Ngn2调节Nrf2/HO-1对脑缺血模型大鼠脑微结构、角质细胞活性的影响

背景:研究显示,血红素氧化酶1(heme oxidase-1,HO-1)在脑缺血再灌注损伤中具有重要作用;核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid2-related factor2,Nrf2)能减轻脑缺血再灌注损伤,其作用是通过调控下游抗氧化蛋白实现的;推测Nrf2/HO-1在脑部疾病中均有一定的调控作用。目的:探究神经源素2(neurogenin 2,Ngn2)通过调节Nrf2/HO-1对脑缺血大鼠脑微结构、角质细胞活性的影响。方法:SPF级雄性SD大鼠55只,随机取10只为健康组不进行干预;其余大鼠建立脑缺血模型,将建模成功的40只大鼠随机分为4组:其中模型组大鼠脑内注射生理盐水;Ngn2组大鼠脑内注射Ngn210 mg/kg;Nrf2/HO-1组脑内注射HO-1及Nrf2激动剂莱菔硫烷各10 mg/kg;联合调节组脑内注射Ngn2并联合Nrf2/HO-1组用药,均连续给药3 d。分数各向异性图像观察脑微结构,苏木精-伊红染色观察脑组织的病理形态,TUNEL法检测神经胶质细胞凋亡,免疫印迹和PCR分别检测Nrf2、HO-1的蛋白及mRNA表达。结果与结论:(1)与健康组比较,模型组大鼠脑组织中梗死灶周围皮质、梗死核心相对分数各向异性值表达较低(P<0.05);与模型组比较,Ngn2组及Nrf2/HO-1组上述表达升高(P<0.05);联合调节组上述表达高于Ngn2组及Nrf2/HO-1组(P<0.05);(2)模型组大鼠大量损伤神经元,细胞稀疏,排列紊乱,大量浸润;Ngn2组与Nrf2/HO-1组损伤侧神经元好转,仍见神经细胞缺失紊乱及细胞黏附;联合调节组脑组织神经细胞坏死减轻,浸润改善;(3)与健康组比较,模型组大鼠神经胶质细胞凋亡较高(P<0.05);与模型组比较,Ngn2组及Nrf2/HO-1组神经胶质细胞凋亡降低(P<0.05);联合调节组神经胶质细胞凋亡低于Ngn2组及Nrf2/HO-1组(P<0.05);(4)与健康组比较,模型组大鼠脑组织Ngn2mRNA及Nrf2、HO-1的蛋白和mRNA表达较低(P<0.05);与模型组比较,Ngn2组、Nrf2/HO-1组Ngn2 mRNA及Nrf2、HO-1的蛋白和mRNA表达升高(P<0.05);联合调节组Ngn2 mRNA及Nrf2、HO-1的蛋白和m RNA表达高于Ngn2组及Nrf2/HO-1组(P<0.05);(5)结果说明,Ngn2通过调节Nrf2/HO-1对脑缺血大鼠产生保护作用,其机制可能与改善脑微结构、角质细胞活性以及增强Nrf2、HO-1表达等具有一定相关性。

肺癌相关急性缺血性脑卒中临床特征及危险因素分析

目的探讨肺癌相关急性缺血性脑卒中的临床特征及危险因素,为临床诊治提供依据。方法对122例肺癌相关急性缺血性脑卒中患者的临床资料进行回顾性分析,依据出现肺癌或脑卒中首发就诊疾病的先后顺序将其分为脑卒中首发组(56例)和肺癌首发组(66例),分析其临床特征,并对肺癌相关急性缺血性脑卒中危险因素进行单因素分析及单因素回归分析、多元Logistic回归分析。结果肺癌相关急性缺血性脑卒中患者多为老年、男性,吸烟者占59.02%,病理类型以腺癌(59.60%)为主,发现时肿瘤常已多发转移(84.75%),患者多存在血液高凝状态(73.77%)及抑郁状态(61.62%),且同时累及多支脑动脉(64.29%)导致多发脑梗死(76.53%)。两组性别、双侧前后循环梗死、合并其他部位血栓、放化疗、纤维蛋白降解产物、D-二聚体、治疗后美国国立研究院卒中量表评分及改良Rankin量表评分方面比较差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。多元Logistic回归分析结果显示,男性、吸烟、腺癌是肺癌相关急性缺血性脑卒中的独立危险因素(P<0.05或0.01)。结论临床发现同时累及多支脑动脉的急性多发性脑梗死应警惕肺癌相关急性缺血性脑卒中的可能,此类患者常存在血液高凝状态及抑郁状态。男性、吸烟、腺癌是其独立危险因素;以急性缺血性脑卒中为首发起病者30天预后较好,血液高凝状态相对较轻,易被漏诊和误诊。

