宁夏某羊场绵羊肺炎支原体的分离鉴定及病理组织学观察

为了确定宁夏某羊场发生一起以体温升高、咳嗽、呼吸困难为临床特征且具有传染性的疾病的病原,采集濒死病羊的病理组织,应用细菌分离培养、分子生物学鉴定、病理组织学观察及免疫组织化学分析等方法对采集的病料进行病原检测和诊断。结果显示,细菌分离培养获得3株支原体分离株,分子进化分析发现其均属于绵羊肺炎支原体,与国际标准株Y-98的序列一致性为100%。病理组织学观察显示,肺泡上皮细胞坏死、增生,支气管管腔内和肺泡腔内大量炎性细胞浸润,支气管和气管黏膜上皮细胞坏死、脱落、固有层水肿、炎性细胞浸润。对不同脏器的免疫组织化学分析显示,绵羊肺炎支原体主要集中于肺脏和气管内,且肺脏的阳性组织百分比最高,其次是支气管和气管。结合疫病的流行病学调查,该羊场所发疾病为运输应激后感染绵羊肺炎支原体导致,该病原侵染并定植于肺脏、气管及支气管上皮细胞,引起羊严重的呼吸道病症。

牛支原体病实验室诊断技术研究进展

牛支原体病是由牛支原体引起的以肺炎、关节炎、乳腺炎等为主要症状的传染病,该病分布范围广,给养牛业造成了巨大经济损失。当前尚无有效的疫苗防治牛支原体病,但快速且准确的诊断方法能够预防和控制该病的流行。本文就牛支原体病的病原学诊断、免疫学诊断、血清学诊断和分子生物学诊断方法进行综述,旨在为该病的诊断和治疗提供参考依据。

5个绵羊群体GDF9基因多态性与产羔数的关联分析

为探究绵羊GDF9基因编码区多态性与繁殖性能的遗传效应,以杜泊羊、滩寒羊、杂一代、杂二代和横交一代5个绵羊群体为研究对象,利用Sequenom Mass ARRAY? SNP技术对5个绵羊群体GDF9基因的4个错义突变位点进行检测,并与产羔数进行关联分析。结果显示,rs425223128、rs597009987和rs415699275位点基因型均为纯合型,rs160076408位点在5个群体中存在CC、TC、TT等3种基因型。对rs 160076408位点不同基因型与5个群体的产羔数进行关联分析,结果表明,rs160076408位点在杂一代群体中与产羔数有一定的关联性,其中TC基因型产羔数显著高于CC基因型(P<0.05)。可见,rs160076408位点适用于杂一代绵羊群体多羔性状的选育。生物信息学分析表明,绵羊GDF9蛋白理论等电点为9.08,不稳定系数为54.43,为不稳定的碱性蛋白;脂肪系数为77.31,总平均亲水性为-0.404。rs 160076408位点突变前后GDF9蛋白的二级结构类型发生了变化。蛋白质互作网络分析表明,GDF9蛋白与调控动物繁殖的相关蛋白质互作。

5个绵羊群体PRLR基因多态性与产羔数的关联分析

为探究绵羊PRLR基因多态性与产羔性状的相关性,以杜泊羊、滩寒羊、杂一代、杂二代、横交一代5个绵羊群体为研究对象,利用Sequenom MassARRAY^(■)SNP技术对5个绵羊群体PRLR基因rs420297088、rs1090506607、rs600947105、rs601570033、rs590565409等错义突变位点进行检测,并与5个绵羊群体产羔数进行关联分析。结果表明:PRLR基因的5个位点在杜泊羊、滩寒羊、杂一代、杂二代、横交一代等5个群体中均表现为低度多态(PIC<0.25);卡方适合性检验结果表明,PRLR基因的5个SNPs在5个绵羊品种中均表现为哈代-温伯格平衡状态(P>0.05)。对5个位点的不同基因型与5个群体的产羔数的关联分析结果表明,各基因型之间产羔数差异均不显著(P>0.05),说明这5个位点不适用于5个绵羊群体多羔性状的选育。

