胆固醇氧化酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

采用PCR方法从来源于蒙古野驴的马红球菌(Rhodococcus equi)4-2G2菌株中分离出编码胆固醇氧化酶的新基因(choEW),其与已知的胆固醇氧化酶基因choE和choB同源性均达99％;按其推断的氨基酸序列与choE和choB相比在485位缺少一个氨基酸,分析认为choEW与choB和choE属于同一基因家族。将choEW插入到原核表达载体pET-His中,构建出重组质粒pETW,并转化Escherichia coli BL21(DE3)plysS获得工程菌。经IPTG诱导后表达出分子量约为56 kD的蛋白质,与核苷酸序列推断的蛋白大小相符。目的蛋白表达量约占细胞总蛋白的11.9％。

重视实验准备 提高实验教学质量

优质的实验准备是保证病原生物实验教学质量的关键。强化专业知识水平,认真负责、合理规划,踏实工作是做好实验准备的基本前提。学生参与实验准备是提高实验教学效果的有效途径。任课教师共同参与预实验是做好实验准备、提高教学质量的保障。教师、学生和实验员共同参与,充分重视实验准备环节,有效提高实验教学质量。

高职高专生物化学精品课程建设的实践与思考

课程建设是专业建设的基础,是实现教学目标的根本保障,是教学基本建设的主要任务之一。学校的生存与发展取决于人才培养质量,人才培养质量的高低很大程度上取决于课程建设水平的高低。自开展生物化学精品课程建设以来,通过优化教学内容,改革教学方式、方法,建立全新的教材体系,设置有效教学质量监控等途径,实施"必需、够用"战略,突出"产、学、研"结合特色,倡导"主动学习"理念。使教材"立体化",师资队伍综合素质全面提升,教学模式得到创新,教学方法形式多样,教学效果显著提高。

医学微生物学电子图片库的构建与应用探讨

根据医学微生物学课程形态学特点,通过多种途径,利用多种方法构建适合医学微生物学教学的电子图片库。将电子图片库应用于医学微生物学课堂教学和精品课程网站建设,通过教学资源共享,优化教学过程,激发学生的创造性思维,提高医学微生物学的教学质量和教学效率。

以人为本 倡导实验室服务式管理

高校实验室管理模式直接影响到实验室建设与学校整体发展。服务式管理模式是以人为本,以满足服务对象客观行为需求及潜在心理需求为出发点的管理模式。文章分别从实验环境营造、实验室信息化建设、实验队伍建设、实验室协同管理等四个方面来探讨高校实验室服务式管理模式。

基础医学实验多元学习评价体系的构建与实施

实验教学是高职高专院校培养应用型人才的重要环节。医学免疫学与病原生物学实验多元学习评价体系的实施,对提高实验教学效果,培养高端技能型专门人才具有重要意义。

再生丝素蛋白甲酸溶液静电纺丝影响因素的研究

静电纺丝是一种简单而有效地获得纳米纤维的方法。以98%甲酸为溶剂,分别溶解再生丝素蛋白室温干燥膜和烘干膜进行静电纺丝技术,根据静电纺丝原理,研究了不同再生丝素蛋白干燥膜、溶质质量分数、静电纺丝电压以及混纺壳聚糖-丝素蛋白等因素对纳米纤维形态的影响。结果表明:再生丝素蛋白室温干燥膜较烘干膜可纺性高,电纺液质量分数和电压与纤维形貌具有高度相关性,是影响丝素静电纺丝的两个主要因素。壳聚糖的加入可改善低浓度纯丝素溶液静电纺丝纳米纤维的形貌结构。

人骨髓间充质干细胞与血管内皮细胞的基因表达差异分析

目的探索人骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞分化的分子生物学机制及调控靶标。方法应用基因表达谱芯片技术,检测人骨髓间充质干细胞和脐静脉内皮细胞的基因表达差异。结果在检测的3946条基因中,人骨髓间充质干细胞和血管内皮细胞非差异表达基因占84%。差异表达基因中,间充质干细胞高表达283条,低表达344条。这些基因可以划分为5个主要的功能群:①细胞骨架和运动蛋白基因;②细胞受体相关基因;③细胞信号和传递蛋白相关基因;④发育相关基因;⑤蛋白翻译、合成相关基因。结论人骨髓间充质干细胞有潜在的内皮分化能力,分化机制和分化调控与以上五类特异基因的表达有关。

案例式立体教学法在医学免疫学与病原生物学课程教学中的应用

探讨案例立体教学法(CTTM)在医学免疫学与病原生物学课程教学中的应用及效果。在《医学免疫学与病原生物学》教学中,选择同一年级临床医学1401-04及1405-1408两个教学班级,分别为试验组和对照组,试验组采用CTTM教学法,对照组采用传统教学法。比较两组学生期末考试成绩的差异。结果表明,试验组学生期末考试成绩优于对照组,两组比较,差异具有统计学意义(p<0.05)。CTTM教学法,将实际临床问题引入课堂,使教学过程更加生动有趣,学生学到了实际临床应用中所需的知识和技能,实现我校培养应用型人才的宗旨。