miR-497-5p靶向AKT3对缺血/再灌注损伤诱导的神经细胞氧化应激和炎症反应的影响

目的探究miR-497-5p对缺血再灌注诱导的神经细胞氧化应激和炎症反应的影响以及潜在的作用机制。方法采用小鼠海马神经元细胞构建氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤模型;氧糖剥夺后复氧6 h、12 h、24 h,检测氧化应激指标的含量,酶联免疫吸附实验检测炎症因子的水平,实时荧光定量PCR检测miR-497-5p的表达水平。检测miR-497-5p mimic和inhibitor的转染效率。双荧光素酶报告实验分析miR-497-5p与AKT3的靶向关系;蛋白质印迹检测miR-497-5p对AKT3表达水平的影响。miR-497-5p inhibitor与AKT3 siRNA单独或共转后OGD/R,检测氧化应激和炎症反应的变化;蛋白质印迹检测叉头转录因子O3(FOXO3)、核因子κB(NF-κB)的表达水平的变化。结果神经细胞经氧糖剥夺复氧后,细胞中ROS和MDA的含量显著升高,SOD的活性显著降低;白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量显著升高,miR-497-5p的含量显著升高。miR-497-5p与AKT3存在靶向抑制关系。miR-497-5p inhibitor转染神经细胞后OGD/R,细胞中氧化应激和炎症反应被抑制,细胞凋亡率显著减低;FOXO3、NF-κB的表达水平显著降低。AKT3 siRNA缓解miR-497-5p inhibitor对OGD/R模型氧化应激、炎症反应、细胞凋亡和FOXO3、NF-κB表达水平的影响。结论 miR-497-5p靶向抑制AKT3的表达,促进OGD/R模型氧化应激和炎症反应。

miR-145-5p靶向FGF5对缺血/再灌注损伤诱导的神经细胞凋亡和氧化应激的调控作用

目的研究miR-145-5p对体外缺血/再灌注(I/R)损伤神经细胞模型的调控作用,并探讨其机制。方法运用氧-葡萄糖剥夺/复氧(OGD/R)建立脑缺血/再灌注损伤细胞模型。采用荧光素酶报告实验验证miR-145-5p与FGF5的靶向关系;RT-PCR、流式细胞术、Western blot等方法检测miR-145-5p对神经细胞HT22的凋亡和氧化应激损伤的影响。结果结果表明,与未进行OGD/R处理组(Normoxia组)相比,OGD/R处理6 h、12 h、24 h组凋亡率和氧化应激损伤明显增加。在OGD/R环境下,miR-145-5p inhibitor转染减轻HT22细胞凋亡和氧化应激损伤。然而,转染FGF5 siRNA逆转了这一效应。在OGD/R模拟的脑I/R损伤过程中,miR-145-5p通过靶向FGF5促进神经细胞凋亡和损伤。结论研究结果为缺血性脑卒中的治疗提供了一种新的治疗靶点。

