Toll样受体4在淋巴瘤细胞株中的表达及其对细胞增殖和耐药的影响

目的探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在人淋巴瘤细胞株中的表达及其对细胞增殖和耐药的影响。方法采用RT-PCR、q PCR和Western blot检测8株淋巴瘤细胞株中TLR4 m RNA及蛋白的表达情况并筛选出TLR4高表达株,对高表达株进行基因测序以排除My D88 L265P基因突变。将TLR4高标达细胞株分为空白对照组、TAK-242组、细菌脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)组和LPS+TAK-242组,分别进行细胞增殖和阿霉素耐药实验。采用CCK-8试剂盒检测其增殖活性和细胞杀伤率,用Western blot法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的变化。结果 8株淋巴瘤细胞株中TLR4 m RNA和蛋白广泛表达,其中Burkitt淋巴瘤细胞株Raji的表达水平最高。Raji细胞My D88基因为野生型。与空白对照组相比,TAK-242和LPS+TAK-242组Raji细胞的增殖活性无明显改变(P=2.19,P=1.85),LPS组Raji细胞的增殖活性明显升高(P=0.016),LPS组PCNA蛋白表达明显升高(P=0.009)。阿霉素在半数抑制浓度下各组杀伤率分别为:空白对照组(49.23±2.03)%、TAK-242组(51.41±1.12)%、LPS组(24.65±3.17)%、LPS+TAK-242组(41.17±2.69)%,可见LPS组细胞杀伤率明显降低(P=0.002)。P-gp蛋白表达明显升高(P=0.001)。结论 TLR4分子在淋巴瘤细胞株中广泛表达,尤以Burkitt淋巴瘤细胞株Raji最高,激活TLR4可以促使肿瘤细胞增殖和耐药,其机制可能与PCNA和P-gp的表达上调有关。

沉默B7-H3基因抑制人恶性血液病裸鼠移植瘤的体内成瘤和转移

目的:探讨靶向B7-H3基因沉默对人恶性血液病细胞株在裸鼠体内成瘤和转移的影响及机制。方法:应用实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,q PCR)和流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测13株恶性血液病细胞中B7-H3分子的表达水平,筛选高表达的U937、Maver和Z138细胞。分别利用慢病毒转染技术靶向敲减B7-H3,建立稳定低表达细胞株,应用q PCR和FCM验证基因沉默效果。将U937、Maver和Z138各自分为空白对照组(non-infected control group,CON)、靶向B7-H3敲减组(B7-H3 knockdown group,KD)和阴性无关序列对照组(negative nontargeted control infected group,NC),将以上9组分别构建裸鼠皮下移植瘤模型,比较肿瘤生长和转移情况,免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色检测Ki-67表达,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)水平。结果:筛选B7-H3分子高表达的U937、Maver和Z138细胞进行靶向敲减B7-H3,成功建立稳定低表达细胞株。U937、Maver和Z138细胞各自的KD组与NC组比较,观察终点的平均肿瘤生长抑制率分别为61.83%(F=43.78,P<0.05)、59.12%(F=36.51,P<0.05)和67.37%(F=40.29,P<0.05),而各自NC组与CON组相比,肿瘤体积增长趋势差异无统计学意义(P>0.05)。在所有移植瘤裸鼠模型中肝转移最常见,KD组裸鼠的远处转移较相应NC组明显降低。3种细胞各自KD组的Ki-67指数均较相应NC组显著下降(U937移植瘤:40.3%±5.2%vs.79.1%±6.3%,q=30.31,P<0.05;Maver移植瘤:35.2%±6.4%vs.69.6%±5.1%,q=24.82,P<0.05;Z138移植瘤:38.4%±7.1%vs.75.7%±4.8%,q=28.07,P<0.05),而NC组与CON组Ki-67表达差异无统计学意义(P>0.05)。3种细胞各自KD组肿瘤组织的MMP-2蛋白表达显著降低(U937移植瘤:q=14.59,P<0.05;Maver移植瘤:q=9.25,P<0.05;Z138移植瘤:q=11.04,P<0.05),NC组与CON组MMP-2表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:靶向B7-H3基因沉默能够抑制人恶性血液病细胞在裸鼠体内的成瘤和转移能力,其机制可能与Ki-67和MMP-2的表达下调有关。

