多重PCR方法检测多耐药鲍曼不动杆菌基因型

目的建立一种适于临床微生物实验室快速检测多耐药鲍曼不动杆菌基因的多重PCR方法。方法筛选临床分离鉴定的多耐药鲍曼不动杆菌105株;用热煮沸法提取DNA,采用多重PCR技术,优化反应条件,同时扩增OXA酶基因(blaOXA-23-like,blaOXA-24-like,blaOXA-51-like,blaOXA-58-like)和整合酶基因(intI1,intI2),扩增产物经凝胶成像系统分析。结果105株多耐药鲍曼不动杆菌中,76株是blaOXA-51-like+blaOXA-23-like+intI1基因型,18株是blaOXA-51-like+intI1基因型,10株是blaOXA-51-like+blaOXA-23-like基因型,1株是blaOXA-51-like+blaOXA-23-like+blaOXA-58-like基因型。未检测出携带有blaOXA-24-like和intI2基因的菌株。结论多耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及流行趋势与其携带的OXA酶基因和整合酶基因相关。

多重耐药鲍曼不动杆菌AbaR型耐药岛的多样性

Foumier等对鲍曼不动杆菌（Acineto bacterbaumannii，AB）耐药株AYE和敏感株SDF的全基因组序列进行比较分析后，发现在多重耐药鲍曼不动杆菌（multidrug resistance A．baumannii，MDRAB）菌株AYE中，有大小为86kb的耐药岛，

多重PCR检测临床分离金黄色葡萄球菌lukS/F-PV和mecA基因

目的建立一种新的多重PCR方法,检测临床分离金葡菌的杀白细胞素毒力基因(lukS/F-PV)和甲氧西林耐药基因(mecA)。方法收集我院2006年1—12月从临床多种标本中分离鉴定的不重复金葡菌,应用多重PCR技术,优化反应条件,同时扩增葡萄球菌属特异性基因16S rRNA、金葡菌种特异性基因nuc、lukS/F-PV基因和mecA基因,扩增产物经凝胶成像系统分析。结果217株金葡菌经多重PCR检测,31株是16S rRNA+nuc+lukS/F-PV+mecA基因型,3株是16SrRNA+nuc+lukS/F-PV基因型,135株是16S rRNA+nuc+mecA基因型,40株是16S rRNA+nuc基因型,其中5株仅扩增出16S rRNA基因,3株仅扩增出nuc基因。lukS/F-PV基因和mecA基因测序显示与GenBank中的已有序列具有高度同源性,其阳性率分别为15.7%(34/217)和76.5%(166/217);34株lukS/F-PV基因阳性的分离株中,31株为MRSA,占91.2%(31/34)。结论本方法适用于快速检测和鉴定产杀白细胞素MRSA,lukS/F-PV基因阳性的菌株以MRSA为主,应加强监控。

大肠杆菌O157胶体金免疫层析快速筛查方法的建立

目的建立一种大肠杆菌O157的胶体金免疫层析快速筛查方法。方法利用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心法检测大肠杆菌O157,对该法进行敏感性、特异性和食品样品的适用性分析。结果该法能在15分钟内完成检测,检测不同的肠杆菌科细菌(非O157型大肠杆菌、沙门菌、志贺菌、变形杆菌、柠檬酸杆菌、肠杆菌、沙雷菌、耶尔森菌)、葡萄球菌、李斯特菌、气单胞菌、弧菌等共24种30株常见细菌,未发现有交叉反应,显示该法特异性良好。检测大肠杆菌O157的最低检出浓度为1×105cfu/ml。方法适用于奶粉、面粉、淀粉、咖啡粉、饼干、蛋糕、果冻、燕窝和果汁等食品样品的检测。结论新建立的大肠杆菌O157胶体金免疫层析试验简便、快速,特异性和灵敏度较好,适用于现场样品的快速筛查。

