日本黄姑鱼精子生理特性及超低温冷冻保存研究

对日本黄姑鱼精子部分生理特性及其超低温冷冻保存技术进行了研究。结果表明，日本黄姑鱼精液pH值为7．0～7．5，精子密度为（11．23±2．78）×10^9／ml，精子寿命（229．33±17．16）s。在盐度为30～35，pH为7．5—8．5时，精子的活力最高，分别达到（88．33±2．89）％和（88±4．33）％。精子在室温（25℃）条件下，可存活24h；在低温（4℃）条件下可以存活36h。以D液作为稀释液，20％的乙二醇作为抗冻剂，利用快速降温法对精子进行超低温冷冻保存，38℃水浴快速解冻，解冻后的精子获得最高的活力为（47±5．78）％。

点篮子鱼驯养与繁殖技术总结

本文对点篮子鱼人工繁殖过程中的驯养和技术进行的总结,结果显示,在保持安静、避光的条件下运输和驯养篮子鱼可以获得较高的成活率;在驯养和繁殖篮子鱼过程中使用主要成分为维生素C的化学药物可以有效避免篮子鱼因应激而造成的死亡。

温度对中华鲟幼鱼代谢酶和抗氧化酶活性的影响

中华鲟似cipensersinensis）为江海洄游性的软骨硬鳞鱼类，主要分布于我国长江干流和东南沿海，1988年被列入国家一级重点保护野生动物名录。每年冬季长江上游产卵场繁殖的中华鲟幼苗顺江而下，于翌年5月到达河口进行索饵肥育和生理调节，然后于9月份进入海洋生长，在此期间长江口中华鲟幼鱼栖息水域的平均水温为14．97—27．47℃。

不同盐度驯化下施氏鲟幼鱼鳃泌氯细胞结构的变化

采用光镜和透射电镜方法,研究了不同盐度驯化下施氏鲟幼鱼鳃中泌氯细胞的分布和结构特征。结果显示,在淡水中,施氏鲟幼鱼鳃中的泌氯细胞数量较少,且主要分布在近鳃小片基部,胞体与核均较大而明显,胞内含大量线粒体;泌氯细胞中有网管和囊管,但网管欠发达,囊管分布面积小,细胞表面有顶隐窝。表现为典型的淡水型泌氯细胞(freshwater-type chloride cells)特征。与淡水组相比,盐度10组鳃泌氯细胞的分布和结构变化均不明显,仅数量略有增加,胞体变大。幼鱼在盐度25海水中驯化65d,鳃丝和鳃小片上泌氯细胞数量明显增加,泌氯细胞集中分布在鳃小片基部;超微结构显示,细胞内线粒体数量明显增加,胞质中网管颇为发达,囊管丰富,顶隐窝扩大,表面有微绒毛,表现为α-型(-αsubtype)泌氯细胞特征。泌氯细胞具有分泌体内过多Na+、Cl-以及调节体液渗透平衡的功能,其数量和结构变化与幼鱼所处的高渗环境相适应。

点篮子鱼人工繁育技术研究

2008年4—6月在海南进行了点篮子鱼的人工繁殖试验，共产卵610×10^4 cell，孵化出仔鱼342．4×10^4 ind，经过30d土池生态培育，培育出体长约2．5cm幼鱼32．5×10^4 ind，土塘培育苗种成活率达16．1％。点篮子鱼适宜催产的环境条件为：水温25．5～27．7℃，盐度33．0～34．5，pH值7．9～8．5，DO值6．0～8．8mg／L。A、B、C三种药品配伍进行催产效果最好，获产率、受精率、孵化率均最高，分别达到60．0％～80．0％、83．2％～90．5％和71．2％-76．8％，效应时间缩短到15～16h。点篮子鱼受精卵为半浮性卵，孵化积温为649．25时度。当盐度低于26．5时，点篮子鱼受精卵沉于水底；盐度高于38．5时，则浮于水面。水温对胚胎发育影响较大，15℃、20℃试验组胚胎分别发育至原肠晚期、胚孔封闭期死亡，35℃条件下胚胎发育终止于胚体形成期，30℃试验组初孵仔鱼的活力差，畸形率高。点篮子鱼胚胎发育的适温为25℃左右。盐度对点篮子鱼的胚胎发育的影响较大。在盐度34．4～45．7范围内，随着盐度的增加，孵化率降低，畸形率升高。在盐度30．2—34．4范围内，孵化率在60％以上，畸形率在10％以下，最适盐度范围30．2～34．4。初孵仔鱼全长为1．00—1．20mm，油球一个，出膜3～4d开始摄食小型轮虫和藻类。点篮子鱼苗15日龄前生长缓慢，之后生长迅速，平均全长与日龄回归方程式为：y=1．1207e^0.109 4x，R^2=0．9795。

