雌激素受体及胆汁酸代谢相关基因在胆汁淤积孕鼠胎鼠肝脏中的表达

目的探讨雌激素受体(estrogen receptor,ERα)与胆汁酸代谢相关基因胆固醇7α羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)、胆固醇27α羟化酶(cholesterol 27-hydroxylase,CYP27A1)、胆固醇12α羟化酶(cholesterol 12α-hydroxylase,CYP8B1)mRNA在妊娠期肝内胆汁淤积孕鼠胎鼠肝脏中的表达及其意义。方法将60只清洁级SD孕鼠自孕第13天均分为2组:对照组孕鼠皮下注射精制植物油2.0 mL.kg-1.d-1;研究组孕鼠皮下注射17-α-乙炔雌二醇1.25 mg.kg-1.d-1。2组孕鼠分别于妊娠第13、17、21天断尾采母鼠血2 mL检测血清生物化学指标,于妊娠第21天处死。抽取母鼠、胎鼠血并提取母鼠、胎鼠肝脏组织。应用酶联免疫吸附试验检测2组孕鼠以及胎鼠血清中胆酸浓度;应用实时定量PCR技术检测各组胎鼠肝脏ERα、CYP7A1、CYP27A1、CYP8B1的mRNA表达量。结果①胆酸指标比较:在妊娠第17天时对照组、研究组母鼠胆汁酸浓度分别为(24.6±1.3)μmol/L、(58.7±3.2)μmol/L,研究组母鼠胆汁酸浓度明显高于对照组(t=2.462,P<0.05);在妊娠第21天时对照组、研究组母鼠胆汁酸浓度分别为(26.5±3.1)μmol/L、(66.4±2.7)μmol/L,研究组母鼠胆汁酸浓度与妊娠第17天时研究组以及对照组相比(F=5.43,P<0.05),差异有统计学意义。②胎鼠肝脏CYP7A1 mRNA、CYP27A1 mRNA、CYP8B1 mRNA表达:研究组中CYP7A1 mRNA(1.25±0.01)、CYP27A1 mRNA(2.05±0.03)、CYP8B1 mRNA明显高于对照组(0.35±0.02、0.75±0.03、0.85±0.02),P值均<0.05,差异有统计学意义。③胎鼠肝脏雌激素受体的表达:研究组中ERαmRNA(0.75±0.02)明显高于对照组ERαmRNA(0.45±0.01)。结论妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)孕鼠胎鼠肝细胞ER、CYP7A1、CYP27A1、CYP8B1的表达升高,胆汁酸的合成与代谢调节机制存在障碍,可能是导致ICP胎儿围生期死亡发生的原因之一。

基于体质学说思考女童带下病的治疗

个体在生理上的身心特性称为体质,体质学说是研究各种体质类型的生理、病理特点,并以此分析疾病的反应状态、病变的性质和发展趋向,指导预防和治疗的学说。随着健康管理模式的不断发展,体质学说在各个学科领域中越发重要,“因质制宜”已经成为中医治疗与预后的一个趋势。女童带下病是一种女童时期特有的疾病,经治疗后虽能痊愈,但具有较高的复发率,常影响患儿的生活质量。本文通过查阅文献总结三种体质学说对带下病的认识以及治疗带下病的思路,根据不同的体质学说,思考在临床治疗中如何通过纠正偏颇体质的方式来治疗女童带下病,以期为女童带下病的治疗提供参考。

儿童咳嗽变异性哮喘中医药治疗进展及优势分析

儿童咳嗽变异性哮喘(CVA)是一种由于气道高反应性,以慢性持续性干咳为唯一或主要临床症状的儿科常见肺系疾病。近年来,随着中医药发展,中医中药在治疗儿童CVA方面逐渐显示出其具独特的优势。通过对儿童CVA的中医药治疗进展进行综述及优势分析,以期为今后的临床研究提供参考。

