中医理论视域下创新中药发现策略和实践

在现代科学技术飞速发展的新形势下,源于中医临床的中药创新药物发现在应对新发疾病、重大疾病具有鲜明的中医药特色和优势,探索合理的创新中药发现策略、研究路径是我国中医药创新发展的关键问题。中医药具有完整独特的理论体系和丰富的临床实践积累,在中医理论指导下,临床驱动、主动创新、中西医结合,是我国具有中医药特色的药物发现的重要途径。本文就中医理论指导下的中药创新药物发现研究思路进行阐述,列举了近年来基于中药的药物发现研究成果和相关新兴研究策略,为现代中药创新药物研发提供一定的思路和参考。

基于药效物质基础的中药药物发现策略及其迭代发展

中药药效物质基础发现是中药新药创制的重要途径,青蒿素、黄连素和麻黄碱等国际知名药物均是由此途径陆续被发现及开发出来。然而,由于中医药理论及实践的复杂性,中药药效物质基础发现技术仍然不能完全满足创新药物的需要,仍然是制约中药创新药物的关键科学问题。中医临床是以多味中药组成方剂作为药物针对证候而表达临床疗效,而方剂的复杂性和证候的模糊性使得与临床疗效相关的中药体内药效物质基础发现充满挑战性。几十年来,中医药研究人员不断地建立及发展多项交叉学科的技术和方法,努力去发现发挥疗效的中药药效物质基础。本文回顾总结了中药药效物质基础发现的策略及其迭代发展历史,主要包括植物化学方法,即经典的系统分离筛选法(提取、分离、纯化、结构鉴定和药理活性测试);生物活性导向分离;中药血清药物化学方法;以及将体内成分与证候生物标志物关联分析的中医方证代谢组学方法。而中医方证代谢组学是近年来出现的一种符合中医药理论与特点的药效物质基础发现策略,该方法基于证候标记物与方剂体内显效成分关联分析,揭示方剂发挥疗效的体内药效物质及作用靶点与通路,推动基于临床疗效的创新药物研发及先导化合物的发现,促进中医药的现代化及产业化发展。

五味子防治阿尔茨海默病的作用机制研究进展

阿尔茨海默病(AD)患病率逐年升高,但目前仍无有效治疗药物,因此对其早期干预和新药研发尤为重要。中医认为AD为肾虚所致,在防治AD的补益方剂中,常用的中药五味子,具有补肾宁心之效,现代研究表明五味子可以显著提高AD模型的学习记忆能力,活性成分主要为木脂素类。本文通过查阅有关五味子及其活性成分防治AD的国内外文献,从减少Aβ蛋白沉积、抑制Tau蛋白磷酸化、调节神经递质紊乱、清除自由基及提高抗氧化能力、减少炎症因子产生等方面对五味子提取物及活性成分防治AD的有效性及作用机制进行综述,挖掘其潜在的关键作用靶点和药效成分,为下一步五味子作用机制研究和AD药物开发提供参考,为进一步完善五味子质量评价系统提供依据。

失眠症生物标志物及检测方法研究进展

失眠作为临床上的常见病以及许多疾病的伴随症状,患病率很高。随着分子生物学和现代分析技术的发展,愈来愈多的生物标志物被发现和提出,深入了解与失眠相关的生物标志物对研究失眠症生理病理机制及失眠症的防治具有重要意义。本文讨论了5-羟色胺、γ-氨基丁酸、多巴胺、牛磺酸、食欲素等生物标志物的作用机制,以及核磁共振光谱及色谱质谱联用等分析检测技术,旨在为失眠症基础研究、临床诊断和治疗提供参考。

基于代谢组学的茵陈蒿汤及组分配伍对大鼠酒精性肝损伤的保护作用研究

目的:利用代谢组学技术,结合临床生化检测和组织病理学,评价茵陈蒿汤及其组分配伍对长期过量摄入酒精诱导肝损伤的保护作用。方法:对Wistar大鼠进行"白酒—玉米油—吡唑"混合溶液灌胃和饲喂高脂饲料12周制备酒精性肝损伤大鼠模型,茵陈蒿汤及其组分配伍组分别于造模开始每日灌胃给予茵陈蒿汤和6,7-二甲氧基香豆素、京尼平苷、大黄酸配伍组合,12周末测定血清ALT、AST、ALP、TG、T-BIL、TP、ALB、CHOL、HA、LN、PCIIINP、CIV浓度和肝脏组织HYP、γ-GT、MDA、TBA、SOD和GSH-PX含量,观察肝左叶HE和Masson染色病理组织切片,并利用UPLC-Q/TOF-MS技术采集尿液代谢轮廓数据,提取各组样品中酒精性肝损伤生物标记物信息,分析空白对照组、模型对照组、茵陈蒿汤组及茵陈蒿汤组分配伍组之间大鼠代谢轮廓及生物标记物的变化。结果:茵陈蒿汤及其组分配伍均能显著抑制酒精性肝损伤大鼠血清ALT、AST、ALP、TG、T-BIL、TP、ALB、CHOL、HA、LN、PCIIINP、CIV浓度和肝脏组织HYP、γ-GT、MDA、TBA、SOD和GSH-PX含量的变化,减少肝脏细胞炎性浸润和肝纤维化,并使肝损伤大鼠整体代谢轮廓远离模型对照组而靠近正常对照组,使10个生物标记物趋于正常水平。结论茵陈蒿汤对大鼠酒精性肝损伤具有显著的保护作用,其3个组分6,7-二甲氧基香豆素、京尼平苷和大黄酸的配伍组合能够有效表达茵陈蒿汤的生物效应,是其主要有效组分,为茵陈蒿汤防治酒精性肝损伤疾病的创新药物开发奠定了基础。