共刺激分子B7-H1、B7-H3和B7-H4在血液系统恶性肿瘤细胞株中的表达水平和分布特征

目的:探讨3种共刺激分子B7-H1、B7-H3和B7-H4在人类血液系统恶性肿瘤细胞株中的表达及分布特征。方法:分别采用RT-PCR、q PCR、Western blot和流式细胞术检测13株血液肿瘤细胞中B7-H1、B7-H3和B7-H4的表达及亚细胞定位情况,设12例志愿者外周血单个核细胞(PB MNC)为对照。结果:3种共刺激分子的mRNA在12例志愿者PB MNC和13株血液肿瘤细胞中广泛表达,其中B7-H4表达水平相对偏低;3种共刺激分子分别在Maver、Z138和HL-60中表达最高,B7-H3和B7-H4在CZ1中不表达。3种共刺激分子的胞核及胞浆蛋白仅在恶性血液肿瘤细胞中异常高表达,分别在U937、Z138和Raji细胞中表达最高,B7-H3和B7-H4在CZ1细胞中不表达。在同一肿瘤来源的细胞株中,3种共刺激分子的mRNA和胞核及胞浆蛋白表达均存在差异,且差异不全一致。B7-H3膜蛋白在U937、M aver和Z138中表达丰度较高;B7-H1和B7-H4的膜蛋白在13株细胞中呈不表达或低表达。结论:共刺激分子B7-H1、B7-H3和B7-H4在mRNA水平均广泛表达,但蛋白水平仅在血液肿瘤细胞中异常高表达,且亚细胞定位多在胞核及胞浆,膜蛋白水平普遍低表达或不表达。同一肿瘤来源的细胞株中3种共刺激分子的表达可存在差异。

基于AT89S51的汽车防撞报警系统设计与开发

依据超声波测距原理,以AT89S51单片机为核心,设计了汽车防撞报警系统。该系统将单片机的实时控制及数据处理功能与超声波测距技术、传感器技术相结合,以超声波发射和接受电路、声光报警电路、测速电路等硬件电路为载体,通过编写的处理软件来实现测量距离。显示测量距离,当距离小于警戒阀值时,可发出声光报警信号。该系统可用于提高汽车在行进过程中与倒车时的安全性,构建汽车行进的安全空间。

环境友好型航空润滑油添加剂的研究现状及发展趋势

论述了对环境友好型航空润滑油的生态评价以及研究环境友好型航空润滑油添加剂的重要性。综述并分析摩擦改进剂、极压抗磨剂等可改善摩擦学性能的环境友好型航空润滑油添加剂的研究现状及研究内容,总结了环境友好型航空润滑油添加剂的主要发展方向。

面向飞机维修过程的数字支援系统研究

在研究欧盟的民用飞机维修方式研究计划(TATEM)的基础上,分析飞机维修过程的主要因素并建立了飞机维修过程的数学模型。通过模糊数学知识实现对数字支援系统拟采用的技术手段对飞机维修工程促进作用的评价,详细设计了数字支援系统的主要功能模块,并用于指导系统软件的开发。面向飞机维修过程的数字支援系统的研究与开发对于其他复杂设备的维修过程数字化建设有着重要的借鉴意义。