尤瑞克林治疗老年急性脑梗死的疗效及对血清CRP与尿酸和血液流变学的影响

目的探讨尤瑞克林对老年急性脑梗死(ACI)的治疗疗效及其对血清CRP、尿酸和血液流变学的影响。方法选择80例老年ACI患者,按入院顺序随机平均分为对照组和研究组各40例,两组患者入院后均给予常规ACI对症治疗,研究组患者在此基础上加用尤瑞克林注射液治疗。比较两组患者治疗后NIHSS评分及疗效;检测并比较两组患者治疗前后血清CRP、尿酸及血液流变学的变化。结果研究组患者治疗后NIHSS评分为(6.86±4.56)分,显著低于治疗前及对照组,治疗总有效率为87.5%,明显高于对照组的72.5%,差异有统计学意义(均P<0.05);研究组患者治疗后血清CRP和尿酸水平分别为(10.78±5.34)mg/L和(150.34±85.87)mg/L,明显低于对照组的(15.24±6.48)mg/L和(279.34±110.45)mg/L,组间差异有统计学意义(均P<0.05);研究组患者治疗后全血黏稠度及血小板聚集率分别为(4.01±0.31)mPa·s及(51.68±10.45)%,明显低于对照组的(5.02±0.32)mPa·s及(60.23±11.04)%,组间差异有统计学意义(均P<0.05)。结论尤瑞克林治疗老年急性脑梗死疗效显著,值得临床推广应用。

颅内大动脉狭窄性缺血性脑卒中患者不同时间点侧支循环的功能评价

目的观察颅内大动脉狭窄性卒中患者在不同时间点脑血流灌注各参数的变化情况及探讨侧支循环的功能评价。方法收集2017年3月至2018年4月就诊于新乡医学院第一附属医院神经内科的45例颈内动脉颅内段或大脑中动脉中重度狭窄/闭塞的急性缺血性脑卒中(AIS)患者,所有患者均于发病7d内行CT灌注(CTP)检查,其中20例患者在3个月、15例患者在6个月、10例患者在12个月复查CTP。对不同随访时间点进行对比分析患侧脑血流量(CBF)参数、改良Rankin量表(mRS)评分及CTP各参数包括相对脑血流量(rCBF)、相对脑血容量(rCBV)、相对平均通过时间(rMTT)、相对达峰时间(rTTP)和相对延迟时间(rDelay)。结果3个月复查时有50%的患者CBF参数无明显改变,甚至有30%的患者CBF在进行性下降,仅有20%的患者CBF参数增加;6个月复查时,有47%的患者CBF无明显改变,有20%的CBF在进行性下降,有33%的CBF增加;12个月复查时,有40%的患者CBF无明显改变,有20%的CBF在进行性下降,而有40%的CBF增加。且在12个月时患者mRS评分有所下降(P<0.05)。3个月访视组CTP各参数表现为缺血半暗带区rCBV、rTTP、rDelay均较发病时下降,差异有统计学意义(P<0.01);6个月时CTP表现为缺血半暗带区rMTT、rTTP和rDelay均较发病时下降,差异有统计学意义(P<0.01);12个月时CTP表现为缺血半暗带区rCBF增多,r MTT、rTTP和rDelay均较发病时下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论CTP中CBF参数在不同时间点均有增加及下降的改变;不同时间点CTP各参数变化不同,TTP、Delay、MTT时间参数变化较早,CBF和CBV参数变化较晚,且在12个月复查CTP中CBF增加最明显,且患者预后较好,更能间接反应侧支循环建立及预后情况。

神经肽Y、神经元特异性烯醇化酶水平与缺血性卒中神经功能损害和认知障碍的相关性研究

目的探索神经肽Y(NPY)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平与缺血性卒中神经功能损害和认知障碍的相关性。方法选取2018年6月至2019年6月新乡医学院第一附属医院诊治的缺血性卒中患者42例作为观察组,另选取同期至新乡医学院第一附属医院体检且结果健康的成年人48例作为对照组。对两组NPY水平、NSE水平、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、认知评估量表(MoCA)评分进行对比,并应用Pearson相关性分析对NPY、NSE水平与NIHSS评分、MoCA总评分相关性进行分析。结果观察组NPY、NSE水平均高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。观察组MoCA总评分及各项评分均低于对照组,NIHSS评分高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。观察组NPY、NSE水平均与NIHSS评分呈正相关,与MoCA总评分呈负相关(均P<0.05)。结论NPY、NSE水平与缺血性卒中神经功能损害和认知障碍具有较强的相关性,可用于判断患者神经功能损害和认知障碍情况。