点篮子鱼形态特征及其相关性参数分析

对捕捞自琼海海域的560 ind体重0.3~551.3 g、体长2.3~24.7 cm的野生点篮子鱼外部形态、可量可比性状、可数性状和内部结构进行了研究,分析了形态特征参数间相关关系。结果表明：（1）体呈椭圆形,侧扁;侧线完全,位高,与背缘平行,向后延伸至尾鳍基部;体侧有许多橙黄色斑,背鳍、胸鳍和腹鳍黄色,臀鳍、尾鳍浅灰褐色;背鳍末端下方有一圆斑,为该鱼明显特征。（2）属Y型胃,幽门部肌肉发达,具有4~6个指状粗大的幽门盲囊;消化道、肠道长度分别为体长的2.53±0.36、2.17±0.28倍,肠道长Li与体长Lb的关系式为Li=2.693 1Lb0.903 4（R2=0.879 4）。（3）可量可比性状表明,全长/体长变动范围最小,线性相关性最好,其相关方程为Lt=1.134 5Lb＋0.493 6（R2=0.998）;体长与体重关系为：W=0.037 6Lb2.893 3（R2=0.991 7）;点篮子鱼的b值为2.893 3,小于3,为负异速生长,体长快于体重的增长。（4）分析各形态特征参数与体长关系发现,测定的12个参数均与体长显著相关（P〈0.01）;进而控制体长的影响,分析这12个参数间的偏相关关系,显示与其它参数存在最多偏相关性的是头高,其与除体重外的其它8个参数间均显著相关（P〈0.01）;而尾柄长与其它参数的偏相关性最差,其只与头高、体重显著相关。

雌性成体点篮子鱼不同组织的脂肪酸组成分析

测定和比较了性腺发育至Ⅲ期的雌性成体点篮子鱼肌肉、肝脏和卵巢组织中总脂含量及其脂肪酸组成。结果表明:(1)肌肉、肝脏和卵巢中的总脂含量分别为(2.79±0.15)%、(12.78±1.30)%和(2.85±0.17)%。肌肉与卵巢间总脂含量差异不显著(P>0.05),肝脏总脂含量约为肌肉和卵巢总脂含量的6倍,呈显著性差异(P<0.05);(2)肝脏中SFA总量明显高于肌肉和卵巢,3种组织中SFA含量呈显著性差异(P<0.05)。单不饱和脂肪酸(MUFA)中,C18∶1ω9 c1(顺式)在3种组织中含量最高,肌肉、肝脏和卵巢中的含量分别为21.86%、23.66%和23.96%,肝脏与卵巢间无显著差异(P>0.05),而与肌肉间差异显著(P<0.05);多不饱和脂肪酸(PUFA)、3PUFA和6PUFA在卵巢中含量最高,其次是肌肉,肝脏中含量最低,且三者之间的差异显著(P<0.05)。

人工养殖西伯利亚鲟精子超低温冷冻保存研究

研究了人工养殖西伯利亚鲟精子的生物学特征及超低温冷冻保存方法。西伯利亚鲟的产精量为113.67±39.86 ml,精子密度为(6.49±3.10)×108/ml,精子活力为(85.4±9.5)%,精子寿命为353±23 s。精子密度与精子快速运动时间、精子寿命之间均存在线性相关,用方程分别表示为:y=1.0384x+1.5089(R2=0.7325);y=2.9069x+74.289(R2=0.6967)。结果表明精子密度可作为一项精子质量评价的标准。通过比较西伯利亚鲟精子在不同稀释液、不同抗冻剂和抗冻剂浓度、降温速率、解冻温度下的保存效果,结果表明:配方2作为稀释液,18%甲醇作为抗冻剂,二步法超低温(-196℃)冷冻保存精子,40℃水浴解冻取得最好的冻后活力,解冻后活力为(51.8±5.8)%。西伯利亚鲟授精的最佳精卵比为106∶1。在此精卵比下用冻精授精分别得到了(72.3±3)%的受精率和(52.9±4.1)%的孵化率,其中受精率与鲜精没有显著性差异,孵化率与鲜精有显著差异(P<0.05)。

