TFPI对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及其机制初探

[目的]探究组织因子途径抑制物(TFPI)对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)及心肌细胞缺氧复氧(H/R)损伤的影响,并从心肌细胞凋亡的变化探索其机制。[方法]在体内实验中,通过SD大鼠心脏原位结扎法可逆阻断前降支建立大鼠心肌I/R模型。将大鼠随机分为对照组、I/R组和I/R+rTFPI(重组TFPI)组,再灌注后3天采用HE染色观察大鼠心肌组织形态学变化,TTC染色法评估心肌梗死区范围,扫描透射电镜观察心肌超微结构损伤情况,Western blot法检测各组大鼠心肌组织中Bcl-2、Bax和cleaved Caspase-3蛋白的表达。在体外实验中,采用胰酶消化法及差速贴壁法培养SD乳鼠原代心肌细胞,用MIC101系统模拟心肌细胞I/R损伤,缺氧2 h、复氧12 h后建立体外心肌细胞H/R模型。将心肌细胞分为对照组、H/R组和H/R+rTFPI(10μg/L)组,用CCK-8法检测心肌细胞活力,TUNEL法检测心肌细胞凋亡率,Western blot法检测心肌细胞中Bax、Bcl-2及cleaved Caspase-3蛋白的表达水平。[结果]体内实验中,成功建立大鼠在体心肌I/R模型。HE染色结果显示I/R组较对照组心肌细胞坏死程度加重,I/R+rTFPI组较I/R组心肌细胞坏死程度减低;TTC染色示I/R+rTFPI组较I/R组心肌梗死范围减少了39.76%(P<0.05);扫描透射电镜观察显示I/R组凋亡及损伤程度较对照组加重,I/R+rTFPI组凋亡及损伤较I/R组减轻;Western blot结果示,再灌注3天后I/R组心肌组织Bcl-2的表达较对照组降低了53.43%(P<0.05),Bax和cleaved Caspase-3的表达较对照组分别增加了29.05%和73.25%(P<0.05),而I/R+rTFPI组Bcl-2的表达水平较I/R组升高了55.01%(P<0.05),Bax和cleaved Caspase-3的表达水平较I/R组分别降低了13.77%和24.25%(P<0.05)。在体外实验中,CCK-8检测结果显示H/R组细胞活力较对照组下降了29.70%(P<0.05),H/R+rTFPI组细胞活力较H/R组升高了19.77%(P<0.05)。TUNEL结果显示H/R组较对照组凋亡率增加了56.76%,H/R+rTFPI组细胞凋亡率较H/R组降低了24.55%(P<0.05)。Western blot结果示,H/R组细胞Bcl-2表达较对照组降低了46.92%,Bax表达较对照组增加了41.90%(P<0.05),cleaved Caspase-3表达较对照组升高了2.68倍(P<0.05);H/R+rTFPI组Bcl-2表达较H/R组增加了28.24%(P<0.05),Bax及cleaved Caspase-3表达较H/R组分别降低了26.34%和57.60%(P<0.05)。[结论]TFPI可显著拮抗心肌I/R和心肌细胞H/R损伤,此效应与其抑制心肌细胞凋亡有关。

组织因子途径抑制物调控细胞凋亡与冠心病

细胞凋亡是机体的一种适应性反应,生理性的细胞凋亡对于细胞生长、生存及维持人体内环境稳定至关重要。然而过度凋亡可能促进冠状动脉粥样硬化、心肌缺血/再灌注损伤以及缺血后心脏重塑等。组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor,TFPI)除了可以抗凝、抗栓,还具有诱导细胞凋亡的作用。因此,探讨冠心病中TFPI对细胞凋亡的影响,可为冠心病的治疗提供新的途径。

组织因子途径抑制物在心血管疾病中的研究现状

组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor,TFPI)是一种在生理条件下血液中天然存在的抗凝物质,通过作用于依赖组织因子(tissue factor,TF)的外源性凝血途径对体内凝血系统起调节作用。近年来研究发现,TFPI可对多种疾病的诊断与治疗发挥作用,其中对于冠心病(coronary heart disease,CHD)、动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)、心房颤动(atrial fibrillation,AF)、妊娠期高血压等心血管疾病的作用尤为突出。本文将从TFPI的结构、功能特性以及其对心血管疾病的诊疗作用进行综述。

别和椅子太亲密

坐是我们最正常不过的生理需求了。我们坐着吃饭，坐着乘车，坐着办公，坐着学习，坐着娱乐，就连去洗手间使用的都是坐便。坐是舒适的。是惬意的，是享受的。但长时间的久坐那就未必是享受了。