绵羊肺炎支原体和多杀性巴氏杆菌混合感染的诊断、病理组织学观察和耐药性分析

为了诊断一起绵羊群发性呼吸道疾病的发病原因,采集病羊肺脏,用血平板及Thiaucourt's培养基对致病菌进行分离培养,通过病原形态学初步鉴定病原菌;采用细菌16S rRNA通用引物以及多杀性巴氏杆菌和绵羊肺炎支原体特异性引物对分离菌株进行分子生物学鉴定;对病羊肺脏进行病理组织学观察;并对不同分离株进行抗生素敏感性试验。结果发现,6份病料中分离鉴定出绵羊肺炎支原体6株、多杀性巴氏杆菌6株;病羊肺组织出现支气管上皮细胞脱落,局部区域肺泡膈增厚,肺泡上皮细胞坏死,伴有少量纤维素样渗出,少量淋巴细胞散在浸润,巨噬细胞增多;巴氏杆菌分离株对红霉素、万古霉素、林可霉素、克林霉素、四环素已产生耐药性;绵羊肺炎支原体分离株对林可霉素、盐酸四环素、氯霉素的最小抑菌浓度(MIC)均高于512μg/mL。结果显示,本次绵羊呼吸道疾病由多杀性巴氏杆菌和绵羊肺炎支原体混合感染引起,2种分离菌均已产生多重耐药。

4个绵羊品种LHCGR基因单核苷酸多态性分析

为探究绵羊LHCGR基因在4个绵羊品种之间的多态性与基因功能,本研究以杜泊羊、滩羊、小尾寒羊、滩羊和小尾寒羊杂交羊4个绵羊品种为研究对象,利用Sequenom MassARRAY®SNP技术对4个绵羊品种LHCGR基因g.75747421A>C、g.75748200T>A 2个位点进行检测,并利用相关生物信息学软件预测分析2个位点突变前后mRNA二级结构与其编码蛋白的理化性质、结构和蛋白互作等。结果表明,LHCGR基因g.75747421A>C位点在4个品种中存在3种基因型,分别是CC、CA和AA;g.75748200T>A位点在4个品种中存在AA、AT和TT 3种基因型;χ^(2)适合性检验表明,g.75747421A>C、g.75748200T>A 2个位点在4个绵羊品种中均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。生物信息学分析表明,该基因编码蛋白的相对分子质量为73599.70,理论等电点为8.30,脂肪系数为98.90,总平均亲水性为0.191,推测该蛋白为疏水性蛋白;突变前后LHCGR基因的mRNA二级结构、编码蛋白二级结构及三级结构均发生了变化;蛋白互作的结果表明,与LHCGR蛋白相互作用的蛋白质主要包括骨形态发生蛋白15(BMP15)、嗜铬粒蛋白A(CGA)、甲羟戊酸激酶(MVK)、胆固醇侧链裂解酶(CYP11A1)、鸟嘌呤核苷酸结合蛋白α亚基(GNAS)等。本研究成功筛选出4个绵羊品种LHCGR基因多态位点,为绵羊繁殖力的标记辅助选择和育种提供一定的理论依据。

精饲料霉变引起的羊黄曲霉毒素中毒诊断和治疗

养殖场经常因饲料霉变发生黄曲霉毒素中毒,但是很少进行检测确诊。该文收集羊场所饲喂的饲料和发病羊血清,用酶联免疫吸附法检测黄曲霉毒素。检测结果是每千克饲料中含60μg的黄曲霉毒素,比标准高2倍,黄曲霉毒素的阳性率为56.4%。广大羊养殖户需对症下药,减少羊场的经济损失。

牛羊布鲁氏杆菌病诊断技术及养殖场生物安全体系研究进展

布鲁氏杆菌病是人畜共患的传染病之一,严重危害人类健康和世界公共卫生安全,并对畜牧业发展造成巨大影响。目前,对于布鲁氏杆菌病尚无有效的治疗方法,只能通过诊断和作好相关生物安全措施来减少布鲁氏杆菌病的传播。本文阐述了牛羊布鲁氏杆菌病诊断技术,提出建立规模化养殖场生物安全体系,以加强养殖场的生物安全。