长江口斑尾刺虾虎鱼与纹缟虾虎鱼肌肉营养成分比较

采用生化分析的方法,对长江口斑尾刺虾虎鱼(Acanthogobius ommaturus)和纹缟虾虎鱼(Tridentiger trigonocephalus)的肌肉营养成分进行了分析,并对两者的营养品质进行了比较。结果表明:斑尾刺虾虎鱼的水分含量显著高于纹缟虾虎鱼(P<0.05),而粗蛋白、粗脂肪和粗灰分含量显著低于纹缟虾虎鱼(P<0.05)。斑尾刺虾虎鱼和纹缟虾虎鱼的氨基酸组成一致,均检测到18种氨基酸,必需氨基酸指数(EAAI)分别为66.56和73.00。脂肪酸中二十碳五烯酸(EPA)与二十二碳六烯酸(DHA)的总量斑尾刺虾虎鱼显著高于纹缟虾虎鱼(P<0.05),分别为32.14%±1.16%和30.17%±1.02%。从以上分析可见,两种虾虎鱼均含有丰富的各种营养成分,但从粗蛋白、粗脂肪、必需氨基酸含量来看,纹缟虾虎鱼的营养价值优于斑尾刺虾虎鱼;从EPA和DHA的相对含量来看,多不饱和脂肪酸营养价值斑尾刺虾虎鱼高于纹缟虾虎鱼。

褐牙鲆精子生理特性及超低温冷冻保存

对褐牙鲆精子部分生理特性进行了研究,结果表明,褐牙鲆精浆pH值为(7.90±0.26),精子密度为(1.03×1010)/mL,精浆渗透压为(308.50±7.85)m Osm/kg,K+在精浆中的浓度为(27±3)mmol/L,Na+在精浆中的浓度为(71±5)mmol/L。对不同盐度和pH与褐牙鲆精子活力和寿命的关系进行了研究,结果表明,在盐度为35,pH为8.0时,精子的活力最高,分别达到(93.33±5.67)%和(89±3.33)%,与其生活环境相适应;褐牙鲆精子寿命为(23±2)min,与已报道其它海水鱼精子寿命相近。分别采用室温(25℃)和低温(4℃)保存精子,发现精子在室温条件下,可存活4 d,在低温条件下可以存活7 d,证明低温可有效延长精子存活时间。另外,分别采用4种不同稀释液(S1、S2、S3、S4)与4种不同抗冻剂(DMSO、EG、Gly、PG)配制成冷冻保存液对褐牙鲆精子进行超低温冷冻保存研究。结果表明,以S3液作为稀释液,16%的DMSO作为抗冻剂,利用快速降温法对精子进行超低温冷冻保存,38℃水浴快速解冻,解冻后的精子获得最高的活力为(84±3.67)%,此方法可用于褐牙鲆精子的长期保存。

超低温冷冻对西伯利亚鲟精子形态结构损伤的观察

为改进西伯利亚鲟精子超低温冷冻保存技术,探讨精子损伤机制,应用扫描和透射电子显微镜,观察了西伯利亚鲟鲜精与冷冻后精子的形态结构。结果显示,经过冷冻保存后精子的形态发生了很大变化。精子顶体长、精子头中部宽、头中部宽与前部宽比值及中段宽与鲜精相比显著增加(P<0.05);中段长度、后外侧延伸物长度比鲜精显著变短(P<0.05)。精子经过冷冻后有30.5%的精子在形态、结构上受到不同程度损伤,受损精子显微结构表现为顶体后外侧延伸物与核糅合,顶体内容物丢失;核膜囊泡化、核膜断裂,核内出现空泡;线粒体内嵴弥散,线粒体脱落;鞭毛外膜松弛与鞭毛脱离等。部分受损伤精子出现顶体丢失,中段脱落,鞭毛自中段基部断裂的现象。精子损伤主要集中在膜系统,中心粒等微管系统基本完好。

篮子鱼生物学与养殖技术研究现状及展望

篮子鱼共有27种,广泛分布于热带亚热带的印度洋—太平洋及地中海东部海域。篮子鱼具有食性杂、养殖周期短、营养价值高等优点,可摄食藻类,混养时能提高单位水体产量。近年来篮子鱼生物学研究不断深入,人工繁育逐渐开展,养殖规模不断扩大。综述了篮子鱼形态结构、生长特性、食性与营养需求等生物学特征,总结了篮子鱼池塘养殖与网箱养殖技术,并对人工养殖存在的问题与发展前景进行了阐述,预计篮子鱼可以开发成为优良的杂食性养殖品种。

