滋肾通络方对胶原性关节炎小鼠Th17/Treg细胞分化及平衡的影响

目的观察滋肾通络方(ZTF)对胶原性关节炎(CIA)小鼠Th17/Treg细胞分化平衡的影响,探讨其治疗类风湿关节炎的机制。方法 DBA/1小鼠随机分为正常对照组、模型组和ZTF组(8.4 g生药·kg^(-1)),造模21 d后每日灌胃给药,连续4周。检测关节炎指数、关节病理改变、血浆IL-10和IL-17水平、外周血和脾脏Th17/Treg细胞比例、CD4^+T细胞IL-10、IL-17 mRNA水平。结果 CIA小鼠踝关节病变明显,血浆IL-17水平、外周血和脾脏Th17细胞比例、CD4^+T细胞IL-17 mRNA表达明显升高;血浆IL-10水平、外周血和脾脏Treg细胞比例、CD4^+T细胞IL-10 mRNA表达明显降低。ZTF能明显减轻CIA小鼠关节病变,降低血浆IL-17水平、外周血和脾脏Th17细胞比例、CD4^+T细胞IL-17 mRNA表达;升高血浆IL-10水平、外周血和脾脏Treg细胞比例、CD4^+T细胞IL-10 mRNA水平。结论 CIA小鼠存在Th17/Treg细胞失平衡,ZTF可调节Th17/Treg细胞比例,重构Th17/Treg细胞平衡,调节相关细胞因子释放,这可能是ZTF治疗类风湿关节炎的机制之一。

滋肾通络方功效单元对CIA小鼠CD4^+T细胞miRNAs表达的差异调控作用

目的:分析滋肾通络方(ZTF)不同功效单元调控CIA小鼠CD4^+细胞中miRNAs表达的差异。方法:建立小鼠胶原性关节炎(CIA)模型,随机分为模型组、阳性药组、滋肾养阴组、祛风除湿组、化痰祛瘀组和全方组,另取4只小鼠作正常对照组。连续给药4周,末次给药1 h后,分选脾脏CD4^+T细胞,检测miRNAs表达。结果:CIA小鼠CD4^+T细胞中出现部分miRNAs表达的上调或下调。滋肾养阴单元主要上调Let-7g-5p,下调miR-27b-3p、miR-155-5p;祛风除湿单元主要上调miR-26b-5p和miR-143-3p;化痰祛瘀单元主要上调miR-26b-5p,下调miR-27b-3p;全方组的调控作用最明显。结论:ZTF各功效单元可以靶向CD4^+T细胞中不同miRNAs,产生协同/增强/叠加效应,从而在类风湿关节炎中发挥整体调节作用。

对乙酰氨基酚调控孕烷X受体诱导肝损伤

目的探讨孕烷X受体(PXR)在对乙酰氨基酚(APAP)诱导的药物性肝损伤中的作用。方法 Hepa RG细胞经不同浓度APAP(1.85、3.70、7.40、14.8、29.6和59.2 mmol/L)处理,观察其形态改变,检测上清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,PXR的表达;瞬时转染PXR-si RNA到Hepa RG细胞,敲减PXR后通过观察上清ALT、AST水平变化,明确APAP对Hepa RG细胞毒性的变化。ICR小鼠随机分成正常对照组、APAP 150和300 mg/kg剂量组,检测APAP对血清ALT、AST水平、肝组织病理学和PXR表达的影响。采用PXR激动剂干预,观察其对APAP肝毒性的影响。结果 APAP可引起Hepa RG细胞明显的毒性反应,诱导PXR m RNA的表达;PXR敲减可减轻APAP对Hepa RG细胞的肝毒性。体内实验结果显示,APAP 300 mg/kg可明显引起小鼠肝损伤,并显著诱导PXR的表达,PXR激动剂可进一步加重APAP诱导的肝损伤。结论 PXR激活在APAP引起的DILI中起着重要的促进作用。毒性剂量下的APAP在体内外均可诱导PXR的表达,进而引起明显的肝损伤。