氯喹抑制肾癌细胞活性促进舒尼替尼诱导的细胞凋亡

目的:研究氯喹(经常用于抑制自噬体与溶酶体的融合,是一种晚期自噬的抑制剂)是否能抑制肾癌细胞的增殖以及对舒尼替尼(sunitinib,ST)诱导的细胞凋亡的影响。方法:以肾癌细胞系786-O和ACHN为模型,利用3-(4,5-二甲基)-5-(3-羧甲基苯环)-2-(4-硫基苯)-2H-四唑盐复合物检测法[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,inner salt,MTS]观察氯喹对细胞活性的影响;透射电子显微镜、免疫杂交等手段检测氯喹影响ST诱导的凋亡、自噬的情况。应用早期自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)、RNA干扰技术敲降自噬相关蛋白Ulk1(unc-51-like kinase 1)和微管相关蛋白1轻链3融合蛋白(microtubule associated protein 1 light chain 3 fusion protein,LC3)确定早期自噬对ST引起的细胞凋亡的影响。结果:氯喹和ST均可以抑制786-O和ACHN细胞的增殖,氯喹可促进ST诱导的细胞凋亡。与氯喹不同,抑制早期自噬减少了ST诱导的细胞凋亡和活性丢失。结论:舒尼替尼既可以引起细胞自噬,也可以促进细胞的凋亡;早期、晚期自噬对ST诱导的细胞凋亡作用不同,氯喹可以作为一种潜在的抗肾癌药物进行相关的临床研究。

基于现场观察在新闻采访中的探讨

新闻就是对新近发生事件的真实报道,不仅为人们提供了最新的资讯,还保证了新闻的透明化。为了使新闻呈现出最完美的形式,给广大观众带来美的享受,新闻采访中的现场观察能力起着非常关键的作用。所以,本文将对现场观察在新闻采访中的应用进行探讨。

细胞自噬及真菌中自噬研究概述

细胞自噬是真核生物中广泛存在的、主要依赖于溶酶体或液泡的保守的降解途径,通过降解细胞内过多或异常的蛋白、细胞器等以维持正常的细胞功能。近10年来自噬研究方面的飞速进展显示出自噬与癌症、神经退行性疾病、衰老及心脏病等人类疾病相关。与此同时,自噬在丝状真菌的生长、形态和发育等方面发挥着重要作用,特别是在丝状真菌的细胞分化过程中,自噬起到了关键性作用,如致病性生长、程序性细胞死亡及孢子形成。本文主要论述了什么是自噬,自噬的检测方法及以真菌为对象的自噬研究进展。

真菌次级代谢产物rasfonin促进舒尼替尼(Sunitinib)诱导的肾癌细胞自噬和凋亡

【目的】明确真菌次级代谢产物rasfonin影响舒尼替尼(Sunitinib,ST)诱导的肾癌细胞自噬和凋亡作用机理。【方法】应用MTS(Methanethiosulfonate assay)和克隆形成实验检测rasfonin和舒尼替尼对肾癌细胞ACHN活性和增殖的影响,通过透射电子显微镜、荧光显微镜、蛋白免疫印迹、免疫荧光方法检测rasfonin和舒尼替尼处理的ACHN细胞自噬、凋亡情况和相关信号通路的变化。【结果】Rasfonin和舒尼替尼能够抑制肾癌细胞ACHN活性和细胞增殖;免疫印迹结果表明,两者均可以引起caspase依赖的凋亡。在rasfonin存在的情况下,不仅舒尼替尼所引起的凋亡和细胞活性丢失明显增加,而且其诱导的自噬流显著提高。无论是rasfonin还是舒尼替尼均明显地抑制哺乳雷帕霉素靶蛋白m TOR(Mammal target of rapamycin)磷酸化,而两者均能促进细胞外调节蛋白激酶(Extracellular regulated protein kinases,ERK)活性增加。【结论】rasfonin促进了舒尼替尼诱导的细胞自噬和凋亡,提高了舒尼替尼抑制肾癌细胞增殖的活性。