纹缟虾虎鱼精子的主要生物学特性

选取健康成熟的纹缟虾虎鱼(Tridentiger trigonocephalus)进行人工采精,设定不同的盐度和温度梯度,观察其对精子活力及寿命的影响。测定了精子的大小、密度,并观察了精子的超微结构。结果表明,随着盐度和温度的上升,精子的活力和寿命都先增加后降低,在盐度5和温度19℃时,精子的活力和寿命分别达到最高。测得精子密度为(1.73×109±0.08×109)/mL,细胞核长径为(0.98±0.12)μm,短径为(0.81±0.08)μm,鞭毛的长度为(7.28±1.06)μm。电镜结果表明:纹缟虾虎鱼精子由头部和尾部(鞭毛)二部分组成,头部的细胞核近圆形,内有核空泡。精子细胞质膜与核膜间有较大间隙,两者之间分布有细胞质和线粒体。中心粒复合体位于植入窝中,由近端中心粒和基体两部分组成。袖套位于核后端,呈一筒状,两侧不对称,袖套腔较为狭窄,两侧分布有线粒体和少量囊泡。鞭毛的核心结构是轴丝,轴丝为典型的"9+2"结构,从轴丝的横切面观察到轴丝外面的质膜呈不规则分布。

长鳍篮子鱼繁殖季节性腺的组织学研究

采用常规组织切片法研究了长鳍篮子鱼繁殖季节各期卵巢和精巢的组织学结构特征。在所获得样本中,未发现Ⅰ期、Ⅱ期的卵巢和精巢。Ⅲ期卵巢以第Ⅲ时相卵母细胞为主,这时期液泡、卵黄颗粒出现,同时含有少量Ⅰ时相和Ⅱ时相的卵母细胞;Ⅳ期卵巢以第Ⅳ时相卵母细胞为主,Ⅳ时相晚期卵母细胞开始出现油球,细胞核偏移和变形,放射带明显;Ⅴ期卵巢的卵细胞游离,卵细胞的外层分别有胶膜、放射带和质膜;Ⅵ期卵巢主要由Ⅲ时相卵母细胞和大量的空滤泡外膜组成。长鳍篮子鱼精巢为辐射型,精巢内生殖细胞分为初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子,各期生殖细胞和支持细胞组成了精小管,同一精小管中的生精细胞发育不同步。精子成熟后,充满整个精小管,完成发育过程。

盐度对不同规格黄边糙鸟蛤呼吸排泄的影响

呼吸与排泄是贝类新陈代谢的基本生理活动，不同盐度对贝类的生长起着至关重要的作用。本研究在28℃条件下，设八个盐度梯度（16、20、24、28、32、36、40、44），采用Winkle滴定法和次溴酸盐氧化法测定了大、中、小三种规格的黄边糙鸟蛤的耗氧率和排氨率。结果表明，黄边糙鸟蛤壳长与组织干重之间符合幂函数关系W=0．0044H^3.8520，R。=0．9496；在盐度16—28范围内，黄边糙鸟蛤单位体重耗氧率随盐度的升高而增加，在盐度28取得最大值，其后随盐度上升，耗氧率呈下降趋势。方差分析（ANOVA）显示，盐度变化对黄边糙鸟蛤的耗氧率有显著影响（F=3．50，P〈0．01，n=7）。单位体重耗氧率和组织干重之间的关系用幂函数RO=aW^b表示，其中a值范围为0．6198～0．9567，b值范围为0．3715～0．5828。排氨率与耗氧率呈现相同的变化趋势，不同盐度下黄边糙鸟蛤的排氨率有显著差异（F=13．37，P〈0．01，n=7）。其排氨率和组织干重之间的关系也可用幂函数ER=n旷表示，其中a值范围为92．94～136．65，b值范围为0．3970～0．5643；规格大小对黄边糙鸟蛤单位体重耗氧率和排氨率有显著影响（F=28．57，P〈0．01；F=130．66，P〈0．01）。在盐度44条件下，驯化养殖3d后黄边糙鸟蛤全部死亡，表明黄边糙鸟蛤的最高耐受盐度为44。

