进口对虾急性肝胰腺坏死病病原分离鉴定及环介导等温扩增(LAMP)检测方法的建立

该研究抽取了453批在2017~2018年自越南、泰国、马来西亚进境的对虾样品进行对虾急性肝胰腺坏死病(Acute Hepatopancreatic Necrosis Disease,AHPND)病原的分离鉴定,并对结果进行分析。结果显示:直接取对虾肝胰腺组织进行病原分离检出率只有2.87%,而肝胰腺组织经过富集培养后,检出率则达到16.11%;来自越南进境的对虾样品阳性检出率最高,312批次的样品阳性检出率为21.79%,分离出11株阳性菌株,分离成功率为15.07%。为了快速、灵敏和可靠的鉴定AHPND病原,该研究建立了一种快速检测AHPND病原的环介导等温扩增(LAMP)方法。结果表明:仅AHPND病原具有明显的扩增曲线和颜色变化,质粒的检测低限为1 fg/μL,比普通PCR方法高100倍,且稳定性强;对37个实际样本检测显示,阳性率为35.13%,阳性检出率高于普通PCR检测结果。该研究建立的LAMP快速检测方法适用于AHPND病原特异性检测,病原的分离鉴定分析也可为进口对虾的实验室检测提供参考数据。