InsR/FoxO1信号通路对妊娠胆汁淤积症子代大鼠下丘脑中POMC表达的影响

目的:探讨胰岛素受体(InsR)/胰岛素调节转录因子(Fox O1)信号通路对妊娠肝内胆汁淤积症出生后6个月子代大鼠下丘脑中阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)表达的影响。方法:40只清洁级SD孕鼠随机分为2组,每组20只。孕第13天时,对照组孕鼠皮下注射精制植物油2.0ml/(kg·d),ICP组孕鼠皮下注射17-α-乙炔雌二醇1.0mg/(kg·d),直至孕21天。从ICP组和对照组出生子代中各随机选取雌性20只喂养至6月龄。分别在出生后1个月、3个月、6个月断尾取血。6月龄时进行糖耐量实验,检测血糖水平的变化。6月龄处死子代提取下丘脑组织,PCR法检测InsR、Fox O1及POMC mRNA表达。应用免疫组化法检测POMC在下丘脑弓状核的表达。结果:ICP组子代大鼠在出生时、1个月时体重明显低于对照组(P<0.05),6个月时体重与对照组比较无明显差异。6月龄时进行糖耐量实验,ICP 6月龄子代血糖水平在不同时间段均高于对照组子代水平,差异有统计学意义(P<0.05)。ICP组6月龄子代大鼠下丘脑中InsR、Fox O1A、POMC mRNA相对含量与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化结果显示,ICP子代鼠下丘脑中POMC阳性细胞数明显低于对照组。结论:ICP组由于存在高胆酸水平和不良的胎儿宫内生长环境,引发子代下丘脑调控能量稳定的信号通路改变,抑制食欲细胞减少,表现为饥饿状态,导致体重增加和血糖变化明显。

从脾论治青春期前女童带下病

外阴阴道炎是青春期前女童最常见的妇科疾病,各年龄段均有发病,可由多种原因引起。从中医角度而言,女童外阴阴道炎也属于“带下病”的范畴。带下病的治疗通常从“湿”论治,但是青春期前女童常具有儿童特有的特点,即脾常不足。“诸湿肿满,皆属于脾”,脾虚湿盛乃女童带下病的基本病机,因此在治则上依据病机进行清热、化湿、健脾、益气等疗法并配合外用药物,可增加疗效。

CYP7B1与ER在胆汁淤积孕鼠胎鼠肝脏中的表达

目的探讨雌激素受体（ERα、ERβ）与胆固醇7d羟化酶（CYP781）mRNA在妊娠期肝内胆汁淤积（ICP）孕鼠、胎鼠肝脏中的表达及其意义。方法对照组孕鼠30只注射精制植物油；研究组孕鼠30只注射17－α－乙炔雌二醇。两组孕鼠分别于妊娠第13天、17天、21天断尾采母鼠血检测，于妊娠第21天抽取母鼠、胎鼠血并提取肝脏组织。应用酶联免疫吸附试验检测两组孕鼠及胎鼠血清中胆酸水平；应用实时定量PCR技术检测两组胎鼠肝脏ERa、ERl3、CYP781mRNA的表达。结果①在妊娠第17天、21天研究组母鼠胆汁酸水平明显高于对照组（55．7±3．2μmol／Lvs23．4±1．2μmol／L。t=2．541，P〈0．05；61．4±2．4μmol／Lvs25．5±2．1μmol／L，t=2．621，P〈0．05）；研究组胎鼠胆汁酸水平明显高于对照组（27．4±2．3μmol／Lvs11．54-2．6μmol／L，t=2．631，P〈0．05）；②研究组胎鼠肝脏CYP781mRNA水平明显高于对照组（2．15±0．01vs0．25±0．02，t=2．563，P〈0．05）；⑧研究组ER仅mRNA水平明显高于对照组（0．81±0．02vs0．35±0．01，t=2．534，P〈0．01）。结论ICP孕鼠胎鼠肝细胞ER旺、CYP781的表达升高，胆汁酸的合成与代谢调节机制存在障碍，可能是导致ICP胎儿围生儿死亡发生的原因之一。