检测多药耐药鲍氏不动杆菌的碳青酶烯酶及整合酶基因

目的检测多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRAba)的碳青酶烯酶及整合酶基因。方法从70株对耐亚胺培南鲍氏不动杆菌中用PCR方法测定碳青酶烯酶OXA23类、OXA24类、OXA51类和OXA58类基因及Ⅰ类和Ⅱ类整合酶基因,对扩增阳性的碳青酶烯酶基因进行测序分析;抗菌药物敏感试验采用琼脂稀释法。结果获得OXA-23类基因阳性56株,占80.0%,OXA-58类基因阳性1株,仅1株菌OXA51类基因阴性;Ⅰ类整合酶基因阳性61株,占87.1%,未测得OXA24类碳青酶烯酶和Ⅱ类整合酶基因;序列分析提示分离的CRAba为OXA-23型和OXA-58型,所测菌株对环丙沙星、头孢他啶、庆大霉素、哌拉西林/他唑巴坦高度耐药,对多黏菌素B一致性敏感。结论新近出现的CRAba菌株主要是以Ⅰ类整合子携带的OXA-23型碳青酶烯酶。

基于一维CCD的免疫层析试纸条检测系统

本文报道的基于一维CCD的免疫层析试纸条检测系统是一种以上转换磷光材料（UCP）作为标记物的生物传感器。该系统通过检测生物反应后试纸条上UCP颗粒的含量，计算出被测样品中特定生物分子的浓度，可以实现对多种病原体的快速定性与定量检测。本检测系统对0—60ns／ml系列标准样品的检测结果具有很好的线性响应特性，且与扫描型检测系统的检测结果十分接近。

胶体金免疫层析法快速检测鼠疫耶尔森菌F1抗体

目的建立检测鼠疫耶尔森菌F1抗体的胶体金标记免疫层析方法。方法胶体金标记纯化鼠疫F1抗原,双抗原夹心法原理制成免疫层析检测试纸条,并对兔、羊、人和黄鼠血清进行检测评价。结果用80份不同动物种属的阴性血清进行检测,未出现非特异性反应,对5份恢复期病人血清、13份免疫兔血清和2份免疫羊血清检测也取得阳性结果,对于8份I HA临界阳性(滴度1∶20)的达乌尔黄鼠血清检出阳性6份。结论建立了可以用于现场快速检测鼠疫F1抗体的胶体金免疫层析方法。

高龄住院患者鲍曼不动杆菌多重耐药相关基因的监测

目的了解老年病区鲍曼不动杆菌临床分离株携带多重耐药相关基因的情况,为耐药性监测及感染控制提供依据。方法筛选解放军总医院2008-2010年自临床分离的120株不重复鲍曼不动杆菌,患者平均年龄85(65～95)岁。使用Whonet 5.6软件分析其对16种抗菌药物的耐药率;应用聚合酶链反应及测序方法检测10种耐药相关基因(blaOXA-51-like、blaOXA-23-like、blaOXA-24-like、blaOXA-58-like、blaTEM、blaampC、armA、ISAba1、intI1和intI2),依据耐药基因的检出情况,分析并命名相应的耐药基因谱(RGP)。结果上述120株鲍曼不动杆菌除了对多黏菌素B的敏感率超过90%以外,对其他15种抗生素均具有较高的耐药率(70.8%～97.5%);耐药相关基因blaOXA-51-like、blaOXA-23-like、blaOXA-58-like、blaTEM、blaampC、armA、ISAba1和intI1的阳性率分别为100%、81.7%、0.8%、10.8%、91.7%、81.7%、86.7%和83.3%,未检出blaOXA-24-like和intI2;共发现18种耐药基因谱,其中多重耐药谱RGP1(blaOXA-23-like+blaampC+armA+ISAba1+intI 1)所占的比例高达60.8%。结论老年住院患者中分离的鲍曼不动杆菌多重耐药相关基因携带率较高,多重耐药现象非常严重;应积极、有效、合理地防控和治疗老年住院患者鲍曼不动杆菌感染,医院感染管理专职人员与临床医师对此应予以高度重视。

免疫渗滤与胶体金快速检测在筛查甲型流感中诊断效率分析

目的评价胶体金和免疫渗滤法在筛查临床甲型流感病毒感染中的诊断效率。方法收集2009.6～2009.10我院发热门诊流感样病例咽拭子标本297例,分别用免疫渗滤法和胶体金法进行快速检测,同时采用实时荧光定量PCR和测序进行验证,以评价两种方法的诊断效率。结果在实时荧光定量PCR法及测序证实为甲型流感166份,其中免疫渗滤法灵敏度为54.82%(91/166),与PCR法符合率为66.67%,Kappa值为0.35;胶体金法灵敏度为4.22%(7/166),符合率为45.79%,Kappa值为0.02;在131份甲型流感病毒阴性的标本中,免疫渗滤法特异性为81.68%(107/131),胶体金法特异性为98.47%(129/131);在实时荧光定量PCR检测为甲型H1N1阳性的99份标本中,免疫渗滤法检出率为67.3%,胶体金检出率为5.1%;在两种方法结果不符合108份标本中,免疫渗滤法阳性而胶体金阴性的标本107份,实时荧光定量PCR法并序列测定显示其中84份为甲型流感病毒阳性,23份为阴性;免疫渗滤法阴性而胶体金阳性的1份标本,甲型流感病毒实时荧光PCR检测为阴性。免疫渗滤法在甲型流感病毒的检出率和与PCR方法的符合率方面明显高于胶体金法(P<0.05)。结论免疫渗滤法在甲型流感病毒筛查中优于胶体金法,显示出良好的临床应用前景。

