利用Gly m Bd 28K天然蛋白免疫BALB/c雌性小鼠,取小鼠脾脏细胞与杂交瘤细胞融合,筛选出2株能稳定分泌抗Gly m Bd 28K单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E3和2F4。体内诱生腹水法大量制备单克隆抗体,经纯化后,得到2株均为Ig G1型的单克隆抗体m Ab...利用Gly m Bd 28K天然蛋白免疫BALB/c雌性小鼠,取小鼠脾脏细胞与杂交瘤细胞融合,筛选出2株能稳定分泌抗Gly m Bd 28K单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E3和2F4。体内诱生腹水法大量制备单克隆抗体,经纯化后,得到2株均为Ig G1型的单克隆抗体m Ab1E3和m Ab2F4。间接ELISA方法测得m Ab1E3的效价达到1∶4.10×10~5,对Gly m Bd 28K蛋白的半数抑制率(IC_(50))为23.99μg·L^(-1),与花生蛋白、核桃蛋白等的交叉反应率均低于0.1%。该单克隆抗体的制备为Gly m Bd 28K致敏蛋白的检测以及抗原表位的鉴定奠定了基础。展开更多
该文从脱脂大豆粉中分离纯化28K(Gly m Bd 28K)蛋白,并制备多抗血清。方法用碱溶酸提法提取28K蛋白,盐析法制得28K粗蛋白,DEAE–Sepharose CL–6B层析纯化28K蛋白,SDS–聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白的纯度,制备兔抗血清,用间接ELISA法检...该文从脱脂大豆粉中分离纯化28K(Gly m Bd 28K)蛋白,并制备多抗血清。方法用碱溶酸提法提取28K蛋白,盐析法制得28K粗蛋白,DEAE–Sepharose CL–6B层析纯化28K蛋白,SDS–聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白的纯度,制备兔抗血清,用间接ELISA法检测效价。该实验纯化出28K蛋白,制备了抗28K的多抗血清,效价为1∶51200。为研究大豆主要过敏原蛋白28K的单克隆抗体制备及28K的Ig G结合表位的确定奠定了基础。展开更多
文摘利用Gly m Bd 28K天然蛋白免疫BALB/c雌性小鼠,取小鼠脾脏细胞与杂交瘤细胞融合,筛选出2株能稳定分泌抗Gly m Bd 28K单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E3和2F4。体内诱生腹水法大量制备单克隆抗体,经纯化后,得到2株均为Ig G1型的单克隆抗体m Ab1E3和m Ab2F4。间接ELISA方法测得m Ab1E3的效价达到1∶4.10×10~5,对Gly m Bd 28K蛋白的半数抑制率(IC_(50))为23.99μg·L^(-1),与花生蛋白、核桃蛋白等的交叉反应率均低于0.1%。该单克隆抗体的制备为Gly m Bd 28K致敏蛋白的检测以及抗原表位的鉴定奠定了基础。