FKBP38蛋白对子宫内膜癌前期病变的影响及其机制研究

目的构建子宫特异敲除FKBP38小鼠模型,探究FKBP38对于小鼠子宫内膜癌前期病变的影响及其作用机制。方法通过胚胎注射法使小鼠FKBP38基因上携带loxP位点,构建转基因小鼠模型。在此基础上,以在子宫特异表达的孕酮受体启动子Pgr-Cre小鼠介导FKBP38条件性敲除,以获得FKBP38子宫特异敲除小鼠模型Pgr-Cre;FKBP38^(fl/fl)。通过PCR及Western blot对子宫特异敲除FKBP38小鼠进行鉴定;通过苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)检测小鼠子宫敲除FKBP38后组织病理性变化;通过Western blot技术检测小鼠子宫敲除FKBP38后对mTOR通路的影响。结果小鼠子宫特异敲除FKBP38后子宫中FKBP38蛋白表达水平明显降低,与同年龄同窝小鼠相比,差异有统计学意义(P<0.01)。在己烯雌酚刺激下,小鼠18月龄时,子宫特异敲除FKBP38小鼠中16.7%(1/6)发生复杂性非典型性增生(complex atypical hyperplasia,CAH),33.3%(2/6)发生简单性增生(simple hyperplasia,SH)。此外,子宫特异敲除FKBP38小鼠子宫中AKT、S6及4E-BP-1蛋白的磷酸化水平明显升高。结论子宫特异敲除FKBP38小鼠子宫中FKBP38蛋白明显降低,表明小鼠子宫特异敲除模型构建成功。此外,子宫特异敲除FKBP38后,小鼠发生SH以及CAH,表明FKBP38可能与子宫内膜癌癌前病变相关。这可能与FKBP38调控mTOR通路关键性蛋白Akt、S6及4E-BP-1蛋白的磷酸化相关。

FKBP38蛋白对人源子宫内膜癌细胞增殖及侵袭的调控

目的探讨FK506结合蛋白38(FK506-bindingprotein 38,FKBP38)在不同分级子宫内膜癌细胞中表达水平,研究其对细胞增殖、侵袭力影响及相关机制。方法选取5种不同病理分级人源子宫内膜癌细胞,实时荧光定量PCR及Western blot技术检测FKBP38表达。将FKBP38过表达病毒转入细胞,实时荧光定量PCR及Western blot验证过表达情况;Edu染色法、平板克隆法检测细胞增殖能力;Transwell小室检测细胞迁移及侵袭能力。Western blot检测过表达FKBP38后mTOR通路变化。结果FKBP38蛋白在病理分级较高(2~3)级的子宫内膜癌细胞中表达明显降低(P<0.01)。AN3Ca细胞系中过表达FKBP38后,细胞增殖活性、迁移及侵袭的能力均明显降低(P<0.01),此外,细胞Akt蛋白磷酸化水平降低。结论FKBP38表达水平与子宫内膜癌的进展显著相关,AN3Ca细胞中过表达FKBP38可显著降低细胞增殖、迁移及侵袭能力,这可能与其下调Akt蛋白磷酸化水平有关。FKBP38在子宫内膜癌中的表达量有望成为治疗子宫内膜癌的全新手段。

FKBP38蛋白在乳腺癌中的表达研究

目的:探讨乳腺癌组织FK506结合蛋白38(FK506-binding protein 38,FKBP38)的表达水平及其与病理分级和临床分期的关系。方法:采用免疫组化检测100例正常乳腺组织、300例浸润性导管癌(Invasion ductal carcinoma,IDC)和59例浸润性小叶癌组织(Invasion lobular carcinoma,ILD)中FKBP38的表达水平,分析FKBP38蛋白表达水平与乳腺癌临床病理参数之间的关系。结果:免疫组化结果表明,与正常乳腺组织相比,FKBP38在浸润性导管癌及浸润性小叶癌组织中的表达水平均显著降低,具有统计学差异(P<0.0001)。通过进一步分析可知,在浸润性导管癌中,FKBP38蛋白表达水平随病理分级及临床分期的增加而降低,具有统计学差异,而FKBP38蛋白与孕激素受体(Progesterone receptor,PR)蛋白的表达呈负相关。此外,三阴性乳腺癌(Triple-negative breast cancer,TNBC)FKBP38的表达水平显著高于非三阴性乳腺癌,同样,FKBP38在TNBC的表达水平随原发性肿瘤分期的增加而降低。结论:FKBP38蛋白水平在乳腺癌患者中表达水平显著降低,并与乳腺癌的病理分级、临床分期相关。这提示FKBP38蛋白水平可作为乳腺癌诊断和治疗的潜在靶点,但其作用机制仍需进一步研究。