尾静脉注射AMPKα1高表达腺病毒对抑郁症模型大鼠线粒体损伤和代谢的调节作用

目的:探究尾静脉注射腺苷酸活化蛋白激酶α1(AMPKα1)高表达腺病毒对抑郁症模型大鼠线粒体损伤和代谢的调节作用。方法:采用不可预见温和应激法建立大鼠抑郁症模型,尾静脉注射AMPKα1高表达腺病毒。Morris水迷宫实验评价大鼠记忆力,旷场实验评价大鼠自主探究行为,HE染色观察大鼠海马和前额叶皮质区病理改变情况,Western blot检测AMPKα1、Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9、PGC-1α和GLUT4蛋白表达,试剂盒检测SOD、MDA和LDH含量,RT-PCR检测AMPKα1、PGC-1α和GLUT4 mRNA表达。结果:与CUMS+Ad-NC组相比,CUMS+Ad-AMPKα1组大鼠AMPKα1 mRNA和蛋白表达显著上调,逃避潜伏期时间显著缩短,目标象限记忆时间显著延长,水平活动次数和垂直站立次数显著增加,脑损伤显著减轻,Bcl-2蛋白表达显著上调,Bax、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达显著下调,SOD含量显著增多,LDH和MDA含量显著减少,PGC-1α和GLUT4表达显著上调。结论:尾静脉注射AMPKα1高表达腺病毒可改善抑郁症模型大鼠学习记忆能力、自主探究行为和糖代谢,缓解脑损伤、线粒体损伤和氧化应激,从而缓解抑郁症。

脑出血患者微创血肿引流术后局部注入地塞米松疗效观察

目的观察脑出血患者微创血肿引流术后血肿腔内注入地塞米松的疗效。方法80例经微创血肿引流术治疗的脑出血患者按治疗方式分为观察组与对照组各40例。观察组微创血肿引流术后血肿腔内注入地塞米松5mg／d，连用5d，对照组除不注入地塞米松外，治疗方法与观察组相同。比较2组神经功能缺损评分和血肿周围水肿大小。结果观察组微创术后7d和15d血肿周围水肿在地塞米松组比对照组减轻，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；观察组患者术后7d和15d神经功能缺损评分均较对照组明显改善，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。观察组治疗过程中未见相关药物不良反应。结论微创血肿引流术后血肿腔内注入地塞米松可明显减轻脑血肿周围水肿，并促进脑出血患者的神经功能恢复，目．较为安全。

化脓性脑膜炎血液中性粒细胞CD64的测定及临床意义

目的:探讨中性粒细胞CD64、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平在化脓性脑膜炎中的诊断价值。方法:选取化脓性脑膜炎患者30例及病毒性脑炎患者36例为研究对象,非中枢神经系统疾病患者32例作为对照组,采用流式细胞术测定各组血液中性粒细胞CD64的表达,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定各组血液中TNF-α的含量。结果:化脓性脑膜炎组中性粒细胞CD64的表达水平显著升高,分别与病毒性脑炎组和对照组比较差异有显著性(P<0.01),化脓性脑膜炎组TNF-α的水平显著升高,分别与病毒性脑炎组和对照组比较差异有显著性(P<0.01)。CD64诊断化脓性脑膜炎的敏感度为87%,特异度为88%;TNF-α诊断化脓性脑膜炎的敏感度为66%,特异度为62%。结论:化脓性脑膜炎患者外周血中性粒细胞CD64的表达明显增高,提示中性粒细胞CD64可以作为诊断化脓性脑膜炎的可靠的实验室指标。

依达拉奉治疗脑梗死疗效观察

目的:观察依达拉奉治疗脑梗死的疗效。方法:80例入选的脑梗死患者被分为2组。对照组40例给予常规治疗,观察组40例在常规治疗基础上加用依达拉奉30mg,ivgtt,q12h。结果:治疗后14d,脑脊液中的TNF-α在依达拉奉治疗组明显比对照组减少(P<0.05);依达拉奉治疗组治疗14d的神经功能缺损评分均比对照组明显改善(P<0.05)。结论:依达拉奉能有效改善急性脑梗死的神经功能缺失,疗效好,值得临床推广应用。

