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固定化脂肪酶催化合成6,6’-海藻糖月桂酸酯 被引量:8
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作者 铁翠娟 寇秀芬 徐家立 《催化学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期81-84,共4页
以吸附在硅藻土上的假丝酵母 (Candidasp .16 19)脂肪酶为催化剂 ,在无溶剂体系中 ,研究了月桂酸与海藻糖的酯化反应 .结果表明 ,反应温度为 47℃ ,pH为 7 0 ,月桂酸与海藻糖的摩尔比大于 6时酯化反应的转化率较高 .在 3 2mmol(0 6 4g... 以吸附在硅藻土上的假丝酵母 (Candidasp .16 19)脂肪酶为催化剂 ,在无溶剂体系中 ,研究了月桂酸与海藻糖的酯化反应 .结果表明 ,反应温度为 47℃ ,pH为 7 0 ,月桂酸与海藻糖的摩尔比大于 6时酯化反应的转化率较高 .在 3 2mmol(0 6 4g)月桂酸、0 2mmol(0 0 76g ,即 5 3μl浓度为 1 43g/ml的糖溶液 )海藻糖和 2 0 0mg固定化脂肪酶 (10 0 0U)组成的反应体系中 ,于 47℃振荡反应 36h ,以海藻糖月桂酸双酯计算 ,酯化程度达 95 %以上 .用有机溶剂提取的反应产物经薄层色谱提纯后进行13CNMR分析 ,结果表明 ,产物主要是 6 ,6’ 海藻糖月桂酸酯 ,其纯度为 90 %~ 95 % 展开更多
关键词 海藻糖 月桂酸 固定化脂肪酶 催化 海藻糖月桂酸酯 选择性催化 假丝酵母脂肪酶 生物催化剂 非离子型表面活性剂
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修饰SOD及未修饰SOD的稳定性比较研究 被引量:6
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作者 铁翠娟 张怀 +1 位作者 张博润 王少华 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期96-98,共3页
测定了分子修饰SOD的酶活力及其在不同温度下的稳定性,与未修饰的SOD进行了比较,对在不同温度下测定的结果进行数据处理,经推算得出分子修饰SOD在25℃条件下,保存95%的酶活力达3.5年,保存90%的酶活力达7.2... 测定了分子修饰SOD的酶活力及其在不同温度下的稳定性,与未修饰的SOD进行了比较,对在不同温度下测定的结果进行数据处理,经推算得出分子修饰SOD在25℃条件下,保存95%的酶活力达3.5年,保存90%的酶活力达7.2年,未修饰SOD在25℃条件下,保存95%的酶活力为103d,保存90%的酶活力为213d。 展开更多
关键词 SOD 分子修饰SOD 稳定性
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酵母菌絮凝的分型及其生理生化特性的研究 被引量:15
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作者 张博润 陈蔚 +2 位作者 铁翠娟 何秀萍 谭华荣 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期527-532,共6页
通过对410 余株酵母菌进行絮凝测定,从中筛选到5 株强絮凝菌。依据不同糖对其絮凝水平的抑制,将5 株强絮凝菌分为Flo 1 型和NewFlo 型。对这两种絮凝型菌株的相关生理生化特性进行了研究。结果表明,Flo 1 型菌絮... 通过对410 余株酵母菌进行絮凝测定,从中筛选到5 株强絮凝菌。依据不同糖对其絮凝水平的抑制,将5 株强絮凝菌分为Flo 1 型和NewFlo 型。对这两种絮凝型菌株的相关生理生化特性进行了研究。结果表明,Flo 1 型菌絮凝只受甘露糖抑制,它对高温(70 ℃) 、蛋白酶E、胰蛋白酶敏感,而对蛋白酶K、糜蛋白酶、Ca2 + 、pH 有一定耐受性。NewFlo 型菌絮凝受甘露糖等多种糖抑制,它对高温(70 ℃) 、各种蛋白酶、Ca2 + 、pH 均较敏感。这两种类型菌株絮凝的最适Ca2 + 浓度为10m mol/L~1 mol/L,最适pH 为30 ~45 。 展开更多
关键词 酵母菌 絮凝 分型 生理生化特性 发酵工业
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麦角固醇高产菌株的构建及其培养优化条件的研究 被引量:23
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作者 张博润 何秀萍 +1 位作者 铁翠娟 刘玉方 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期46-51,共6页
通过初筛、单倍体分离、诱变及酵母菌种间原生质体融合技术构建了2株麦角固醇产量明显提高的优良菌株YEF21和YEF29。并对YEF21的培养优化条件进行了研究。结果表明在优化的实验条件下YEF21的生物量及麦角... 通过初筛、单倍体分离、诱变及酵母菌种间原生质体融合技术构建了2株麦角固醇产量明显提高的优良菌株YEF21和YEF29。并对YEF21的培养优化条件进行了研究。结果表明在优化的实验条件下YEF21的生物量及麦角固醇含量的综合值分别为原始亲株YE227和YE180的154和155倍。经遗传稳定性分析,没有发现标记基因的分离现象,从而证明获得的融合菌株是遗传稳定的,是具有一定实际应用价值的麦角固醇高产菌株。 展开更多