上转磷光免疫层析检测肠出血性大肠杆菌O157

目的建立一种肠出血性大肠杆菌O157的上转磷光免疫层析快速检测方法。方法利用上转换磷光标记和双抗体夹心免疫层析技术检测大肠杆菌O157,评价了该法的敏感性和特异性,并用于模拟污染食品样品的检测。结果该法能在40min内完成检测,应用于不同的肠杆菌科细菌如其他大肠杆菌、沙门菌、志贺菌、变形杆菌、产气肠杆菌、枸橼酸杆菌、沙雷菌、耶尔森菌以及葡萄球菌、副溶血弧菌、单增李斯特菌等23种28株常见细菌,未发现有交叉反应,检测灵敏度为5×103CFU/ml,每次最低可检测500个细菌,对奶粉、咖啡粉、饼干、蛋糕、绿豆糕、果冻、燕窝、果汁等样品中的人工染菌均可检测,最低检测浓度为5×103CFU/ml。结论肠出血性大肠杆菌O157上转磷光免疫层析方法简便快速,特异性和灵敏性好,适用于现场的快速检测。

人工关节置换术后感染患者病原菌分布及耐药性分析

目的研究人工关节置换术后感染患者病原菌分布及其耐药情况,为临床合理选择抗菌药物提供依据。方法对我院2010年人工关节置换术后感染患者80株病原菌采用常规方法进行鉴定,除万古霉素药敏试验采用E-TEST外,其他药敏试验采用K-B法。结果感染比例最高病原菌为凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)(38.75%),其次为金黄色葡萄球菌(18.75%)。青霉素、红霉素和头孢西丁对CNS耐药率分别为77.42%、74.19%和54.84%,对金黄色葡萄球耐药率分别为100%、73.33%和33.33%;万古霉素和力奈唑烷对CNS和金黄色葡萄球菌敏感率都为100%。结论人工关节置换术后感染前两位病原菌分别是CNS和金黄色葡萄球菌,两者对青霉素类和大环内酯类药物有很高的耐药率,但未检测出对万古霉素和力奈唑烷耐药的菌株。

新型冠状病毒肺炎诱发的老年多器官功能障碍综合征诊疗专家建议(试行第1版)

2019年12月以来,新型冠状病毒肺炎(novel coronavirus pneumonia,NCP)疫情在我国及境外迅速蔓延。通过采取一系列防控救治措施,我国疫情态势得到一定程度的遏制,但国外发病人数仍呈上升趋势。国家卫生健康委员会将NCP纳入法定传染病乙类管理,但采取甲类传染病的预防、控制措施,同时将该病纳入国境卫生检疫法规定的检疫传染病管理,并将其英文名称修订为“COVID-19”[1]。研究显示,该病人群普遍易感,多数患者预后良好,但老年人和有慢性基础疾病者预后差。

基于信息化的多重耐药菌感染防控管理与效果分析

目的:探讨信息化在多重耐药菌(MDROs)感染防控管理中的应用和管理效果。方法:自2022年1月开始实施基于信息化的多学科协作耐药菌防控新模式,对住院患者中检出的3类(耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌、耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)MDROs进行信息化实时监测和干预防控,并分析MDROs防控措施执行率、MDROs检出率的变化。结果:与2021年对照组相比,2022年干预组隔离医嘱下达率由45.0%提高至87.5%(P<0.001),转科告知填写率提升5.1倍(P<0.001),医务人员手卫生依从性、环境清洁合格率、特殊类抗菌药物使用前送检率均有显著提高(P<0.001)。CRE、CRAB和MRSA新发感染率由对照组的0.4%下降至干预组的0.3%,千日感染率由0.7‰下降至0.4‰(P<0.001)。结论:基于信息化的耐药菌防控新模式的实施,提高了医务人员MDROs防控措施的执行力,并有效降低了MDROs的新发感染,值得推广应用。