我国软件外包市场绩效的实证研究——基于软件外包承包商企业的研究

借助因子分析模型,通过寻找出一组数目较少、相互独立的公共因子来代替相对较多和互相关联的绩效评价指标,以对我国软件外包行业市场绩效状况进行了考察,为我国软件外包承包商企业提供建议参考,以提高我国软件外包承包商企业的市场竞争力。

microRNA-223调控人胚胎干细胞向树突细胞分化

目的:建立人胚胎干细胞(ESC)向树突细胞诱导分化的新策略,探讨microRNA-223(miR-223)在人胚胎干细胞源树突细胞产生过程中的调控作用及其分子机制。方法:采用人胚胎干细胞在胞外基质Ⅳ型胶原蛋白上直接贴壁培养,加入造血生长因子分步向造血干/祖细胞、共同髓系祖细胞和树突细胞诱导的方案,通过形态学、流式细胞术和造血集落形成实验鉴定分化细胞;人胚胎干细胞经慢病毒转染过表达miR-223或抑制其表达后启动向树突细胞分化,比较不同miR-223表达水平下分化细胞中造血集落形成的数目和表面标记物的表达量;应用双荧光素酶报告基因检测验证TGFBR3是miR-223发挥作用的直接靶标。结果:人ES细胞成功诱导为树突细胞,分化细胞中表达CD83比例可达82%,在整个分化过程中miR-223表达呈上调趋势;添加miR-223模拟物组分化细胞表达CD34^+CD45^+、CD34^+CD45^+以及CD83^+的比例均显著高于添加miR-223抑制剂组和阴性对照组(P<0.05);添加miR-223抑制剂组分化细胞表达各阶段细胞标记物显著低于阴性对照组(P<0.05);添加miR-223模拟物组分化细胞出现大约759个CFU/105细胞数,显著高于其它各组(P<0.05);双荧光素酶报告基因结果显示,miR-223显著抑制TGFBR3-3'UTR结构的荧光素酶活性(下降了37%)(P<0.05),而且TGFBR3-3'UTR突变型的荧光素酶活性显著高于野生型(P<0.01);随着向树突细胞分化成熟,添加miR-223模拟物组分化细胞表达TGFBR3水平逐渐下降,而添加miR-223抑制剂组由于内源性miR-223受到抑制而明显上调TGFBR3的表达。结论:miR-223调控人胚胎干细胞向树突细胞分化,可能通过直接作用于靶标TGFBR3而促进胚胎干细胞源树突细胞的产生。

CD200和调节性T细胞的相关性在多发性骨髓瘤预后分层中的意义

目的:观察多发性骨髓瘤(MM)患者CD200和调节性T细胞(Treg)表达的相关性,探讨其在MM预后分层中的意义。方法:应用流式细胞术检测78例MM初诊患者骨髓血中CD200和其它免疫表型(CD38,CD138,CD56,CD19,CD20,CD117,胞浆轻链Kappa和Lambda)表达,以及外周血Treg的比例;分别检测患者血清血红蛋白(Hb)、血清β2微球蛋白(β2-MG)和乳酸脱氢酶(LDH)的浓度;通过国际分期系统(ISS)和细胞遗传学特征进行预后分层;分析MM患者表达CD200与Treg细胞的相关性,比较不同表达相关性患者的预后差异。结果:78例初诊患者表达CD200^+率为71.79%(56/78),在年龄和性别分布上CD200阳性组和阴性组之间的差异无明显统计学意义。在其他抗原表达上,CD200^+组CD117的表达显著高于CD200^-组(P=0.032),CD20、CD56和CD19的表达两组间无明显统计学差别。CD200^+组Hb量明显低于CD200-组(P=0.035),血清β2-MG水平显著高于CD200^-组(P=0.013),血清LDH水平两组间差异无明显统计学意义。CD200^+组中ISS分期Ⅰ期患者占58.62%(17/29),Ⅱ期患者占75%(30/40),Ⅲ期占100%(9/9),随着CD200表达强度增加,预后分层危险度上升(P=0),CD200表达越强,预后越差;Treg细胞CD200^+组显著高于CD200^-组(P=0.043),Treg含量与CD200表达程度呈正相关(r=0.743,P=0.044)。CD200-组患者总生存率(OS)显著高于CD200^+组(P=0.036),疾病无进展生存率(PFS)稍高于CD200^+组,但两组间差异无统计学意义。结论:MM患者CD200表达和Treg含量之间有显著正相关性,是MM预后不良的重要因素以及临床判断疗效的可靠指标。

