡,通过流式细胞仪进行检测,PKC抑制剂他莫昔芬(TAM)作用终浓度为5,2.5,1.25μg/m l;治疗对照为卡莫司汀(BCNU),终浓度与TAM相同。结果:细胞PKCα表达阳性,ER表达阴性。加入TAM后,U251细胞变老,脱落,细胞总数减少;活细胞比例为(82.553±12.187)%,MTT比色吸光值为0.607±0.079,空白对照组为(98.683±1.993)%和0.865±0.103,BCNU组(68.159±16.587)%和0.610±0.087,TAM组与空白对照组比较,细胞活力明显下降(P<0.001),与BCNU组比较无统计学差异;流式细胞仪检测显示TAM组G2-M期细胞相对空白对照组增多,为(12.418±3.646)%,TAM组细胞凋亡为(6.435±3.347)%,空白对照组为(1.205±0.985)%,二者有显著差异(P<0.001),并且有随着剂量减小,凋亡细胞增多的趋势(P=0.033)。提示增殖抑制,凋亡增加,卡莫司汀组表现为S期细胞增加,凋亡细胞比例比TAM明显减少(P=0.018)。结论:他莫昔芬对人U251胶质瘤细胞生长具有明显的抑制作用,可以作为人胶质瘤治疗后选方法。

腹膜前间隙补片植入术治疗成人腹股沟疝的经验体会

随着人们对腹股沟区解剖结构及腹股沟疝治疗方法不断深入地研究，腹腔镜技术逐渐被临床工作者广泛应用于成人疝修补术中。该技术没有破坏腹股沟区的正常解剖结构，具有微创、术后恢复快、并发症少、复发率低等特点，是继开放式无张力修补术治疗腹股沟疝之后的又一重要手段。随着人们对生活质量要求的不断提高，该技术将成为腹股沟疝修补术中的主流术式。

快速康复外科在38例十二指肠球部溃疡穿孔患者中的应用分析

目的采用一系列有循证医学依据的围术期处理的优化措施,以减少十二指肠球部溃疡穿孔患者的生理及心理的创伤应激,达到患者快速康复的目的。方法选择2008年1月—2011年12月72例十二指肠球部溃疡穿孔患者,随机分为快速康复外科组(FTS组)和对照组,其中38例FTS组采用快速康复外科处理措施。结果快速康复外科组患者术后下床活动时间、进食时间、首次肛门恢复排气排便时间、住院时间均短于对照组,痛苦程度和治疗费用均明显低于对照组,2组术后并发症发生率差异无统计学意义。结论十二指肠球部溃疡穿孔患者采用快速康复外科处理措施,与常规处理比较,有着较为明显的优势。

血清CEA和CA19-9表达水平对胃癌分期的临床意义

目的探讨术前血清癌胚抗原(CEA)、糖链抗原19-9(CA19-9)表达水平的变化对胃癌诊断和预后的价值。方法采用全自动化学发光免疫分析法,测定不同分期胃癌患者术前血清CEA和CA19-9含量变化。结果 CEA及CA19-9水平在Ⅳ期胃癌患者均显著高于Ⅰ～Ⅲ期胃癌(P<0.01)。CEA及CA19-9检测的阳性率分别为31.1%和39.5%,而CEA及CA19-9的阳性率为53.5%。结论血清CEA和CA 19-9水平与胃癌的病理分期呈正相关,联合检测血清CEA及CA19-9有助于胃癌的临床诊断,对病情的估计及预后的判断具有一定的指导意义。

大网膜恶性间质瘤1例

[典型病例]患者女，79岁，2007年9月18日因“发现下腹部肿块半年余”入院。患者半年余前起，无明显诱因下触及下腹部肿块，当时肿块较小并伴有腹痛，于当地医院行对症治疗后感腹痛好转，后腹痛反复出现。近1月来患者感腹部肿块明显增大，进食后有明显腹胀，无恶心、呕吐，无咳嗽、咳痰，无畏寒、发热，发病以来，食欲睡眠一般，大小便正常。患者2004年因子宫颈癌行次全子宫切除术＋双附件切除术，术后病理示鳞状细胞癌，未进一步放化疗。

残胃十二指肠吻合技术的研究现状及展望

胃大部切除术治疗胃十二指肠疾病已有100多年历史,BillrothⅠ式一直作为经典术式,是胃癌根治术、全胃切除等手术的基础,为现代胃肠外科的发展作出重要贡献。随着医学科学的发展以及对术后生活质量要求的提高,传统的外科理念和手术方式正在发生改变。

