复方胶原蛋白肽粉对皮肤慢性紫外线损伤小鼠的改善作用及机制研究

目的:观察复方胶原蛋白肽粉对小鼠皮肤慢性紫外线损伤的改善作用,并探讨其作用机制。方法:ICR雌性小鼠随机分成正常组、模型组、复方胶原蛋白肽粉组、鱼胶原蛋白肽组。使用紫外光疗仪模拟日光照射小鼠背部皮肤建立皮肤慢性紫外线损伤模型。每周对小鼠皮肤表观进行评分,每3周拍照记录一次小鼠皮肤外观,9周后采用干燥法测定小鼠皮肤含水量;苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠皮肤组织病理形态学变化;采用FRAP法检测小鼠皮肤组织中总抗氧化能力(T-AOC)水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测皮肤组织中I型胶原蛋白(Col I)、弹性蛋白(ELN)、透明质酸(HA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、糖基化终末产物(AGEs)水平;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测皮肤组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、转化生长因子β受体2(TGF-βR2)、Smad2、Smad3、Smad7蛋白表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测皮肤组织中TGF-β1、TGF-βR2、Smad2、Smad3、Smad7 mRNA表达水平。结果:与模型组比较,复方胶原蛋白肽粉组小鼠皮肤皱纹减少,无表皮损伤,宏观等级评分极显著降低(P<0.01),皮肤组织病变程度减轻;皮肤组织含水量极显著升高(P<0.01);皮肤组织T-AOC水平极显著升高(P<0.01);皮肤组织中Col I、ELN、HA、GSH-Px、SOD水平极显著升高(P<0.01),MDA、AGEs水平极显著降低(P<0.01);皮肤组织的TGF-β1、TGF-βR2、Smad2、Smad3蛋白及m RNA表达显著升高(P<0.05),Smad7蛋白及mRNA表达极显著降低(P<0.01)。结论:复方胶原蛋白肽粉可有效改善小鼠皮肤慢性紫外线损伤,其机制可能与减轻氧化应激反应,调控TGF-β1/Smads信号转导增加细胞外基质合成有关。

姜黄素对AIH小鼠肠道菌群失衡的改善作用

目的 探讨姜黄素(curcumin, Cur)对自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis, AIH)小鼠肠道菌群失衡的改善作用。方法 BALB/c小鼠随机分成空白对照组、AIH模型组、姜黄素组和地塞米松(阳性药)组。采用刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)尾静脉注射建立小鼠AIH模型。收集小鼠回盲部粪便进行DNA抽提和PCR扩增获取碱基序列,并建立数据库;探索肠道菌群与自身免疫性肝炎的相关性及姜黄素对其肠道菌群失衡的影响。结果 与空白对照组比,AIH模型组小鼠粪便中肠道菌群中拟杆菌属(Bacteroides)、葡萄球菌属(Staphylococcus)丰度明显下降,而norank-f-Muribaculaceae、毛螺旋菌属(Lachnospiraceae-NK4A136-group)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、罗斯氏菌属(Roseburia)、Jeotgalicoccus、糖化假丝酵母菌(Candidatus-Saccharimonas)、Lachnoclostridium、厌氧棍状菌属(Anaerotruncus)丰度有所上升;与AIH模型组比较,姜黄素组和地塞米松组中葡萄球菌属(Staphylococcus)、norank-f-Muribaculaceae、毛螺旋菌属(Lachnospiraceae-NK4A136-group)、Jeotgalicoccus、棒杆菌属(Corynebacterium)、芽孢八叠球菌属(Sporosarcina)丰度有所下降,而拟杆菌属(Bacteroides)、乳酸菌属(Lactobacillus)、毛螺旋菌属(norank-f-Lachnospiraceae)、Colidextribacter、细小杆菌(Parvibacter)、Harryflintia丰度有所上升。结论 与正常小鼠相比,AIH小鼠肠道菌群结构发生改变,且姜黄素对AIH小鼠的肠道菌群失衡有明显改善作用。