羊支原体肺炎防治研究进展

羊支原体肺炎又称羊传染性胸膜肺炎。该病由多种支原体引起可导致山羊或绵羊流鼻涕、咳嗽、高热、胸膜以及肺部纤维素性炎症,属接触性、易发性羊群传染病,对羊产业的健康发展造成危害。本文对羊支原体肺炎的病原学、流行病学、致病机制、防治措施及疫苗研制等方面的研究进行了阐述。

5个绵羊群体LHR基因多态性与产羔数的关联分析

实验旨在探究绵羊LHR基因rs410734874、rs401906902、rs398733991、rs4243283244个位点的多态性与5个绵羊群体产羔数之间的关系,以期为绵羊高繁殖力分子育种提供新的遗传标记。利用Sequenom Mass ARRAY®SNP技术对5个绵羊群体(杜泊、滩寒羊、杂交一代、杂交二代、横交一代)共768只绵羊LHR基因的4个位点进行检测,并与产羔数进行关联分析。结果表明:LHR基因rs401906902位点在杜泊、滩寒羊、杂交一代、杂交二代、横交一代5个群体中均表现为低度多态;rs398733991位点在滩寒羊群体中表现为中度多态,在杜泊、杂交一代、杂交二代、横交一代群体中表现低度多态;rs424328324、rs4107348742个位点在5个群体中均表现为中度多态。经Hardy-Weinberg平衡检验分析,rs401906902、rs398733991、rs4107348743个位点在5个群体均处于Hardy-Weinberg平衡状态,表明这3个位点在5个群体中已趋于稳定;rs424328324位点除横交一代羊群体外,在其他群体处于Hardy-Weinberg平衡状态;rs410734874位点在横交一代群体中与产羔数有一定的关联性,其中TT型产羔数显著高于TA型,说明rs410734874位点适用于横交一代绵羊群体多羔性状的选育;rs401906902、rs398733991、rs4243283243个位点各基因型之间产羔数差异均不显著,不适用于绵羊多羔性状的选育。本研究将为开展提高绵羊繁殖力的标记辅助选育提供参考。

绵羊冷冻精液稀释液成分的研究进展

绵羊精液的冷冻保存是人工授精技术的一项重大提升,稀释液是精子的保护剂,可以使精子寿命更长,提高受胎率。一般稀释液成分有:抗冻保护剂、抗氧化剂、维持渗透压物质、抗菌物质等。抗冻保护剂可以使精子在低温冷冻时起到保护作用,延长精子的存活时间;抗氧化剂具有抗氧化成分,可以保护精子在体外不被氧化;渗透压物质能平衡精子内外渗透压,以保护精子的正常形态;抗菌药物,可控制细菌的污染和生长,提高精子的活力。本文结合国内外相关文献对绵羊精液稀释液相关成分进行论述,以期为绵羊精液稀释液的研究提供一定的理论依据。

羊蜱蝇的生物学特征与中文种名释疑

综合多方面资料分析,对我国羊蜱蝇的分类学位置及生物学特征进行了分析。该虫无翅和平衡棒,周身有密集刚毛,主要寄生于绵羊。在我国近年较频繁的报道中,对羊蜱蝇的命名较为混乱,如绵羊蜱、绵羊虱蝇和羊蜱等,应该命名为羊蜱蝇或绵羊蜱蝇。

宁夏部分地区肉用母牛流产的病原血清学调查分析

为了调查宁夏地区流产肉用母牛5种流产相关病原的流行情况,通过采集不同地区92份有流产史的基础母牛血清样本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对5种流产相关病原抗体/抗原进行检测和分析。ELISA检测结果表明,92份样品中,5种病原抗体阳性率为98.91%(91/92),抗体阳性率由高到低分别为牛犬新孢子虫(82.61%)、牛传染性鼻气管炎病毒(69.57%)、衣原体(44.57%)、布鲁氏菌(30.43%);未检出牛病毒性腹泻病毒。混合抗体阳性率中主要以2种病原混合抗体阳性率最高(50.00%),其中牛传染性鼻气管炎病毒和牛犬新孢子虫混合抗体阳性率最高。研究结果表明,宁夏主要肉牛养殖地区均出现不同流产相关病原感染的情况,主要以混合感染为主。在肉用母牛养殖过程中,应加强对以上病原的检疫并采取相应的防控措施。