关键词 酵母菌 原生质体融合 麦角固醇 生物量
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枯草芽孢杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因在啤酒酵母工业菌株中的表达 被引量:17
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作者 郭文洁 何秀萍 +1 位作者 铁翠娟 张博润 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期105-108,共4页
Yeast YIp\|type expression recombinant plasmid(pCMA2\|1) was constructed. The expression of α\|acetolactate decarboxylase gene from \%Bacillus subtilis\% was controled by \%CUP1\% promoter and its own terminator. The... Yeast YIp\|type expression recombinant plasmid(pCMA2\|1) was constructed. The expression of α\|acetolactate decarboxylase gene from \%Bacillus subtilis\% was controled by \%CUP1\% promoter and its own terminator. The recombinant plasmid pCMA2\|1 was introduced into the brewer’s yeast PJ3\|5. Transformants were selected using copper resistance as selected marker. The results of activity assay showed that PJ3\|5 didn’t produce α\|acetolactate decarboxylase(ALDC), where as the activity of α\|ALDC in transformants were induced by copper sulfate. The laboratory scale fermentation test confirmed that the total diacetyl concentration was reduced effectively by α\|ALDC in transformant. 展开更多
关键词 Α-乙酰乳酸脱羧酶 基因表达 啤酒酵母 工业菌株 表达
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絮凝基因的克隆和在工业啤酒酵母菌株中表达 被引量:18
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作者 郭文洁 何秀萍 +4 位作者 铁翠娟 张博润 张沛 梁刚 潘学启 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期110-113,共4页
The partial genomic library of Saccharomyce cerevisiae FL189 possessing strong flocculation ability was constructed using Yeast-E.coli shuttle plasmid YCp50 as vector.Recombinant plasmid containing flocculation gene w... The partial genomic library of Saccharomyce cerevisiae FL189 possessing strong flocculation ability was constructed using Yeast-E.coli shuttle plasmid YCp50 as vector.Recombinant plasmid containing flocculation gene was obtained by screening the growth of transformants on the selective medium and measurement flocculation,designated as pCF1.pCF1 was introduced into industrial yeast strain PJ208-5-15.Six transformants PJ208-5-15-1(pCF1)~PJ208-5-15-6(pCF1)possessing strong flocculation ability were obtained.The results