Linux在建设校园网中的应用

随着教育信息化建设速度的加快，如何充分地加以利用成了很多学校面临的问题。我校使用linux（Redhat AS4）操作系统来建设和维护校园网的运行，在充分利用Linux下的免费开源软件的基础上，建立了许多校园网的应用服务。

血液病患者鲍曼不动杆菌的耐药性分析及其耐药基因检测

目的了解血液病患者临床分离鲍曼不动杆菌的耐药表型和多种耐药基因的携带情况。方法收集2011年临床分离的非重复鲍曼不动杆菌120株,采用纸片扩散法进行药敏试验,试验结果按照CLSI 2011年版标准判读,采用WHONET 5.6软件进行数据分析;应用聚合酶链反应及测序方法检测10种耐药相关基因（blaOXA-51-like、blaOXA-23-like、blaOXA-24-like、blaOXA-58-like、blaTEM、blaampC、armA、ISAba1、intI 1和intI 2）。结果鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的耐药率范围为48.3%~94.2%,对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为51.7%和48.3%;耐药相关基因blaOXA-51-like、blaOXA-23-like、blaTEM、blaampC、armA、ISAba1和intI 1的阳性率分别为100%、60.0%、46.7%、85.8%、75.8%、86.7%和85.0%,而未检出blaOXA-24-like、blaOXA-58-like和intI 2。结论碳青霉烯类抗菌药物对鲍曼不动杆菌仍具有较好的体外抗菌活性,鲍曼不动杆菌多重耐药相关基因的携带率较高,多重耐药现象非常严重,应加强其耐药性监测,合理使用抗菌药物。

新型冠状病毒肺炎患者医院病案资料消毒防控的探讨

新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)疫情来势凶猛,传播性强,这是自18年前的SARS以来我国遭受的又一次大的瘟疫,严重影响人民的身体健康,各行各业都将面临新的困难和挑战,因此对于医院病案资料防控工作提出新的要求。本文将从病案管理人员和病案消毒防控两个方面进行探讨,为同行病案管理工作的开展提供参考。

基于开源软件实现校园内网安全对外

从国情出发,我国的学校在进行网络和信息化建设过程中,必须要考虑怎样用较少的投入,创造最大的价值。针对目前有些学校的网络还不能很好地随时随地对外服务于师生的情况,笔者根据工作实践寻找到一种基于开源免费软件解决校园网安全对外的低成本解决方案,希望能为中小学的网络建设和应用提供借鉴。

Linux环境下校园网完全开放FTP服务的搭建与管理

当前，我国中小学校园网软件建设远远落后于硬件建设。有些学校校园网的基础应用都没能得到实现，如最常见的文件传输服务。教师在校园网内依旧频繁地使用U盘设备进行文件传输，或者通过传统的“网上邻居”文件夹共享的方式来传输文件。这些做法不但效率低，而且往往是危害网络安全的罪魁祸首。本文介绍了我校的FTP服务应用，即“完全开放FTP服务”的搭建与管理，希望能起到抛砖引玉的作用。

多Vlan环境Linux代理接入Internet的低成本解决方案

怎样用低成本来建设高质量的中小学校园网络是我国中小学教育信息化推进过程中必须要解决的问题。笔者根据多年实践经验阐述了如何用较少的投入解决多Vlan环境下中小学校园网接人Internet这个普遍的问题。

临床常见肠杆菌科细菌对替加环素耐药机制研究进展

多耐药或碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌(CRE)的临床分离株呈现出逐年递增趋势,给临床抗菌药物的选用提出了严峻的挑战。随着大多数临床常用抗菌药物敏感性下降,替加环素在治疗多耐药肠杆菌科细菌感染疾病中发挥了至关重要的作用,并被临床当作治疗耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的最后可选抗菌药物之一。但近年来,替加环素在CRE临床分离株中逐渐表现出不同程度的耐药性,相关研究揭示其耐药机制与外排泵的各种调控途径表达上调有关,甚至相关耐药基因可能由质粒介导传播。从“同一个世界,同一个健康”的角度出发,迫切需要全面阐明替加环素的多种交互耐药机制,并精准采取措施来监测和防控其耐药性的进一步传播。