绵羊CARTPT基因的生物信息学分析

试验旨在探究绵羊CARTPT基因所编码蛋白的结构与功能,利用生物信息学软件研究其理化性质、亲疏水性、信号肽、跨膜区域、蛋白质二级结构与三级结构、亚细胞定位和蛋白结构域、糖基化和磷酸化位点,并构建不同物种的CARTPT基因的系统发育树。结果表明:绵羊CARTPT基因CDS区全序列长为351 bp,编码116个氨基酸,编码蛋白的相对分子质量12790.18 Da,理论等电点8.22,脂肪系数114.48,总平均亲水性-0.006,属于分泌蛋白,没有跨膜区域结构;二级结构中主要以α-螺旋与无规则卷曲为主;亚细胞定位分析预测该蛋白最可能在细胞外基质发挥其生物学作用,有1个跨膜结构域;该蛋白质有5个丝氨酸(Ser)、1个苏氨酸(Thr)、2个酪氨酸(Tyr)磷酸化位点;系统进化树发现绵羊与山羊亲缘关系最近。

宁夏地区某规模化奶牛场泌乳奶牛急性乳房炎病原的分离及耐药性分析

为探明宁夏地区某规模化奶牛场泌乳奶牛发生急性乳房炎的病原,并找到合适的抗生素治疗,试验对来自8头患急性乳房炎泌乳奶牛的乳样进行细菌分离培养与初步鉴定,提取细菌DNA后,采用PCR方法对分离菌的16S rRNA基因进行扩增,根据序列相似性比对与系统发育树构建结果确定分离菌的菌种,并通过药物敏感试验对分离菌的耐药性进行分析。结果表明:从8份乳样中分离出8株菌株(NX-1~NX-8),其中分离菌株NX-1、NX-2为肺炎克雷伯菌,分离菌株NX-3为粪肠球菌,分离菌株NX-4、NX-5、NX-6、NX-7、NX-8为大肠杆菌;8株分离菌株均对头孢曲松、氨苄西林、哌拉西林、庆大霉素、阿米卡星敏感;同种菌株对同种抗生素的耐药情况一致,其中2株肺炎克雷伯菌分离株(NX-1、NX-2)均对头孢唑啉、米诺环素耐药;粪肠球菌分离株(NX-3)对氨曲南、替加环素、左氧氟沙星耐药,5株大肠杆菌分离株(NX-4~NX-8)均对氨曲南耐药。说明宁夏地区某规模化奶牛场泌乳奶牛发生急性乳房炎的主要病原是肺炎克雷伯菌、粪肠球菌和大肠杆菌,其中大肠杆菌所占比例最高,可使用头孢曲松、氨苄西林、哌拉西林、庆大霉素、阿米卡星对患病奶牛进行治疗。

2020—2021年宁夏地区牛支原体血清流行病学调查与分析

为了初步掌握宁夏地区牛支原体(Mycoplasma bovis,M.bovis)病的流行情况,试验采用ELISA方法对2020—2021年宁夏地区5个城市22个县/区收集的牛血清样本进行牛支原体血清抗体检测,分析不同年份、不同城市、不同县/区血清学调查结果。结果表明:宁夏地区5个城市固原市、石嘴山市、吴忠市、中卫市和银川市牛支原体抗体的检测均呈阳性。2020年和2021年平均牛支原体抗体阳性率分别为(29.39±15.07)%、(37.58±19.52)%,2021年与2020年相比,血清牛支原体抗体阳性率差异极显著(P<0.01);不同城市间比较,固原市、中卫市、石嘴山市、吴忠市和银川市两年平均牛支原体抗体阳性率分别为(22.00±8.78)%、(35.56±14.09)%、(31.11±10.47)%、(50.00±25.91)%、(29.44±9.19)%,其中吴忠市平均牛支原体抗体阳性率最高,固原市最低;不同县/区间比较,西吉县和同心县两年的牛支原体抗体阳性率未发生变化,2021年原州区和平罗县的牛支原体抗体阳性率与2020年相比下降,其他18个县区2021年的牛支原体抗体阳性率与2020年相比均上升,其中利通区和红寺堡区两年比较差异显著(P<0.05)。说明2020—2021年宁夏地区牛支原体血清抗体阳性率呈上升趋势。

