秋冬季鸡传染性喉气管炎防控要点

在我国北方因秋冬季气温波动频繁,昼夜温差较大,气候对养殖业的影响较大,容易导致动物的发病率增加。对于蛋肉鸡养殖而言,完善的饲养管理措施至关重要,特别是鸡舍内温度的控制和通风效果,一旦饲养管理不到位,将会导致鸡呼吸道疾病的发病率直线增长,其中鸡传染性喉气管炎在秋冬季更为多发。如何做好秋冬季鸡传染性喉气管炎的防制工作,将其对养殖业的不利影响降到最低成为养殖人员关注的重点问题之一。对于鸡传染性喉气管炎的防制首先要掌握该病原的特点及其流行病学,从而达到事半功倍的防控效果。

H9N2亚型禽流感病毒HA1蛋白的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立

为建立H9N2亚型禽流感病毒(AIV)抗体快速、高效的血清学检测方法,参考GenBank数据库中H9N2 AIV的HA基因序列(登录号:MK995886.1)设计并合成特异性引物,以H9N2 AIV RNA为模板,RT-PCR扩增目的基因HA1,构建pET28a-HA1重组质粒,经原核系统表达获得HA1蛋白。通过SDS-PAGE和Western-blot鉴定蛋白表达和反应原性,用纯化后的HA1重组蛋白作为包被抗原建立间接ELISA方法。结果显示,该检测方法抗原最佳包被浓度为0.2μg/mL,血清最佳稀释度为1∶160,用1%BSA溶液37℃封闭60 min效果最佳,酶标二抗最佳稀释度为1∶6 000,具有较高的特异性、灵敏性和符合率。上述结果表明,本试验成功表达并纯化了H9N2 AIV的HA1蛋白,建立的间接ELISA检测方法为H9N2 AIV的流行病学调查、免疫效果评价及临床诊断试剂盒的开发奠定了基础。