纤维型肌动蛋白对间充质干细胞衰老的调节作用及其机制

目的:探讨纤维型肌动蛋白(F-actin)调节人骨髓来源间充质干细胞(hBMSCs)衰老的作用,初步阐明hBMSCs衰老的分子生物学机制。方法:将分离得到的hBMSCs进行体外培养并分为对照组(P2代hBMSCs)、F-actin抑制剂组(2.5μmol·L^(-1) F-actin抑制剂Latrunculin B处理P2代hBMSCs 1h)和P11代hBMSCs组(P2代hBMSCs连续传代得到P11代hBMSCs)。成骨、成脂和成软骨诱导液诱导各组hBMSCs,采用茜素红染色、SO染色和油红O染色确定诱导效果。免疫荧光染色观察各组hBMSCs中Ki67阳性细胞数、F-actin的形态和聚合情况、YAP在细胞内的亚细胞定位。SA-β-Gal染色检测各组hBMSCs中SA-β-Gal染色阳性细胞数。结果:茜素红染色、SO染色和油红O染色,hBMSCs具有成骨、成脂和成软骨分化的能力。免疫荧光染色和SA-β-Gal染色,对照组hBMSCs中的微丝纤维束较多较粗,F-actin长度较长,YAP主要集中在细胞核(YAP在细胞核内为活化态);与对照组比较,P11代hBMSCs组中Ki67阳性细胞数较少,SA-β-Gal阳性细胞较多,F-actin更短更细,YAP主要集中在胞浆,且YAP出核的细胞SA-β-Gal染色呈阳性;F-actin抑制剂组hBMSCs中YAP出核失活,SA-β-Gal染色阳性的hBMSCs衰老细胞更多。结论:抑制YAP入核可以促进hBMSCs衰老,F-actin可以通过调节YAP活性影响hBMSCs衰老。

芬戈莫德对神经干细胞和星形胶质细胞增殖及迁移的影响及其对小鼠脊髓损伤的保护机制

目的:探讨芬戈莫德(FTY720)对神经干细胞(NSCs)和星形胶质细胞迁移及增殖的影响,阐明FTY720对小鼠脊髓损伤(SCI)的保护作用及其机制。方法:体外培养NSCs和星形胶质细胞,每种细胞随机分为对照组(采用PBS进行处理)和实验组(采用0.1μmol·L^(-1) FTY720进行处理)。SCI小鼠随机分为对照组(口服PBS)和实验组(口服1mg·kg^(-1)·d^(-1) FTY720),每组10只。采用Transwell实验检测2组NSCs和星形胶质细胞的迁移细胞数,免疫荧光染色检测NSCs的迁移细胞数和增殖神经球数,HE染色检测2组小鼠SCI空洞面积,Basso Mouse Scale (BMS)评分评估小鼠运动能力恢复情况。结果:Transwell检测,与对照组比较,实验组NSCs迁移细胞数增多(P<0.05),星形胶质细胞迁移细胞数减少(P<0.05)。免疫荧光检测,与对照组比较,实验组NSCs增殖神经球数增多(P<0.05),实验组小鼠SCI震中星形胶质细胞数减少(P<0.05)。HE染色检测,与对照组比较,SCI空洞面积缩小(P<0.05)。BMS评分,与对照组比较,实验组小鼠BMS评分升高(P<0.05)。结论:FTY720可以促进NSCs增殖和迁移,抑制星形胶质细胞迁移,减少SCI后胶质疤痕形成,促进小鼠运动功能恢复。

葛根素对大鼠肾小球系膜细胞体外增殖抑制作用及其机制

目的探讨不同浓度葛根素对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响及其作用机制。方法采用体外细胞培养技术,采用MTT检测不同浓度葛根素对大鼠肾小球系膜细胞增殖的量效和时效关系。分别采用RT-PCR和ELISA,检测不同浓度葛根素作用大鼠肾小球系膜细胞后,结缔组织生长因子mRNA和蛋白表达水平的变化。结果葛根素可抑制大鼠GMCs增殖(P<0.05),该增殖抑制作用呈浓度依赖模式。不同浓度葛根素作用于大鼠GMCs后,结缔组织生长因子mRNA和蛋白表达水平均随药物浓度增加而逐渐减弱(P<0.05)。结论葛根素对大鼠肾小球系膜细胞增殖有明显的抑制作用,其作用机制可能与下调结缔组织生长因子基因转录和表达水平有关。

甲型肝炎病毒与过敏性哮喘的互作关系

为研究哮喘的易感基因,科学家们发现了一个新的基因家族--Tim基因家族,而生物信息学研究发现人Tin1就是人甲型肝炎病毒细胞受体（huHAVcr-1）,另外,流行病学调查结果显示甲型肝炎病毒（HAV）感染下降与哮喘发病上升这一反转现象.此文就HAV感染对哮喘的影响,以及HAV-Tim1途径对T细胞分化的作用等方面研究进展进行综述.