宁夏某牛场致泌乳奶牛急性死亡的产气荚膜梭菌分离鉴定及其药敏试验

为探究宁夏某牛场3头泌乳奶牛急性死亡病例的病原及其耐药性,本研究采用鉴别性培养基进行病原分离、纯化;使用牛乳培养基探究生化特性;运用分子生物学方法进行病原种类鉴定和分型;12类27种抗生素进行药物敏感性研究。结果显示,分离到的3株病原菌呈现出β溶血环,具有“汹涌发酵”的现象,均为A型产气荚膜梭菌(分别命名为S1、S2、S3)。且对氨苄西林、头孢曲松、头孢唑啉、美罗培能、哌拉西林、氨苄西林-舒巴坦敏感;对头孢拉定、恩诺沙星、头孢呋辛钠、利奈唑胺、头孢噻肟、头孢他啶、替加环素、环丙沙星、万古霉素、米诺环素、左氧氟沙星中度敏感;对链霉素、诺氟沙星、庆大霉素、磺胺甲噁唑、红霉素、四环素、克林霉素、林可霉素、阿米卡星、氨曲南耐药。可见,本研究中导致泌乳牛急性死亡的病原菌为A型产气荚膜梭菌,且此分离菌株对部分抗生素具有一定的耐药性。

5个绵羊群体ESR2基因多态性与产羔数的关联分析

为探究绵羊ESR2基因多态性与产羔性状的相关性,本研究以杜泊羊、滩寒羊、杂一代、杂二代和横交一代5个绵羊群体为研究对象,利用Sequenom Mass ARRAY?SNP技术对5个绵羊群体ESR2基因3个错义突变位点进行检测,并与其产羔数进行关联分析。结果显示,ESR2基因g.73323973C>T和g.73326795G>A位点在5个群体中均表现为中度多态(0.25<PIC<0.50);g.73353489C>A位点在滩寒羊群体中表现为低度多态(PIC<0.25),在杜泊羊、杂一代、杂二代和横交一代4个群体中表现为中度多态。产羔数关联分析表明,g.73323973C>T位点在滩寒羊群体中TT型产羔数极显著高于TC、CC型(P<0.01),说明g.73323973C>T位点适用于滩寒羊群体多羔性状的选育。通过生物信息学分析表明,3个位点突变前后ESR2蛋白的二级结构类型均发生了变化;蛋白互作网络分析表明ESR2蛋白与调控动物繁殖的相关蛋白质互作。本研究为开展提高绵羊繁殖力的分子标记辅助选育提供依据。

5个绵羊群体MTNR1A基因的多态性与产羔数的关联分析

为探究绵羊MTNR1A基因在5个绵羊群体之间的多态性与基因功能,本研究以杜泊羊、滩寒羊、杂一代、杂二代、横交一代5个绵羊群体为研究对象,利用飞行质谱检测技术对5个绵羊群体MTNR1A基因g.15118428T>C、g.15118664G>T、g.15119130C>T共3个错义突变位点进行检测,并利用相关生物信息学软件预测分析该基因编码蛋白的理化性质、结构和蛋白互作等。结果表明,MTNR1A基因g.15118428T>C和g.15118664G>T这2个位点在5个群体中均为低度多态(PIC<0.25),g.15119130C>T位点在5个群体中均表现为中度多态(0.25<PIC<0.5)。对3个位点的不同基因型与5个群体的产羔数进行关联分析,结果表明各基因型与产羔数间差异均不显著,说明这3个位点不适用于5个绵羊群体的多羔性状的选育。通过生物信息分析表明,绵羊MTNR1A蛋白理论等电点为9.58,脂肪系数为115.77,总平均亲水性为0.598,为稳定的疏水性碱性蛋白,3个位点突变前后MTNR1A基因编码蛋白二级结构均发生变化,本研究为绵羊繁殖力的标记辅助选择和育种提供一定的理论依据。