三苯氧胺对人胶质瘤细胞的生长抑制作用

目的探讨蛋白激酶C(PKC)抑制剂三苯氧胺对人胶质瘤细胞SHG-44生长抑制作用。方法SHG-44细胞中PKCα和雌激素受体(ER)的表达用免疫组化,细胞活性分析用台盼兰实验和四唑盐(MTT)比色实验,细胞增殖和凋亡,通过流式细胞术(FCM)进行检测,三苯氧胺作用终浓度为5、2.5、1.25μg/ml;治疗对照为卡氮芥(BCNU),终浓度与三苯氧胺相同。结果SHG-44细胞中PKCα表达阳性,ER表达阴性。三苯氧胺组与空白对照组相比,细胞衰老、脱落、总数减少;细胞活性下降;G0～G1期细胞比例增加,提示细胞增殖受到抑制;凋亡细胞比例增高。与BCNU组相比,在2.5和1.25μg/ml剂量组中出现G0～G1期细胞比例增加;凋亡细胞比例无统计学差异。结论三苯氧胺在体外对SHG-44胶质瘤细胞生长具有明显的抑制作用。

Ligasure血管闭合系统在胃癌D2根治术中的应用价值

目的:探讨Ligasure血管闭合系统在胃癌根治术的应用价值。方法:比较胃癌D2根治术中使用Ligasure血管闭合系统组(15例)和传统手术组(15例)的手术时间、术中出血量、术后腹腔引流液总量的情况。结果:Ligasure组手术时间为(120±15)min,较传统手术组的(150±30)min明显缩短(P<0.01);Ligasure组术中出血量和术后7d腹腔引流液总量(100±60)ml和(420±60)ml,明显少于传统手术组(200±50)ml(P<0.01)和(700±130)ml(P<0.01)。结论:Ligasure血管闭合系统是胃癌D2根治手木中一种安全、有效的止血微创技术,可明显缩短手术时间和减少术中出血量以及术后腹腔引流液总量。

医用生物蛋白胶对电灼伤致创伤性局灶性胰腺炎的保护作用

目的探讨医用生物蛋白胶对电灼伤致创伤性局灶性胰腺炎的影响及作用。方法清洁级SD大鼠30只,随机均分为对照组和治疗组。在使用高频电刀电凝胰腺被膜致电灼伤构建创伤性局灶性胰腺炎模型后,治疗组创面涂布生物蛋白胶,对照组则涂布生理盐水,分别在术后24 h、72 h和7 d解剖和取材,比较2组一般状况、病理改变及磷脂酶A2(PLA2)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、自噬相关蛋白及其调控因子表达情况等。结果治疗组术后24 h和7 d的腹水量少于对照组(P<0.05)。大体观察治疗组胰腺周围组织的充血水肿、渗出、脂肪坏死灶及粘连程度较对照组轻。在3个时相点治疗组腹水PLA2及TNF-α水平均低于对照组(P<0.05)。免疫组织化学染色及Western Blot检测发现:术后24 h,治疗组胰腺组织分泌型PLA2、自噬相关蛋白LC3、Beclin1及调控蛋白VMP1、PI3K、NF-κB的表达高于对照组(P<0.05);术后7 d,2组上述蛋白表达均逐渐下调,治疗组明显低于对照组(P<0.05)。结论医用生物蛋白胶对胰腺周围组织有保护作用,早期对胰腺本身保护作用不明显,仅起到隔绝创伤性局灶性胰腺炎的功能,但一定程度上促发胰腺浅层实质的自噬激活所致的病理损伤,后期对胰腺创面有修复作用。

腹腔间质瘤33例临床治疗体会

【目的】探讨腹腔间质瘤的临床、病理特点及诊断、治疗和预后。【方法】回顾性分析2006年4月至2008年8月收治的33例腹腔间质瘤患者的临床和病理资料。【结果】手术切除率93．9％（31／33），17例行淋巴结清扫，1例见淋巴结转移。瘤体直径为1．5～25．0cm，良性11例，交界性4例，恶性18例。CD117（＋）93．8％，CD34（＋）76．4％，Vimentin（＋）65．3％，SMA（＋）45．8％，S-100（＋）19．7％，Nestin（＋）11．2％，CD117和CD34共同阳性率为56．2％。极低度危险性7例，低度危险性6例，中度危险性14例，高度危险性5例。术后随访率90．9％（30／33），随访6～28个月，12例良性或交界性间质瘤患者无复发和转移，13例恶性患者未进一步行任何治疗，5例高度危险性间质瘤均定期复查：1例坚持服用格列卫，未见复发或转移；1例发生肝转移行射频损毁术；3例发生不同程度的肿瘤局部复发伴腹腔转移，经再次手术治疗或（和）口服格列卫等治疗，均存活至今。【结论】腹腔间质瘤无特殊临床表现，术前内镜、B超和cT是主要的辅助检查及鉴别方法；手术切除是间质瘤首选的治疗手段，其预后与恶性潜能分级有关。具有分子靶向治疗的格列卫表现出良好的_疗效，可用于间质瘤的辅助治疗。