脑梗死预后与血糖水平关系的研究

目的:探讨脑梗死患者的临床预后与血糖水平的关系。方法:对发病后2～3月住院及门诊复查的387例颈内动脉系统脑梗死患者日常生活能力(ADL)进行Barthel评分,根据其急性期Barthel评分比较分为临床转归良好组(评分提高>15分)和临床转归差组(评分提高<15分),回顾性分析患者急性期血糖水平。结果:临床转归差组较临床转归良好组急性期血糖水平显著增高(P<0.01)。结论:血糖水平增高使脑梗死患者临床转归更差。

一氧化碳中毒迟发脑病治疗体会

目的探讨高压氧联合椎管内注药治疗一氧化碳中毒迟发性脑病的疗效。方法入选50例一氧化碳中毒迟发性脑病患者随机分成两组,观察组在常规治疗基础上应用椎管内注药治疗,治疗前后分别对患者进行脑电图、临床疗效分析。结果常规治疗后临床症状明显改善,脑电图也较治疗前明显改善。临床症状的改善与疗程和脑电图的好转有相关性,观察组较对照组疗效显著,有统计学差异(P<0.05)。结论高压氧联合椎管内注药治疗一氧化碳中毒迟发性脑病疗效显著,脑电图对临床诊断和治疗有指导意义。

颅内静脉窦血栓形成30例临床分析

目的分析颅内静脉窦血栓形成的诊断及治疗。方法回顾性分析30例颅内静脉窦血栓形成患者的起病形式、可能病因、临床表现、影像学特征、脑脊液检查及治疗结果,并分析静脉用药及颈动脉用药疗效。结果患者多亚急性起病,病因多样,临床表现多为高颅压综合征,脑脊液压力多数升高,影像学表现静脉血流减慢、闭塞,脱水、抗凝治疗疗效佳,颈动脉用药优于静脉用药。结论在高危因素存在下,出现高颅压症状,精神症状、肢体瘫痪等,应考虑颅内静脉窦血栓形成,及早行血管检查(MRV或DSA),诊断明确后早期应用溶栓治疗,特别是颈内动脉用药疗效好。

原发性低颅压综合征的临床特点及治疗

目的:探讨原发性低颅压综合征的临床特点及治疗方法。方法:回顾性分析19例原发性低颅压综合征患者的临床表现和特点。结果:所有病例均有头痛,且头痛与体位密切相关,坐位或站位时头痛加重,平卧位时头痛减轻或消失,头痛部位位于枕部6例,额部5例、顶部及枕部各2例,全头痛4例;伴随症状有恶心、呕吐15例,头昏11例,眩晕4例,耳鸣2例,视物模糊2例;体征有颈项强直8例,病理征阳性2例。结论:认识原发性低颅压综合征的临床特点和特征对及时诊断有重要价值,

醒脑静治疗脑梗死96例疗效分析

目的观察醒脑静治疗脑梗死的疗效。方法96例入选的脑梗死患者随机分为2组。对照组48例病人给予常规治疗,观察组48例病人在常规治疗基础上应用醒脑静30mlivgttqd。结果两组间发病时间及神经功能缺陷无显著差异(P>0.05),治疗后30d,醒脑静治疗组神经功能缺损评分与对照组比较有统计学差异(P<0.05),观察组血液中的C-反应蛋白含量与对照组比较明显降低(P<0.05)。结论醒脑静能有效改善急性脑梗死的神经功能缺失,疗效好值得临床推广应用。