茵陈蒿汤不同配伍情况下主要有效成分的溶出率研究

目的:建立同时测定茵陈蒿汤中绿原酸、京尼平苷、6,7-二甲氧基香豆素、茵陈色原酮和大黄酸5个有效成分的HPLC方法,考察药材不同配伍对其溶出率的影响。方法:采用HPLC方法测定茵陈蒿汤不同配伍水煎液冻干粉中5个成分的含量,色谱柱为Diamonsil○R(钻石)C18柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,以二极管阵列检测器在200～400nm范围内全波长检测。结果:建立的茵陈蒿汤中5个成分同时测定的HPLC方法准确、快速、重现性好。所测5个成分中,6,7-二甲氧基香豆素、茵陈色原酮和绿原酸溶出率变化不大,京尼平苷和大黄酸的溶出率在配伍茵陈蒿后明显降低。结论:茵陈蒿汤主要有效成分可能存在一定的有效比例。

熊胆粉产业化关键技术研究

熊胆粉是我国传统名贵中药,具有不可替代的特有药用价值,然而人工养熊及活熊取胆备受争议,制约了熊胆粉的产业化发展。本文综述了黑熊养殖技术、熊胆汁引流技术、熊胆粉加工技术、熊胆粉质量控制技术,以及长期胆汁引流黑熊健康评价等影响熊胆粉产业化发展的关键技术,认为当前人工养熊技术科学规范,研究评价尚未发现无管无痛自体造瘘胆汁引流技术影响黑熊的健康状态,熊胆粉加工技术先进,熊胆粉质量控制方法规范有效,熊胆粉已进入规范化、标准化、可持续的产业化发展之路。

基于药物代谢酶和转运蛋白的中药方剂配伍规律研究

药物代谢酶和转运蛋白是决定药物体内过程的关键因素,底物对它们的抑制或诱导作用是药物联合应用时产生药动学相互作用的主要机制。作为复杂化学成分组合体的中药及其有效成分也表现出对药物代谢酶和转运蛋白的抑制或诱导作用,并且中药在配伍应用时也产生了对药效物质体内过程的影响。由此认为,这种作用可能也是中药在按照传统君臣佐使配伍原则组成方剂时发挥增效解毒作用的一个重要机制,在体内直接作用物质层面上研究整合药物代谢酶和转运蛋白活性的方剂配伍规律,对于指导有效组分配伍将具有重要意义。

柴芩清肝胶囊提取工艺研究

目的:优选柴芩清肝胶囊的最佳提取工艺。方法:采用正交试验设计法,以出膏率和黄芩苷含量的综合评分为评价指标,考察因素为溶剂用量、提取时间、提取次数。结果:最佳提取工艺为加8倍药材量的水,煎煮提取2次,每次2h。结论:优化工艺合理、稳定,为柴芩清肝胶囊的生产提供了实验依据。

基于中医方证代谢组学的中医证候精准诊断及方剂疗效精准评价

中医方证代谢组学(Chinmedomics)是近年来兴起的新兴学科,它整合了系统生物学与中药血清药物化学的理论及技术,形成了鉴定证候生物标记物,建立方剂有效性评价体系,并发现药效物质基础的应用科学。中医方证代谢组学的理论及方法有助于实现建立中国式精准医学模式,有助于进一步提升中医药研发的原始创新能力。

菟丝子中总黄酮提取工艺研究

采用正交试验的方法,以菟丝子含总黄酮量为评价指标,对菟丝子药材提取工艺进行筛选.结果显示,乙醇质量分数、提取次数和提取时间对实验结果有显著性意义,最佳提取工艺为95%乙醇8倍量,提取2次,每次提取1 h.优化提取工艺简单、稳定可行.