知母、肉桂对寒热体质大鼠冷敏感通道TRPM8、TRPA1表达的影响

目的研究寒热体质大鼠掌温、冷痛阈及冷敏感通道TRPM8、TRPA1表达的差异,及中药肉桂、知母分别对寒、热体质大鼠进行调整后上述指标的变化。方法通过掌温结合大鼠自主活动,从自然群体中筛选出寒体、热体与常体大鼠。寒、热体质大鼠又分为体质未调整组和体质调整组。体质调整组中寒体大鼠给予肉桂、热体大鼠给予知母,观察大鼠掌温、冷痛阈、下丘脑和脚掌皮中TRPM8、TRPA1的表达。结果在体质未调整组中,寒体、热体与常体大鼠12周内,掌温和冷痛阈始终处于相对稳定的状态,且存在显著性差异(P<0.01)。在体质调整组中,中药调体前,寒体大鼠掌温和冷痛阈显著低于热体大鼠(P<0.01)与常体大鼠(P<0.01);寒体大鼠下丘脑中TRPM8、TRPA1通道表达显著高于热体大鼠(P<0.01)和常体大鼠(P<0.01)。三组大鼠脚掌皮中TRPM8 mRNA和蛋白表达、TRPA1蛋白表达虽无显著性差异,但相比于常体对照组,寒体空白对照组明显升高,热体空白对照组明显下降的趋势。且寒体空白对照组TRPA1mRNA表达显著高于常体对照组(P<0.01)和热体空白对照组(P<0.01)。中药调体12周后,寒体、热体及常体大鼠之间掌温和冷痛阈差异已无统计学意义;下丘脑中寒体大鼠TRPM8、TRPA1通道表达明显下降,热体大鼠TRPM8、TRPA1通道表达明显上升,寒体、热体与常体大鼠TRPM8表达差异无统计学意义。脚掌皮中寒体大鼠TRPM8、TRPA1蛋白表达明显下降,热体大鼠TRPM8、TRPA1 mRNA表达明显上升,三者TRPM8、TRPA1仍存在显著性差异,Pearson相关性分析显示各组大鼠掌温与冷痛阈呈正相关。结论寒、热体质大鼠掌温和冷痛阈存在显著性差异,大鼠掌温越高,冷痛阈越高,且这种差异具有相对稳定性;寒体中TRPM8、TRPA1通道表达上调,热体中TRPM8、TRPA1通道表达下调是引起寒、热体质大鼠冷痛阈差异的重要因素,肉桂、知母通过影响TRPA1、TRPM8的表达调节寒、热体质。

基于非靶向代谢组学探究寒、热体质大鼠整体代谢特征

目的:利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对寒热体质大鼠进行非靶向代谢组学研究,观察寒、热体质大鼠尿液代谢谱的差异性,以期找出与代谢特征有关的差异代谢物和代谢通路。方法:采用GC-MS技术对大鼠尿液进行非靶向代谢组学检测,结合主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)挖掘出寒、热体质之间的差异性代谢物,关联相关代谢途径,阐释造成寒热体质差异的生物学机制。结果:筛选并鉴定出热体组与常体组间有21个差异性代谢物及7条代谢通路,寒体组与常体组间有12个差异性代谢物及4条代谢通路。差异性代谢产物主要包括糖类、氨基酸、有机酸、维生素及脂肪酸等。结论:常体、寒体和热体体质大鼠尿液代谢组学存在差异,3种体质间存在不同的最终差异代谢物和差异代谢通路,主要与机体的能量代谢等有关。初步揭示了造成寒体、热体与常体差异的机制,对继续深入研究体质可调性具有重要的意义。

中医药调控脑肠轴的有效途径与价值评估

近年来研究表明脑肠轴在脑病和肠病的发生和发展中起到了重要的作用,中药对脑肠轴系统紊乱相关的疾病的有着一定的疗效。该文探讨中药调控脑肠轴的有效途径,以及对于中药调控脑肠轴的研究进行价值评估。通过对近年来调整脑肠轴紊乱的中药药理以及临床相关文献进行整合,阐述其发挥作用的有效途径并对其在研究领域的价值、临床上的价值和精准医学方向的价值进行评价。