胆汁酸代谢主要调节核受体和相关基因在胆汁淤积孕鼠肝脏中的表达

目的探讨法尼醇x受体（FXR）、过氧化物酶增殖体激活受体a（PPARa）与胆固醇7a羟化酶（CYP7A1）、胆固醇27a羟化酶（CYP27A1）、胆固醇12a羟化酶（CYP881）mRNA在妊娠期肝内胆汁淤积孕鼠肝脏中的表达及其意义。方法将60只清洁级SD大鼠自孕第13天均分为3组，对照组：皮下注射精制植物油2．0ml·kg-1·d-1未治疗组：皮下注射17—a-乙炔雌二醇1．25mg·kg-1·d-1治疗组：皮下注射17-a-乙炔雌二醇1．25mg·kg-1.d-1，孕第17天起给予非诺贝特50mg·kg-1·d-1灌胃。3组孕鼠分别于妊娠第13、17、21天断尾采血2ml检测血清生物化学指标，并于妊娠第21天处死，提取肝脏组织。应用酶联免疫吸附法检测3组孕鼠血清中的胆酸水平；用实时定量PCR技术检测各组PPARa、FXR、CYP7A1、CYP27A1、CYP881mRNA的表达量。多组间的比较用方差分析，多组的两两间比较用Student-Newman-Keuls法检验，两组数据间比较用t检验。结果妊娠第17天，对照组、未治疗组、治疗组的胆汁酸水平分别为（26．6±2．3）mol／L、（68．7±4．2）umol／L、（69．5±3．8）umol／L，未治疗组和治疗组胆汁酸水平与对照组比较，t值分别为2．516、2．642，P值均〈0．05，差异均有统计学意义。治疗组与未治疗组之间胆汁酸水平比较，t=1．835，P〉0．05，差异无统计学意义；妊娠第21天，对照组、未治疗组、治疗组胆汁酸水平分别为（27．1±3．2）umol／L、（69．4±3．7）umol／L、（48．5±4．8）umol／L，3组比较，F=7．81，P〈0．05，差异有统计学意义。对照组、未治疗组、治疗组中CYP7AI mRNA的相对表达量分别为0．75±0．02、1．55±0．03、1．25±0．01，FXRmRNA的相对表达量分别为1．25±0．03、1．75±0．02、1．65±0．05，CYP27A1mRNA的相对表达量分别为0．65±0．03、2．45±0．01、1．65±0．02，CYP8B1mRNA的相对表达量分别为1．50±0．02、2．15±0．01、1．75±0．03，PPARamRNA的相对表达量分别为1．45±0．02、0．85±0．02、1．35±0．01。CYP7A1、FXR、CYP27A1、CYP8B1mRNA在未治疗组中的表达量与对照组相比，口值分别为6．554、5．613、8．126和6．143，P值均〈0．05，差异均有统计学意义。未治疗组中PPARamRNA的表达量与对照组相比，q=6．126，P〈0．01，差异有统计学意义。治疗组中CYP27A1、PPARamRNA、CYP8B1mRNA水平与未治疗组相比，口值分别为6．346、7．231和5．892，P值均〈0．05，差异均有统计学意义。结论胆汁酸的合成与代谢调节机制存在障碍，是导致妊娠期肝内胆汁淤积症发生的原因之一，用PPARa的激动剂对其有一定疗效。

过氧化物酶增殖体激活受体α、氧固醇7α羟化酶及雌激素受体问调控关系及其与孕鼠肝内胆汁淤积发生的相关性

目的 探讨过氧化物酶增殖体激活受体α（PPARα）、氧固醇7α羟化酶（CYP7B1）、雌激素受体（ER）α及ERβ之间的调控关系与孕鼠肝内胆汁淤积发生的相关性.方法 选择清洁级SD孕鼠80只,随机分为4组,每组20只,自孕第13天起：对照组孕鼠皮下注射精制植物油2.0ml·kg-1·d-1;低剂量组孕鼠皮下注射17-α-乙炔雌二醇（1.0 mg·kg-1·d-1）;中剂量组孕鼠皮下注射17-α-乙炔雌二醇（1.25 mg·lg-1·d-1）;高剂量组孕鼠皮下注射17-α-乙炔雌二醇（1.5 mg·kg-1·d-1）.4组孕鼠于妊娠第21天处死后提取肝脏组织.应用酶联免疫吸附试验检测各组孕鼠血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、门冬氨酸转氨酶（AST）、总胆酸（TBA）及胆红素（BIL）水平;应用实时定量PCR技术检测各组孕鼠肝脏组织中PPARα mRNA、CYP7B1 mRNA、ERα mRNA及ERβ mRNA的表达水平.结果 （1）生化指标：对照组孕鼠ALT、AST、TBA及BIL水平分别为（41.1±2.8）U/L、（44.4±3.6）U/L、（26.4±5.6）μmol/L、（2.8±0.2）U/L,低剂量组孕鼠分别为（48.2±3.4）U/L、（47.9±3.7）U/L、（36.4±4.2）μmol/L、（4.2±0.2）U/L,中剂量组孕鼠分别为（70.4±5.3）U/L、（68.4±5.6）U/L、（64.3±3.8）μmol/L、（6.2±1.2）U/L,高剂量组孕鼠分别为（72.4±7.6）U/L、（70.2±3.8）U/L、（72.4±7.8）μmol/L、（8.2±2.2）U/L.低剂量组、中剂量组、高剂量组孕鼠ALT、AST、TBA、BIL水平明显高于对照组（P〈0.05）;中剂量组、高剂量组孕鼠各生化指标水平明显高于低剂量组（P〈0.05）.（2）ERαmRNA及ERβmRNA表达水平：ERαmRNA的表达水平在低剂量组（0.76±0.02）、中剂量组（0.99±0.04）和高剂量组（1.21±0.01）孕鼠肝脏组织中呈逐渐升高趋势（P〈0.05）,并明显高于对照组（0.65±0.01）,分别与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;ERβ表达水平在4组孕鼠间分别比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）.（3）CYP7B1 mRNA及PPARα mRNA表达水平：CYP7B1 mRNA的表达水平在低剂量组（0.93±0.01）、中剂量组（0.99±0.06）和高剂量组（1.22±0.04）孕鼠肝脏组织中呈逐渐升高趋势（P〈0.05）,并明显高于对照组（0.75±0.02）,分别与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;PPARα mRNA表达水平在低剂量组（0.83±0.05）、中剂量组（0.71±0.02）和高剂量组（0.64±0.03）孕鼠肝脏组织中呈逐渐降低趋势（P〈0.05）,并明显低于对照组（1.35±0.05）,分别与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）.结论 随着雌激素剂量的增加,PPARα表达水平降低,对CYP7B1表达的抑制作用解除,而导致CYP7B1表达水平升高;而CYP7B1有促进ERα高表达的作用,最终由ERα介导了雌激素诱导的肝内胆汁淤积的发生.提示PPARα、CYP7B1及ER的异常表达,是调控雌激素诱导孕鼠肝内胆汁淤积的发生机制之一.