超低温冷冻对俄罗斯鲟精子抗氧化酶活性的影响

为了探讨超低温(-196℃)对精子的损伤机理,采用试剂盒测定了冷冻前后俄罗斯鲟精浆和精子中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和谷胱甘肽还原酶(GR)等酶活性。结果表明,经过超低温冷冻保存后,俄罗斯鲟精子活力下降,添加抗冻保护液冷冻后的精浆中SOD、CAT、GSH-PX活性较鲜精组显著升高(P<0.05),较未添加保护液组显著降低(P<0.05),GR的活性则显著低于鲜精组(P<0.05),但显著高于未添加保护液组(P<0.05);添加抗冻保护液冷冻后的精子中SOD、CAT、GSH-PX活性较鲜精组显著降低(P<0.05),较未添加保护液组显著升高(P<0.05),GR活性则显著高于鲜精组(P<0.05),但显著低于未添加保护液组(P<0.05)。这说明超低温冷冻对俄罗斯鲟精子的抗氧化系统产生了较大影响,成为影响精子活力的一个重要原因。

铅暴露致中华鲟(Acipenser sinensis)幼鱼弯曲畸形与畸形恢复

铅是一种常见的污染物,在水环境中广泛分布并在水生食物链中富集,具有持久的生态效应.中华鲟(Acipenser sinensis)是我国特有的珍稀濒危大型洄游性鱼类,极具学术价值和生态价值.为了探索中华鲟在生命早期接触铅后的损伤和自我修复机制,采用水溶液静态置换法,从中华鲟受精卵发育至96h开始,进行了16周的Pb2+暴露试验,随后继续6周的排放试验.结果显示:经0.8mg·L-1和1.6mg·L-1的Pb2+暴露16周,中华鲟幼鱼会发生弯曲畸形,而0.2mg·L-1Pb2+暴露组未出现畸形个体.畸形弯曲位置主要发生在近胸鳍起点处以及背鳍起点至尾鳍末端之间,多伴有尾鳍末端下垂.Pb2+暴露浓度越高,畸形弯曲越严重,但未见椎骨变形.畸形个体的自主活动能力和摄食能力明显降低.Pb2+排放后,畸形个体的弯曲程度由重度向轻度转变而恢复正常,弯曲程度越轻恢复越快,畸形恢复个体的自主活动能力和摄食能力均明显得到恢复并逐渐复原.表明中华鲟幼鱼具有较强的排铅能力和铅损伤后的自我修复能力.

分光光度法测定俄罗斯鲟精子密度标准的研究

为了标准化精子超低温冷冻保存和人工授精程序，建立了分光光度法测定俄罗斯鲟精子密度的方法，比较了不同波长（380nm、530nm、780nm）下吸光度（A）与精子密度（C）的关系。结果表明，分光光度法的检测下限为3×10^6cells／mL，且检测上限随波长的增加而上升，当精子密度为3×10^6～1．5×10^9cells／mL时，530nm为最适检测波长，吸光度与精子密度呈对数回归关系，其回归方程为：A530=-8．560＋1．3231gC（R^2=0．971）。

银鲳精子的超微结构

运用扫描与透射电镜对银鲳精子的超微结构进行了观察。银鲳精子由头部、中段和尾部（鞭毛）3部分组成。精子全长约39.51±1.64μm,头部长约1.98±0.30μm,表面粗糙。头部的主要结构包括细胞核和中心粒复合体。细胞核位于头部腹侧,卵圆形。细胞核中染色质致密,存在着不规则的网络状间隙。近端中心粒为9组三联微管结构,与远端中心粒相互垂直。中段的主要结构为袖套和线粒体。袖套与细胞核后端相连,含有4~5个线粒体及少量囊泡。尾部细长,长约37.52±1.68μm,至末端逐渐变细。尾部的主要结构为轴丝,为典型的＂9＋2＂微管结构。尾部具有波纹状侧鳍,排列不对称。

可视荧光硅橡胶标志用于西伯利亚鲟幼鱼标志的初步评价

在渔业和水产养殖的研究中,常采用标记（Marking） 或标志（Tagging）方法来区分不同的个体或种群.标志技术在鱼类个体生长、存活和种群补充和生产力研究中广泛应用,标志回捕（Mark recapture）已成为评估渔业资源状况和洄游习性研究中的重要研究手段.此外,标志技术在选择育种上也得到了应用,用以快速有效地区分不同选育群体.如何提高标志榆测率和保持率,以及怎样 减少标志操作对研究对象生长和存活影响,是研究和选择标志方法时应考虑的主要问题.