2015-2016年我院儿科门诊治疗呼吸系统疾病的口服用药使用分析

目的:为临床儿科口服用药的合理应用提供依据。方法:选取2015年1月-2016年12月我院儿科门诊收治的1 070例呼吸系统疾病患儿的口服用药处方,对药物类别、使用频率、用药合理性及处方规范性等方面情况进行回顾性分析。结果:1 070例患儿中,0~1岁和2~5岁年龄段分别占26.45%和37.76%,占比较高;主要疾病类型方面扁桃体炎和支气管炎分别占48.60%和15.42%,占比较高。抗菌药物、中成药(止咳平喘药)、辅助用药等几类药使用频率较高,分别为51.78%、27.85%、28.79%;在抗菌药物中,青霉素类+β-内酰胺酶抑制剂和第二代头孢菌素类使用频率较高,分别为43.74%和40.84%。用药合理率为92.15%,用药不合理率为7.85%;用药不合理表现为药物数量偏多(2.34%)、药物剂量偏大(2.06%)、药物剂型不合理(2.24%)和抗菌药物使用不合理(5.05%)。处方规范率为91.31%,处方不规范率为8.69%;处方不规范均表现为药物处方书写不规范。结论:统计时段内我院儿科门诊的呼吸系统疾病患儿常用的口服用药为抗菌药物、中成药(止咳平喘药)及辅助用药,且第二代头孢菌素类抗菌药物使用频率最高;用药合理性及处方规范性总体较好,但在药物数量、剂型、剂量及抗菌药物使用等方面仍存在不合理之处,且药物处方书写不规范的问题仍然存在。

联合应用尤瑞克林治疗缺血性脑卒中对患者执行功能的影响

目的观察尤瑞克林治疗对缺血性脑卒中患者后期执行功能的影响。方法 98例缺血性脑卒中患者随机分为治疗组与对照组,根据卒中治疗指南,两组均给予常规基础治疗,治疗组在此基础上联合尤瑞克林治疗,分别于治疗21d及3m后对两组患者采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)、简明智能状态量表(MMSE)、威斯康星卡片分类测验(WCST)进行神经心理学测验,评估执行功能。结果在21d测试中,治疗组仅在WCST中持续性错误数少于对照组(P<0.05),完成分类数多于对照组(P<0.05),但在3m后,治疗组MoCA总分高于对照组(P<0.01),治疗组MMSE成绩显著高于对照组(P<0.05),治疗组错误应答数明显减少(P<0.05),持续性错误数也明显减少(P<0.01),完成分类数增多(P<0.01)。与21d测验成绩相比,3m后第2次测验,治疗组成绩所有下降均不明显(P>0.05),而对照组MoCA总分及MMSE成绩显著下降(P<0.05),WCST持续性错误次数明显增多(P<0.01),完成分类数明显减少(P<0.01)。结论联合尤瑞克林治疗缺血性脑卒中可有效阻止患者视空间能力、认知灵活性、工作记忆等多项执行功能减退,预防血管性认知功能障碍的发生。

头体针配合心理干预治疗中风后抑郁症临床观察

目的观察头体针配合心理干预治疗中风后抑郁症的效果。方法将78例中风后抑郁症患者分为治疗组(40例)与对照组(38例),两组患者根据病情均给予常规的神经科治疗,治疗组加用头体针配合心理干预,对照组给予盐酸氟西汀(百忧解)口服治疗。每日1次,4星期为1个疗程,两组均治疗2个疗程。分别于治疗前、第1疗程后、治疗后用汉密顿抑郁量表(HAMD)评分及临床神经功能缺损评分(NISS)评定两组患者的疗效。结果治疗后两组患者HAMD和NISS评分均明显低于治疗前,且治疗组优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组抑郁总有效率和神经功能恢复总有效率均明显高于对照组(P<0.05)。结论头体针结合心理干预治疗中风后抑郁症有良好的抗抑郁和促进神经功能恢复作用。

中青年进展性脑卒中患者病因分型及危险因素分析

目的：分析中青年进展性脑卒中患者的危险因素。方法根据病情，将同时期29～60岁急性缺血性脑卒中患者140例，为低分子肝素急性卒中试验（ TOAST）分型大、小血管病变型，分为进展性卒中组70例，即研究组；完全性卒中患者70例，即对照组。比较研究组和对照组的一般资料、生物化学指标及头颅影像学的不同。结果高血压病史、嗜酒史、入院时所测收缩压、大血管病变、低密度脂蛋白、超敏C反应蛋白（hs-CRP）及同型半胱氨酸（Hcy）浓度两组间比较差异有统计学意义（P＜0．05，P＜0．01）；多元逐步回归分析发现血清Hcy浓度、hs-CRP浓度及LDL正相关。结论中青年患者进展性卒中的危险因素为高血压病史、嗜酒史、大血管病变、LDL、发病时收缩压、血清hs-CRP 和血清Hcy。血清Hcy浓度升高可能为中青年进展性卒中患者的独立危险因素。