树莓果实中树莓酮含量变化及受茉莉酸甲酯调控影响分析

【目的】探索一套提取、检测树莓酮的有效方法,探究夏果型、秋果型树莓果实树莓酮含量差异以及茉莉酸甲酯对树莓酮含量的影响。【方法】根据树莓酮的化学性质,设置4种萃取方法、5种高效液相色谱检测方法,进行树莓酮提取、检测方法筛选,对4个树莓品种不同果期的果实进行树莓酮含量检测,再分别对树莓酮含量最大的果期果实进行不同时间的茉莉酸甲酯处理。【结果】树莓酮提取过程中液氮磨样、氯仿萃取48 h、55℃旋蒸,树莓酮提取效果最好。0%~30%甲醇10 min,维持30%甲醇洗脱20 min,30%~0%甲醇梯度洗脱5 min,树莓酮峰与其他杂质峰分离效果较好、基线较平稳。托拉蜜半熟果期果实树莓酮含量最高,其余在青果期果实树莓酮含量最高,黄树莓含量高于红树莓。100μmol/L的茉莉酸甲酯(0.1%吐温20)喷洒15 min时树莓果实树莓酮表达量达到峰值。【结论】树莓酮属于易挥发的化合物,适合低温提取,茉莉酸甲酯在一定时间内可促进树莓酮的表达。

树莓1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶基因(RiACS)家族成员的克隆及生物信息学分析

【目的】树莓是一种营养丰富、风味独特的新兴水果,近年来中国树莓产业得到较大的发展,但树莓果实不耐贮存的特点成为制约树莓产业快速发展的瓶颈之一。1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase,ACS)是植物体内乙烯合成途径的限速酶,克隆树莓ACS基因家族成员可以推进树莓果实成熟分子机理的研究,为改善树莓果实不耐贮存的特性提供理论基础。【方法】采用电子克隆方法和PCR技术获得ACS基因家族成员序列并对其所编码蛋白质的理化性质、信号肽、亚细胞定位、蛋白结构、同源性和系统进化树进行预测和分析。【结果】克隆得到6条树莓ACS基因家族成员序列,生物信息学分析预测它们编码的蛋白均不含信号肽,RiACS4为跨膜蛋白,RiACS1-3可能定位于细胞核,RiACS4-6可能分别定位于内质网膜、细胞质、高尔基体,RiACS1-6二级结构类似,根据三级结构可分为2组,根据进化树可分为3组。【结论】为进一步研究树莓ACS基因的差异表达和树莓果实成熟机制奠定基础。

枣树遗传转化研究进展

【目的】枣树是中国第一大干果树种,具有重要的经济价值和生态价值。枣树长期面临着病害严重、育种缓慢等问题,急需定向培育优良品种。【方法】枣树遗传转化一般使用农杆菌介导法,通过对遗传转化过程中的各因素进行优化,可以有效提高遗传转化效率。得到转基因植株后要验证目的基因是否整合到植物基因组并能够发挥预期的功能,验证通过后再进行后续的炼苗移栽等工作。【结果】通过枣树遗传转化试验,可以定向改良枣树品种,缩短育种年限,培育出符合实际需求的新品种。【结论】综述中国枣树遗传转化的方法和成果,总结比较枣树遗传转化过程中各个影响因素的作用,为利用基因工程手段进行枣树品种改良提供借鉴。

树莓遗传转化体系的建立与优化

【目的】树莓遗传转化体系的建立对研究其基因功能、性状形成机制等方面的生物学探索和育种改良方面的研究具有重要意义。【方法】建立2套稳定的遗传转化系统,系统1为叶片直接分化丛生芽遗传转化受体系统;系统2为树莓叶片脱分化形成愈伤组织再分化成芽遗传转化受体系统。【结果】转化效率分析结果显示,系统1转化率为25%,是系统2的2.1倍,抗性筛选获得阳性植株时间是系统2的50%。【结论】系统1具有更高的遗传转化效率。