妊娠期肝内胆汁淤积症孕鼠子代胆固醇代谢与胰岛素抵抗及相关基因在肝脏中的表达

目的探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)孕鼠子代在出生后不同时期血清胆固醇、甘油三酯、瘦素、胰岛素、皮质醇、高密度脂蛋白与低密度脂蛋白水平的变化及胆固醇7-羟化酶(CYP7A1)、过氧化物酶增殖物激活受体(PPARγ)、低密度脂蛋白受体(LDLR)在12月龄鼠肝脏中的表达。方法选取40只清洁级SD孕鼠,随机分为对照组和ICP组,每组20只,自孕第13天起对照组孕鼠皮下注射精制植物油2.0 ml·kg-1·d-1;ICP组孕鼠皮下注射17-α-乙炔雌二醇1.0 mg·kg-1·d-1至分娩。两组各随机选取低雌性和雄性小鼠各20只喂养至12月龄。分别在出生后1个月、3个月、6个月及12个月断尾取血,应用酶学反应方法检测血浆甘油三酯和胆固醇水平;应用特异的鼠放射免疫法测定血浆胰岛素、瘦素以及皮质醇水平;在6月龄时进行糖耐量实验,检测血糖水平的变化;在12月龄处死后提取肝脏组织,应用PCR检测CYP7A1、PPARγ、LDLR mRNA的表达。结果在子代6月龄时进行糖耐量实验,发现无论雌性和雄性鼠,ICP组6月龄子代血糖水平在不同时间段均高于对照组子代水平,差异有统计学意义(P<0.05)。ICP组12月龄子代雌性和雄性CYP7A1 mRNA、LDLR mRNA水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PPARγmRNA水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。随着月龄的增加,ICP组雌性和雄子代的血胆固醇、甘油三酯、瘦素、胰岛素、皮质醇、低密度脂蛋白水平逐渐升高,在6月龄和12月龄时与对照组子代相比,差异有统计学意义(P<0.05);高密度脂蛋白水平降低,在6月龄与12月龄时与对照组子代相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ICP存在高胆汁酸水平,会造成不良的胎儿宫内生长环境,是导致子代代谢疾病发生的原因之一。

产妇血、乳汁和尿中铅、镉含量水平60例分析

【目的】研究母亲体内铅、镉含量以及与母乳、母尿之间关系,指导孕期保健和母乳喂养。【方法】应用石墨炉原子吸收仪测定60例产妇血、乳汁和尿中铅与镉含量。【结果】60例产妇血铅含量平均水平0.497μmol/L,46.6%的产妇血铅高于0.483μmol/L,产妇血铅与母乳铅含量差异有显著性(P<0.05)。产妇血铅水平在0.483μmol/L左右时,母乳中铅含量较低。母血中镉含量与母乳中含量基本相同,两者差异无显著性(P>0.05)。【结论】应积极开展孕妇血铅水平的监测及预防;母乳中铅含量对婴儿的影响较小,母乳喂养对于婴儿是安全的。