龙血竭缓释滴丸的质量标准研究

目的:确定龙血竭缓释滴丸质量标准。方法:通过薄层鉴别方法对处方中龙血竭进行定性鉴别。运用高效液相色谱法对龙血竭中的龙血素B进行含量测定。结果:定性鉴别能从样品中检出相应的斑点;含量测定龙血素B的量在0.12～0.96μg有良好的线性关系,回收率99.09%,RSD 1.87%。结论:该制剂有明显的缓释作用,且所建立的方法可靠,能准确地进行定性、定量检测,可用于该制剂的质量控制。

蔓荆子药材HPLC指纹图谱的研究

目的采用高效液相色谱法建立蔓荆子药材的指纹图谱研究方法。方法以HypersiODS2为色谱柱,流动相为甲醇和水梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,检测波长为270nm。结果精密度和重复性试验中各共有峰相对峰面积的RSD均小于5,符合有关规定。结论本方法可作为控制蔓荆子药材内在质量控制的标准。

柴芩清肝汤血清药物化学的初步研究

目的分析柴芩清肝汤口服给予大鼠后的血中移行成分。方法采用HPLC-UV法建立柴芩清肝汤体外样品和灌胃前后大鼠血清样品的指纹图谱,通过三者之间的比较确定柴芩清肝汤血中移行成分。结果 检测了大鼠血中移行成分14个,8个为柴芩清肝汤中原型成分,6个为代谢产物。结论 该研究为进一步阐明柴芩清肝汤药效物质基础奠定了基础。

中药有效性评价与药效物质基础发现

中药有效性是中医药治疗优势的根本体现,而有效性的科学阐释是沟通中医学与现代医学科学的渠道,中药有效性评价是发现药效物质基础的前提。因此急需建立一种生物学语言,把中药的有效性科学地表达出来,让现代生命科学领域认识和接受中医理论及临床实践的科学价值。证候和方剂是中医学的两个关键科学问题,直接关系到疾病的诊断和临床疗效的有效性。由此,本课题组以证候生物标记物发现为切入点,以方剂为研究对象,建立阐释中药有效性的理论及研究方法——中医方证代谢组学(Chinmedomics),为中药有效性评价提供了有效途径。利用中医方证代谢组学研究方法,揭示临床常见中医证候的生物标记物及其相关方剂的有效性,推动了证候的精准诊断及临床治疗经验的挖掘,为提升中医理论及临床实践的科学价值的认识提供了科学依据。

基于体内过程的关黄柏在知柏地黄丸等类方配伍环境下血中移行成分分析

目的:本研究主要探讨了关黄柏在特定配伍环境下血中移行成分与功效取向的相关性。方法:研究应用UPLC-HD-MS/MS联用技术建立关黄柏及知柏地黄丸等类方口服给药后大鼠血中移行成分分析方法。采用主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)阐明不同的方剂配伍环境下关黄柏体内成分表达的差异,探索与关黄柏功效显著相关的潜在药效物质基础。结果:关黄柏在知柏地黄丸等类方中出现了23个共有血中移行成分,OPLS-DA分析充分挖掘了7个与关黄柏退虚热功效显著相关的血中移行成分及6个与关黄柏清热燥湿功效显著相关的血中移行成分。结论:本研究首次建立关黄柏在知柏地黄丸等类方中体内成分分析方法,初步阐明了关黄柏在类方中的配伍规律及其发挥退虚热及清热燥湿功效的药效物质基础。

HPLC测定柴芩清肝方有效部位群提取物中黄芩苷、甘草苷和芍药苷

目的：建立HPLC测定柴芩清肝方有效部位群提取物中黄芩苷、甘草苷、芍药苷的含量测定方法。方法：色谱柱：Diamonsil C18（4.6mm×250mm,5μm）;流动相：乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长为278nm（黄芩苷,甘草苷）,230nm（芍药苷）。结果：黄芩苷、甘草苷、芍药苷分别在0.216~1.080μg（r=0.999 1）、0.020~0.100μg（r=0.999 5）、0.015~0.003μg（r=0.999 3）范围内线性良好,平均回收率分别为黄芩苷96.28%、RSD=0.83%（n=5）;甘草苷97.2%、RSD=0.39%（n=5）和芍药苷98.1%、RSD=0.21%（n=5）。结论：该方法简便、快速、准确,具有良好的重复性和回收率,可作为柴芩清肝方有效部位群提取物的质量控制方法。

肿节风有效部位的纯化工艺研究

目的:优化肿节风水提药液大孔树脂精制工艺条件。方法:以葡萄糖、异嗪皮啶和总黄酮的含量为评价指标,对大孔树脂的型号、吸附条件和洗脱条件进行考察。结果:采用HPD400大孔吸附树脂,最大上样量为1.125g生药/mL树脂,上样药液浓度为0.75g生药/mL,吸附流速为3mL/min,用50%乙醇以3mL/min流速洗脱。结论:该工艺可用于肿节风水提物的精制。

柴芩清肝汤分煎和合煎提取物的指纹图谱比较

目的:以指纹图谱方式,研究柴芩清肝汤传统合煎与分煎混合液的化学成分差异。方法:以常规方法制备柴芩清肝汤的分煎和合煎提取物,采用高效液相色谱法(HPLC),考察并确定最佳的色谱条件,对柴芩清肝汤的合煎和分煎提取物进行测定,比较两者指纹图谱的差别。结果:柴芩清肝汤分煎混合液中共检出20个峰。分煎和合煎提取物中化学成分组成存在差异,分煎提取物中主要化学成分的提取率大于合煎提取物,且共有化学成分的组成比例也不同。结论:柴芩清肝汤分煎和合煎提取物中主要化学成分组成及其共有成分比例存在差异。