SDF-1/CXCR4在椎间盘退变中的作用研究进展

下腰痛已成为全球公共健康问题,椎间盘退变(IDD)是引发腰痛的最主要原因,然而IDD的分子机制仍未完全阐明。基质细胞源性因子-1(SDF-1)及其受体CXCR4在退变的椎间盘组织中高表达,被认为可介导IDD的发生和发展,如间盘血管再生、炎症反应、基质细胞代谢、细胞凋亡等病理过程,近年来还被应用于椎间盘再生等组织工程研究中。因此,积极探索SDF-1/CXCR4在IDD中的作用对于阐明IDD的分子机制及探寻治疗IDD的新策略具有重要意义。该文就近年来SDF-1/CXCR4在IDD及椎间盘再生中的作用研究进展进行综述,以期为深入了解IDD的分子机制提供依据,同时为早期靶向治疗IDD提供新的思路。

小学英语教学中提升学生写作能力的策略

在小学英语教学过程中，英语写作也扮演着重要的角色，穿插在整个英语学习过程中，也是衡量一个学生英语水平的标准。强化学生的英语写作能力是英语教学的重点，基于此，本文对小学英语教学中提升学生写作能力的策略进行探究。

谈小学英语新课程改革

我并不认为把课堂教学搞得“热热闹闹”就是达到了课改的目的了，只有把小学英语教师扎实的教学技能，好的教学方法放到平时每节课中，才能够帮助学生更好地运用与记忆。要把学生的“学”放在第一位，以学生为主体，以激发学生的学习兴趣为目的，利用一些实用的教学技能进行课堂教学。真正把课改融合到平时教学当中，做公开课的时候也要从实际出发，找出一些真正解决平时上课所反映的问题的好方法，这才是实行新课程标准改革的最终目的。

复杂机电液耦合系统健康状态评估技术研究及应用

复杂机电液耦合系统健康状态存在过渡态,部分组成的故障并不一定会导致系统功能失效,从健康状态不只是“好、坏”两个状态。系统或设备的劣化过程是一个渐变的过程,设备可能处于一种“亦此亦毕”的状态,而模糊综合评价方法是解决此类问题较适合的一种方法,并且复杂机电液耦合系统的健康状态评估要比单设备健康状态评估困难的多,需要在各个设备评估的基础上进行综合判断。利用模糊综合评价方法构建复杂机电液耦合系统健康状态评估模型,建立了具有一般性的复杂机电液耦合系统健康状态评估的流程及模型构建框架。针对船舶复杂机电液耦合系统设计开发了应用示例系统,集成了基于模糊综合评价方法的健康状态评估模型,开展了健康状态评估应用分析,展示了基于模糊综合评价方法构建的健康状态评估模型的适用性。

基于知识驱动的复杂系统故障传递及定位识别方法研究

针对复杂系统如何实现对故障传递及定位识别的问题,详细分析了基于知识驱动的复杂系统故障传递及定位识别方法的基本研究路径,提出了基于概率图的故障传递及定位识别建模的实现路径,因果模型能够俘获变量之间因果关系,建立合理、准确的因果模型对于故障报警根源识别十分关键,对识别故障报警根源和发现异常传播路径具有重要作用。研究提出了基于概率图模型的因果关系建模方法,结合专家经验等先验知识(或信息)在内,通过对结构化数据的分析和处理获得与收集到的数据集最吻合的网络模型的过程,主要涉及到结构学习和参数学习两个部分,结合复杂系统特点进行示例应用,构建了一般性的复杂系统基于概率图模型的因果关系建模流程、完成建模结果示意。

Toll样受体与血液恶性肿瘤

Toll样受体（TLR）是一类模式识别受体，在多种细胞中表达，在固有免疫和后续的获得性免疫中发挥重要作用。同时它也参与了机体细胞的免疫、增殖、凋亡等生理进程。TLR在血液恶性肿瘤中有表达，并与肿瘤的发生发展、免疫逃逸、耐药密切相关，发挥了双刃剑的作用。文章主要对TLR分子的基本知识和在血液肿瘤方面的研究进行综述，为血液恶性肿瘤的治疗提供思路。