of Southern blot and restriction endonuclease analysis showed that the insert is about 4.3kb and could hybridize with the probe (2.6kb EcoRV fragment of FLO1).Flocculation ability assay indicated that the transformants possess strong flocculation ability.Hence,the gene controlling flocculation phenotype exists in the cloned DNA fragment.The restriction endonuclease analysis and the sequence analysis of the insert DNA fragment are in progress. 展开更多
关键词 啤酒酵母 絮凝基因 克降一表达
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低双乙酰啤酒酵母工程菌的构建 被引量:11
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作者 李艳 铁翠娟 +2 位作者 王正祥 张博润 诸葛健 《酿酒》 CAS 北大核心 2002年第6期77-79,共3页
利用PCR技术以啤酒酵母QY的染色体为模板扩增出含有乙酰羟酸合成酶 (AHAS)基因ILV2的片段 ,将ILV2基因的内部EcoRI片段连接到整合载体YIp5上 ,并在该载体的BamHI -SalI位点插入铜抗性基因CUP1-MT1,构建了YIpCE质粒 ,将其转化啤酒酵母QY ... 利用PCR技术以啤酒酵母QY的染色体为模板扩增出含有乙酰羟酸合成酶 (AHAS)基因ILV2的片段 ,将ILV2基因的内部EcoRI片段连接到整合载体YIp5上 ,并在该载体的BamHI -SalI位点插入铜抗性基因CUP1-MT1,构建了YIpCE质粒 ,将其转化啤酒酵母QY ,所得到的转化子AHAS酶的活力比受体菌QY降低75 %左右 ,在发酵测试中 ,转化了产生双乙酰的量比原始菌株降低 30 %。 展开更多
关键词 低双乙酰 构建 啤酒酵母 乙酰羰酸合成酶 基因破坏 基因工程技术
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光滑球拟酵母金属硫蛋白基因的亚克隆和表达研究
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作者 张博润 蔡向荣 +1 位作者 何秀萍 铁翠娟 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期159-162,共4页
用BamHI和PstI双酶切质粒pMTIIa-91s,获得光滑球拟酵母金属硫蛋白基因(MTIIa)片段,将其亚克隆到M13载体,扩增并回收MTIIa基因片段,经Southern杂交验证插入片段正确后,分别将MTIIa基因片段插入到大肠杆菌表达载体pBV220和大肠杆... 用BamHI和PstI双酶切质粒pMTIIa-91s,获得光滑球拟酵母金属硫蛋白基因(MTIIa)片段,将其亚克隆到M13载体,扩增并回收MTIIa基因片段,经Southern杂交验证插入片段正确后,分别将MTIIa基因片段插入到大肠杆菌表达载体pBV220和大肠杆菌一酵母菌穿梭载体YIp352中,转化大肠杆菌DH5a,使其对CUSO4的抗性提高0.7mol/L左右;转化酿酒酵母受体菌YS59,使YS59对CUSO4的抗性提高1.5mol/L左右。结果证明光滑球拟酵母MTIIa基因在大肠杆菌和酿酒酵母中都获得高效表达。 展开更多
关键词 光滑球拟酵母 金属硫蛋白基因 克隆和表达
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枯草芽孢杆菌α-乙酰乳酸脱羧酶基因的克隆及表达 被引量:6
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作者 高健 铁翠娟 +3 位作者 王忠彦 何秀萍 胡永松 张博润 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期336-339,共4页
利用鸟枪法构建了供体菌的基因组文库,通过VP反应显色法进行筛选,从约7000个转化子中选出携带ALDC基因的重组质粒(pBG4~pBG5).绘制了pBG4插入片段的限制酶图谱.Southern杂交证明该外源片段来源于供体菌。酶活性测定结果表明ALDC... 利用鸟枪法构建了供体菌的基因组文库,通过VP反应显色法进行筛选,从约7000个转化子中选出携带ALDC基因的重组质粒(pBG4~pBG5).绘制了pBG4插入片段的限制酶图谱.Southern杂交证明该外源片段来源于供体菌。酶活性测定结果表明ALDC基因在大肠杆菌中获得了表达,为构建带有ALDC的啤酒酵母工程菌奠定了基础. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 ALDC基因 克隆 表达
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